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胃癌组织中LC3、ATG5和satb2-as1在不同部位表达与临床病理特征及预后的相关性

实用癌症杂志 2023年第2期38卷 207-212页

作者：袁冬冬温艳艳何慧丽聂志勇洪永贵吴涛河南省安阳市肿瘤医院河南科技大学第四附属医院455000

目的探究胃癌组织中LC3、ATG5和satb2-as1在不同部位表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取胃癌患者50例,收集患者临床资料。免疫组化法检测LC3、ATG5表达,以及RT-PCR检测satb2-as1表达,分析其在不同部位的表达与临床病理特征的... 详细信息

目的探究胃癌组织中LC3、ATG5和satb2-as1在不同部位表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取胃癌患者50例,收集患者临床资料。免疫组化法检测LC3、ATG5表达,以及RT-PCR检测satb2-as1表达,分析其在不同部位的表达与临床病理特征的关系。采用多因素回归模型分析影响胃癌预后的独立因素。结果胃癌中LC3在癌周和癌巢表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移情况有关(Psatb2-as1在癌周表达与患者肿瘤分化程度、肿瘤最大直径有关(Psatb2-as1在癌巢表达与患者肿瘤分化程度、肿瘤最大直径和临床分期有关(Psatb2-as1表达是影响胃癌预后的因素(Psatb2-as1表达是影响胃癌预后的独立危险因素(Psatb2-as1表达与临床病理特征存在相关性,癌巢组织LC3、ATG5和satb2-as1表达可作为预测胃癌患者预后的生物标志物。

关键词：胃癌 LC3 ATG5 satb2-as1 临床病理特征预后

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长链非编码RNA satb2-as1调控satb2表达介导结直肠癌发生发展的分子机制

长链非编码RNA SATB2-AS1调控SATB2表达介导结直肠癌发生发展的分...

引用

作者：蒋东梅南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景及目的:结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)是人类第二大常见的恶性肿瘤,在全球范围内,其患病率占总人口 9.7%。尽管自1990年以来结直肠癌死亡率以每年约3%的速度逐步下降,但它仍然是第三位的癌症死亡原因,给社会发展及人类的... 详细信息

研究背景及目的:结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)是人类第二大常见的恶性肿瘤,在全球范围内,其患病率占总人口 9.7%。尽管自1990年以来结直肠癌死亡率以每年约3%的速度逐步下降,但它仍然是第三位的癌症死亡原因,给社会发展及人类的生命健康带来了极大的威胁。在我国,随着国民经济发展和居民饮食结构的改变,结直肠癌发病率在所有癌症发病率中居第三位,且呈逐渐上升的趋势。目前,临床上对结直肠癌的治疗主要是以手术为主的综合治疗,虽经过多年的艰苦探索,但临床疗效并无显著改善,结直肠癌患者最终不可避免地出现肿瘤复发和转移,患者5年生存率未见明显提高。因此,寻找新的结直肠癌早期诊断标志物、阐明结直肠癌发生发展的分子机制、鉴定新的治疗靶点是抑制结直肠癌肿瘤演进、降低复发和死亡率的关键。恶性肿瘤的发生是一个多因素作用、多基因参与并经过多个阶段才最终形成的极其复杂的生物学现象。以往的肿瘤相关基因研究一直集中于编码蛋白基因,然而随着高通量测序等技术的不断发展和完善,大量长片段的非编码RNA被人们所发掘,它们在生命活动中的重要意义也逐渐得到揭示,为研究肿瘤相关新基因提供了一个新的视角和重要源泉,并已成为研究的热点。LncRNAs是一类转录本长度超过200 nt,不具有完整的开放阅读框不能编码蛋白的RNA分子。研究发现LncRNAs参与了包括染色体沉默、基因组印迹、染色质修饰、转录激活、转录后调控、蛋白质功能调节等多种十分重要的生命活动调控过程,并且在多种人类肿瘤的发生发展中扮演着极其重要的角色。本课题组前期收集不伴有淋巴结转移、伴有淋巴结转移的结直肠癌组织及正常肠粘膜组织进行LncRNAs差异表达谱分析,挖掘出一簇在结直肠癌组织中差异表达的LncRNAs;其中LncRNA satb2-as1(以下简称satb2-as1)在结直肠癌组织中表达明显低于正常肠粘膜组织,提示satb2-as1表达异常可能与结直肠癌密切相关,然而其确切的生物学功能及作用机制尚不明确。本研究旨在探讨satb2-as1在结直肠癌发生发展中的作用及其可能的机制,进而为结直肠癌早期诊断和治疗提供新的策略,具有重要的科学意义和临床应用价值。方法:1.采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测了 50对结直肠癌及其配对正常粘膜组织以及结直肠癌细胞株和正常肠上皮细胞株中satb2-as1表达的情况。2.采用慢病毒感染方法构建稳定过表达satb2-as1的结直肠癌细胞株和对照细胞株;采用CCK-8实验、平板克隆实验检测细胞的体外增殖能力,流式细胞术分析其细胞周期的改变;划痕实验和Transwell实验检测细胞体外迁移能力;裸鼠皮下成瘤实验观察肿瘤细胞在裸鼠体内成瘤能力。3.采用RNAi的方法有效沉默satb2-as1的表达,利用体外功能实验观察结直肠癌细胞的生物学功能变化。4.检测结直肠癌组织中satb2的表达水平,并分析其与satb2-as1的相关性;检测satb2-as1过表达的结直肠癌细胞中satb2 mRNA的表达水平,观察satb2-as1对satb2的调控效应。5.生物信息学分析并结合RNA免疫沉淀(RNA Immunoprecipitation,RIP)及RNA pull down技术鉴定与satb2-as1相互结合的表观遗传修饰物,并观察satb2-as1以及表观遗传修饰物对satb2的调控效应。6.人工干预表观遗传修饰物及satb2表达,进行功能实验,观察二者变化对satb2-as1作用的逆转效应。结果:***2-as1在结直肠癌组织及细胞株中的表达检测利用Real-time PCR方法检测9株结直肠癌细胞、正常肠黏膜上皮细胞和50对结直肠癌及配对正常结直肠粘膜组织中satb2-as1的表达情况,结果显示satb2-as1在9株结直肠癌细胞株中的表达水平明显低于正常对照细胞;在癌组织中其表达水平也明显低于配对正常组织(P26)。2.过表达satb2-as1对结直肠癌细胞生物学功能的影响;利用慢病毒感染的方法把带有外源性satb2-as1的载体及空载体病毒上清液分别感染LOVO及M5细胞,利用流式细胞术分选及表达水平鉴定,成功构建稳定过表达 satb2-as1 的细胞株(LOVO/satb2-as1,M5/satb2-as1)及对照细胞株(LOVO/MOCK,M5/MOCK),而后进行体内外功能实验。CCK-8增殖实验结果显示:与对照细胞相比,LOVO/satb2-as1及M5/satb2-as1细胞的增殖能力明显下降,差异有统计学意义(FLOVO=43.135,P<0.0001;FM5=61.586,P<0.0001);平板克隆实

关键词：结直肠癌 satb2-as1 长链非编码RNA 乙酰化 satb2

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