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国际呼吸杂志 2013年第9期33卷 643-651页

作者：李娟沈奕钱艳黄茂南京医科大学第一附属医院呼吸科

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）Ⅰ型受体拮抗剂sb 431542对慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠模型气道炎症及气道重塑的影响,为哮喘的治疗提供新思路。方法将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组及sb 431542组,每组10... 详细信息

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）Ⅰ型受体拮抗剂sb 431542对慢性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠模型气道炎症及气道重塑的影响,为哮喘的治疗提供新思路。方法将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组及sb 431542组,每组10只;卵清蛋白（OVA）致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型;布地奈德组和sb 431542组分别给予布地奈德雾化吸入和sb 431542滴鼻,每周3次。HE和Masson染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况;AB PAS染色观察杯状细胞增生情况;免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达;酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测BALF中IL-4、IL-5、TGF-β1、MMP-9、TIMP-1水平及血清总IgE水平;免疫印迹法（Western blot）测定各组小鼠肺组织中Smad3、p Smad3及Smad7蛋白表达。结果哮喘组与正常组相比,嗜酸粒细胞浸润增多,气道管腔狭窄,平滑肌层增厚,胶原纤维增生;布地奈德组上述改变均较哮喘组轻;sb 431542组嗜酸粒细胞浸润较哮喘组减轻,但仍高于正常组及布地奈德组,平滑肌层增厚、胶原纤维增生较哮喘组明显减轻（P0.05）。与正常组比较,哮喘组小鼠支气管***及α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径显著增加（Psb 431542组小鼠支气管AB-PAS及α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径低于哮喘组（Psb 431 542组与哮喘组比较差异无统计学意义（P>0.05）。MMP-9、TIMP-1在哮喘组的表达明显高于正常组（Psb 43542组的表达低于哮喘组（P0.05）。Western blot检测显示,各组小鼠肺组织Smad3的表达差异无统计学意义（P>0.05）;哮喘组p-Smad3表达明显高于正常组（Psb431542组p-Smad3表达低于哮喘组（Psb 431 542组Smad7表达高于哮喘组（P0.05）。结论 sb 431542能显著减轻哮喘小鼠细胞外基质沉积及平滑肌增厚,延缓哮喘小鼠气道重塑进程,该作用可能部分与其调节MMP-9、TIMP-1的表达有关。sb 431 542对哮喘小鼠气道炎症浸润无明显改善,说明哮喘气道炎症可能不依赖于TGF-β1/Smads通路。

关键词：哮喘气道重塑转化生长因子β1 sb 431542

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TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞调控作用的研究

TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞调控作用的研究

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美丽人生和谐世界——中华医学会第七次全国医学美学与美容学术年会、中华医学会医学美学与美容学分会20周年庆典暨第三届两岸四地美容医学学术论坛

作者：熊杰余文林肖强曾东李勤广州军区广州总医院整形外科全军激光整形中心

目的探讨TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。方法将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 KO型)分为六组:野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+sb 431542组、野生型FB+sb... 详细信息

目的探讨TGF-β1/Smad 3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。方法将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 KO型)分为六组:野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+sb 431542组、野生型FB+sb 431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组和Smad3 KO FB+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后,直接以TGF-β1刺激或经sb 431542预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞抽提总RNA,以实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad 3、PCNA、MMP 2、MMP 9和TIMP-1的变化情况,细胞培养液上清经离心超滤浓缩后进行明胶酶谱分析,检测MMP-2和MMP-9的活性。结果 TGF-β1促进成纤维细胞中TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP 2、MMP 9的表达,抑制TIMP-1表达;抑制Smad 3可显著增加MMP 2和MMP 9的表达并降低TIMP-1表达。结论 Smad 3抑制TGF-β1的自身正反馈,参与促进成纤维细胞增殖的信号途径,同时还对MMP 2/9的表达起负向调控作用而对TIMP-1起正向调控作用。

关键词：转化生长因子β1 Smad 3 成纤维细胞创面愈合基因敲除 sb 431542

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TGF-β1诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转分化的机制研究

TGF-β1诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转分化的机制研究

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作者：熊杰余文林肖强曾东李勤广州军区广州总医院整形外科全军激光整形中心

目的探讨TGF-β1诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的可能途径和调控机制。方法将小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 Knockout型)分为9组:野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+sb 431542组、野生型FB+sb 431542+TGF-β1组... 详细信息

目的探讨TGF-β1诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的可能途径和调控机制。方法将小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 Knockout型)分为9组:野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+sb 431542组、野生型FB+sb 431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组、Smad 3 KO FB+TGF-β1组、野生型FB+sb 203580+TGF-β1组、野生型FB+PD 98059+TGF-β1组和野生型FB+SP600 125+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后,直接以TGF-β1刺激或经上述各激酶抑制剂预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞,一部分以单细胞RT-PCR检测α-SMA阳性表达百分比,另一部分细胞抽提总RNA后采用实时荧光定量RT-PCR检测α-SMA的表达水平变化。结果 Smad 3 KO组与sb 431542组的α-SMA表达水平和阳性百分比显著升高(Smad 3 KO FB组vs野生型FB组;野生型FB+sb 431542+TGF-β1组vs野生型FB+sb 431542组;Smad 3 KO FB+TGF-β1组vs Smad 3 KO FB组,Psb 203580组和SP600125组中α-SMA表达水平和阳性百分比升高的作用则被显著抑制(野生型FB+sb 203580+TGF-β1组、野生型FB+SP 600125+TGF-β1组vs野生型FB+TGF-β1组,P<0.05)。结论在TGF-β1诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化过程中,Smad3途径介导抑制作用,而p38/MAPK、JNK/MAPK途径则介导正向调节作用。

关键词：转化生长因子β1 Smad3 成纤维细胞肌成纤维细胞转分化基因敲除激酶抑制剂 sb 431542 sb 203580 PD 98059 SP 600125

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