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中国乳品工业 2001年第4期29卷 14-16页

作者：陈玉铭杨晓泉赵谋明广东乐百氏食品饮料有限公司广东广州510410 华南理工大学食品与生物工程学院广东广州510641

利用sds－page电泳结合凝胶成像分析测定了乳清粉及含乳饮料中的酪蛋白、α－乳白蛋白(α－LA)和β－乳球蛋白(β-LG)的含量,探讨了两种乳蛋白提取方法对测定结果的影响。

关键词：乳蛋白 sds-page法乳饮料乳清粉含量测定分析

Tricine-sds-page法分析腮腺唾液蛋白

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华西口腔医学杂志 1999年第2期17卷 183-184页

作者：郭颖罗海燕黄宁杨美薷吴琦王伯瑶华西医科大学口腔医学院华西医科大学感染与免疫研究室

多种口腔疾病或系统性疾病的发生、发展过程中，唾液成分的质和量都可能发生改变［１］。唾液蛋白作为唾液的主要有机成分，与唾液的多种生理功能密切相关［２］。因此研究唾液蛋白对于了解机体的生理及病理状况具有重要意义。十二烷基... 详细信息

多种口腔疾病或系统性疾病的发生、发展过程中，唾液成分的质和量都可能发生改变［１］。唾液蛋白作为唾液的主要有机成分，与唾液的多种生理功能密切相关［２］。因此研究唾液蛋白对于了解机体的生理及病理状况具有重要意义。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－...

关键词：腮腺唾液唾液蛋白 sds-page法 Tricine

单抗亲和层析—sds—page法测定细胞膜抗原的分子量

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中华微生物学和免疫学杂志 1991年第4期11卷 268-271页

作者：欧阳斌刘燕等卫生部武汉生物制品研究所

sds-page法测定重组人红细胞生成素糖基化程度

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中国生化药物杂志 2001年第4期22卷 193-194页

作者：周勇程雅琴中国药品生物制品检定所北京100050

目的建立重组人红细胞生成素 (rhEPO)糖基化程度的测定方法。方法利用聚糖酶部分酶解rhEPO ,通过sds page电泳分离酶解片段 ,鉴定rhEPO的的糖基化程度。结果rhEPON 聚糖酶部分酶解的电泳图谱 ,可以明确指示N 连接糖基化程度。

关键词：重组人红细胞生成素糖基化质量控制 sds-page法测定

人肝癌组织中p53与HSP70相互作用的初步研究

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第2期19卷 195-196,199页

作者：崔崇伟杨守京刘雁平刘彦仿第四军医大学病理学教研室陕西西安710032 兰州军区总医院甘肃兰州730050

目的 :探讨人肝癌中热休克蛋白 70 (HSP70 )与 p5 3的相互作用。方法 :用免疫组织化学染色法 ,从 12例肝癌组织中筛选HSP70与 p5 3均呈阳性表达的标本 ,并以免疫共沉淀法提取之。然后用sds page及Westernblot分析双阳性标本中两种蛋白... 详细信息

目的 :探讨人肝癌中热休克蛋白 70 (HSP70 )与 p5 3的相互作用。方法 :用免疫组织化学染色法 ,从 12例肝癌组织中筛选HSP70与 p5 3均呈阳性表达的标本 ,并以免疫共沉淀法提取之。然后用sds page及Westernblot分析双阳性标本中两种蛋白的存在形式。结果 :用免疫组织化学法检测到 12例肝癌组织中有 3例为双阳性 ,用抗HSP70mAb免疫共沉淀的样品 ,可检测到 p5 3蛋白。用抗p5 3mAb免疫共沉淀的样品也可检测到HSP70蛋白。结论 :人肝癌中p5 3与HSP70以复合物的形式而存在。

关键词：肝癌热休克蛋白70 p53基因复合物免疫共沉淀法 sds-page法

猪乳中一组高分子量蛋白质的多态性及其与泌乳性能的关系

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南京农业大学学报 2003年第3期26卷 64-67页

作者：秦宜德徐银学邹思湘 Walter L Hurley 南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室伊利诺斯大学动物科学系美国厄巴纳61801

采用sds page法对 16 2头二花脸母猪和 5 0头大约克母猪乳中一组高分子量蛋白质 (HMWP)进行了检测 ,计算了该位点基因型频率、等位基因频率和遗传多样性指数 ,并运用线性模型统计方法分析二花脸母猪该位点不同基因型与母猪泌乳性能的关... 详细信息

采用sds page法对 16 2头二花脸母猪和 5 0头大约克母猪乳中一组高分子量蛋白质 (HMWP)进行了检测 ,计算了该位点基因型频率、等位基因频率和遗传多样性指数 ,并运用线性模型统计方法分析二花脸母猪该位点不同基因型与母猪泌乳性能的关系。结果表明 ,在猪种群中 ,乳中HMWP存在A (相对分子质量 14 6 80 0± 14 0 0 ) ,B ( 114 80 0± 4 0 0 ) ,C ( 10 86 0 0 )和D ( 10 14 0 0± 6 0 0 ) 4种带型 ,分别受 4个等位基因HA、HB、HC 和HD 控制。在二花脸猪乳中HMWP表现出BB、BD和DD 3种基因型 ,其频率分别为 0 6 6 6 7,0 2 716和 0 0 6 17;两个等位基因HB 和HD 频率分别为 0 80 2 5和0 1975 ;遗传多样性指数为 0 3170。大约克猪乳中HMWP表现出BB、AB和BC 3种基因型 ,其频率分别为 0 880 0 ,0 10 0 0和 0 0 2 0 0 ;等位基因HA、HB 和HC 的频率分别为 0 0 5 0 0 ,0 94 0 0和 0 0 10 0 ;遗传多样性指数为 0 1138。在二花脸猪种群中 ,不同HMWP基因型在乳糖浓度上存在显著差异 (P 0 0 5 )。

关键词：猪乳高分子量蛋白质多态性泌乳性能 sds-page法 HMWP基因型

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葡萄籽蛋白组分提取及亚基分析

食品工业 2019年第3期40卷 162-165页

作者：薛静雯王美玉闫舟王愈陈振家山西农业大学食品科学与工程学院太谷030801

以葡萄酒酿制过程中的废弃物赤霞珠葡萄籽为原料,对葡萄籽蛋白质组分的提取条件和亚基进行了相关研究。试验利用了Osborne法对葡萄籽蛋白进行分离提取,结果表明:葡萄籽清蛋白提取的最佳温度为50℃,球蛋白提取的最佳盐浓度为2%,醇溶蛋白... 详细信息

以葡萄酒酿制过程中的废弃物赤霞珠葡萄籽为原料,对葡萄籽蛋白质组分的提取条件和亚基进行了相关研究。试验利用了Osborne法对葡萄籽蛋白进行分离提取,结果表明:葡萄籽清蛋白提取的最佳温度为50℃,球蛋白提取的最佳盐浓度为2%,醇溶蛋白提取的最佳醇浓度为75%,谷蛋白提取的最佳碱浓度为0.02 mol/L。sds-page凝胶电泳结果表明:不同提取条件对葡萄籽蛋白的提取率有较大影响,但并不影响蛋白亚基组成。

关键词：葡萄籽蛋白质 Osborne分类法 sds-page法

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聚乙二醇化重组人干扰素α2b的质量检测

中国生物制品学杂志 2005年第1期18卷 48-50页

作者：张雪梅郭桥吴福泉陈云声齐影朱丽娜周丽红盛军刘晶长春生物制品研究所长春130062

目的　建立聚乙二醇化重组人干扰素α2b(PEG rhIFNα2b)的质量检测方法。方法　采用Wish细胞 VSV病毒系统 ,以CPE法测定干扰素的生物学活性 ,基质辅助激光解吸附飞行时间质谱法测定相对分子质量 ,反向高效液相法 (RP HPLC)测定纯度 ,溴... 详细信息

目的　建立聚乙二醇化重组人干扰素α2b(PEG rhIFNα2b)的质量检测方法。方法　采用Wish细胞 VSV病毒系统 ,以CPE法测定干扰素的生物学活性 ,基质辅助激光解吸附飞行时间质谱法测定相对分子质量 ,反向高效液相法 (RP HPLC)测定纯度 ,溴化氰裂解 sds page法测定肽图 ,等电聚焦电泳法测定等电点 ,紫外分光光度法测定紫外吸收光谱。结果　聚乙二醇化重组人干扰素α2b的比活为 6 . 0× 10 6～ 10 . 0× 10 6IU/mg蛋白 ,相对分子质量约为 6 2 6 0 0 ,等电点在 5 . 2 0～ 6. 5 5之间 ,紫外最大吸收峰约在 2 78nm波长处。结论　所建立的检测方法可控制聚乙二醇化重组人干扰素α2b质量。

关键词：聚乙二醇化重组人干扰素高效液相法 FN g蛋白 RP-HPLC 紫外分光光度法定干质量检测方法 sds-page法

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动物药蜈蚣中蛋白质的分析方法研究

动物药蜈蚣中蛋白质的分析方法研究

作者：陈霞南京中医药大学

学位级别：硕士

蜈蚣为节肢动物门唇足纲整形目蜈蚣科动物,具有息风镇痉、通络止痛、攻毒散结等功效。我国蜈蚣资源种类较多,分布也较广,除有少棘巨蜈蚣(Scolopendra subspinipes mutilans L. Koch)外,还有黑头蜈蚣(Scolopendra negrocapitis Zhang et ... 详细信息

蜈蚣为节肢动物门唇足纲整形目蜈蚣科动物,具有息风镇痉、通络止痛、攻毒散结等功效。我国蜈蚣资源种类较多,分布也较广,除有少棘巨蜈蚣(Scolopendra subspinipes mutilans L. Koch)外,还有黑头蜈蚣(Scolopendra negrocapitis Zhang et Wang)多棘蜈蚣(Scolopendra multidens Newport)、墨江蜈蚣(Scolopendra mojiangica Zhang et Chi)以及哈氏蜈蚣(Scolopendra hedaani Brandat)等,其中少棘巨蜈蚣为药典收载的品种。药用蜈蚣大多指的是少棘巨蜈蚣(主要分布于江苏、湖南、湖北、浙江和四川)、墨江蜈蚣(主要分布于云南)、多棘蜈蚣(主要分布于湖北、广西、广东)和黑头蜈蚣(主要分布于云南)蜈蚣主要含有蛋白质、氨基酸、脂肪酸、微量元素等,其中蛋白质为其主要成分,且药理研究也发现蜈蚣中蛋白质具有一定的抗凝、抗肿瘤活性。但是目前对于蜈蚣中蛋白质的含量测定大多是基于凯氏定氮法,未见蜈蚣中蛋白质的定性鉴别方法研究的报道。所以本文建立了蜈蚣中蛋白质的含量测定方法和定性鉴别方法,为蜈蚣蛋白质的活性研究以及动物药中蛋白质定性、定量分析提供方法。本文开展以下几方面的研究工作：一、蜈蚣中蛋白质的定量方法研究：采用3种常用的蛋白质定量分析方法(Bradford法、Lowry法和BCA法)测定蜈蚣中蛋白质的含量,结合sds-page法对分析结果进行比较,发现Lowry法和BCA法测定蜈蚣蛋白浓度时,存在一定的假阳性,Bradford法适用于蜈蚣中蛋白质定量分析。并对Bradford法进行方法学考察,蛋白质浓度在0.1671～1.0024 mg/mL范围内,呈良好的线性关系r=0.9999,加样回收率为94.15%～99.41%。对不同品种、不同产地蜈蚣中蛋白质的含量进行测定,其中黑头蜈蚣中蛋白质含量较高,墨江蜈蚣中蛋白质含量较低。二、蜈蚣中蛋白质的sds-page法定性研究：采用sds-page凝胶电泳法对蜈蚣中蛋白质进行定性分析,对蜈蚣蛋白质上样量进行考察,上样量在7～14μg范围内电泳图上蛋白条带清晰。不同品种、不同产地蜈蚣中蛋白质电泳条带的深浅基本上与蛋白质含量成正相关关系;相同上样量下,不同品种、不同产地蜈蚣中蛋白质条带深浅及分子量分布基本一致;且分子量主要集中在170 kD、130 kD、120 kD、100kD、70 kD左右。三、蜈蚣中蛋白质nanoLC-MS/MS定性方法研究建立了蜈蚣中蛋白质的nanoLC-MS/MS定性分析方法,较系统的分析了蜈蚣中蛋白质胶内酶解和直接酶解产物,鉴定蜈蚣中蛋白质。建立的nanoLC分析条件为：上样流速5μL/min,洗脱流速300nL/min,上样量8μg,经Chrom XP CL富集柱富集后,再经Chrom XP-C18毛细管柱分离,流动相A为2%乙腈(0.1%甲酸),B为98%乙腈(0.1%甲酸)梯度洗脱,分析时间90 min;采用ESI-Q-TOF MS,并在IDA采集模式下分析鉴定蜈蚣蛋白质。用ProteinPilot软件进行蛋白质分析,在Uniprot中节肢动物门(Arthropoda)蛋白质数据库(***)中进行检索。胶内酶解鉴定到73种蛋白质,直接酶解鉴定到96种蛋白质,二者含26种相同的蛋白质,分析了蜈蚣蛋白质的生物进程、细胞中的定位以及功能活性。结果表明蜈蚣蛋白质具有结合、酶催化、肌动等功能活性,其中结合活性的蛋白质占的比例较大,且多为能量代谢进程中的相关酶类。利用已经建立的nanoLC-MS/MS方法对不同品种、不同产地蜈蚣中蛋白质进行比较分析,发现不同产地蜈蚣中蛋白质没有种类上的差别,不同品种蜈蚣中蛋白质存在差异,并对差异蛋白质进行分析。四、蜈蚣中抗凝相关蛋白质的分离纯化方法探索本文比较研究了凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶时间(APTT).凝血酶原时间(PT)法用于蜈蚣中蛋白质的抗凝活性检测,发现蜈蚣蛋白质溶液低浓度时能够延长TT时间,高浓度时才能延长APTT时间,高低浓度蛋白质溶液对延长PT时间都没有作用。故选用TT法作为蜈蚣中抗凝活性蛋白质的筛选方法。采用硫酸铵分级沉淀法、超滤法和强阴离子交换色谱法分别对蜈蚣中蛋白质进行分离,并对各部位蛋白进行抗凝活性检测。结果表明(1)不同浓度硫酸铵沉淀的蜈蚣蛋白质都有一定的抗凝活性。(2)超滤法中发现分子量小于10 kD的蛋白抗凝活性较高,而10～30 kD、30～100 kD以及大于100 kD蛋白的抗凝活性与空白组相比都有显著性差异,提示蜈蚣中抗凝活性蛋白的分子量分布较广。(3)强阴离子交换色谱法共分离得到6个洗脱峰,其中峰2、峰3具有显著延长凝血酶时间的作用,有待进

关键词：蜈蚣蛋白质 Bradford法 sds-page法 nanoLC-MS/MS法分析方法

垂直板sds-page分析尿蛋白组分及临床应用的初步研究

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包头医学院学报 2011年第2期27卷 10-11页

作者：秦艳晶高丽君秦文斌包头医学院血红蛋白研究室内蒙古包头014010

目的:利用垂直板sds-page法进行尿蛋白谱分析,以区分尿蛋白类型。方法:收集患者及正常人体尿液,直接做垂直板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page),用考马斯亮蓝染色,肉眼判定结果。结果:根据尿蛋白电泳图谱区分尿中含有不同分... 详细信息

目的:利用垂直板sds-page法进行尿蛋白谱分析,以区分尿蛋白类型。方法:收集患者及正常人体尿液,直接做垂直板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page),用考马斯亮蓝染色,肉眼判定结果。结果:根据尿蛋白电泳图谱区分尿中含有不同分子量蛋白来判断属于肾小球性、肾小管性、混合性、溢出性及生理性蛋白尿。结论:本法分析尿蛋白组分操作简单方便、成本低、相对省时、结果直观易判定,适于推广使用。

关键词： sds-page法尿蛋白电泳肾脏疾病