检索结果-南通市图书馆

乙型脑炎减毒活疫苗病毒sa14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2007年第6期20卷 419-421页

作者：刘志文俞永新张海林王志伟贾丽丽章域震董关木张云中国药品生物制品检定所疫苗一室北京100050 云南省地方病防治所大理671000

目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗sa14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗sa14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK2... 详细信息

目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗sa14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗sa14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK21细胞中培养,得到sa14-14-2M1C1病毒液。应用空斑形成单位法测定病毒滴度,再进行小鼠脑内毒力测定和乳鼠脑内回传后毒力返祖试验。提取病毒RNA,RT-PCR扩增E基因片段,测序后与sa14-14-2原株的E基因序列进行比较分析。结果sa14-14-2M1C1病毒液滴度达1.4×107PFU/ml,小鼠脑内毒力测定结果无小鼠发病死亡,乳鼠脑内传代对小鼠的脑内致病力很低,毒力为1.9LgLD50/0.03ml,小于《中国药典》规定的3.0LgLD50,且皮下注射未见小鼠发病死亡。扩增出的E基因片段序列与原株相比较,只有E区1340位一个核苷酸的变化A→G,导致E447位1个氨基酸的改变D(Asp)→G(Gly),此差异位点不是sa14-14-2株发生基因变异的8个位点之一。结论sa14-14-2疫苗株病毒经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后,其生物学(弱毒)特性和基因特征(E区8个氨基酸突变)未发生改变,进一步证实了该病毒的稳定性。

关键词：流行性乙型脑炎 sa14-14-2株三带喙库蚊生物学特性分子生物学特性

流行性乙型脑炎病毒sa14-14-2株E蛋白基因在原核细胞中的高效表达及其表达产物的抗原性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病杂志 2003年第5期19卷 31-35页

作者：杨耀武齐香荣陈德胜何孔旺陈溥言沈国顺南京农业大学动物医学院传染病组农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室南京210095 江苏省农业科学院畜牧兽医研究所沈阳农业大学畜牧兽医学院动物医学系

目的　获得JEVE蛋白基因并使其在E coli中高效表达 ,以研究其抗原活性 ,为进一步研制ELIsa早期诊断试剂盒奠定基础。方法　根据已发表的JEVsa - 14 - 14 - 2减毒株序列 ,设计一对特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段 ,并... 详细信息

目的　获得JEVE蛋白基因并使其在E coli中高效表达 ,以研究其抗原活性 ,为进一步研制ELIsa早期诊断试剂盒奠定基础。方法　根据已发表的JEVsa - 14 - 14 - 2减毒株序列 ,设计一对特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段 ,并将其克隆入 pET - 32a(+)表达载体中 ,构建重组融合表达载体pET -E ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后 ,利用IPTG诱导获得高效表达。结果　扩增的E蛋白基因片段长 1113bp ,编码 371个氨基酸残基 ,该基因片段与国内发表的减毒株sa14 - 14 - 2碱基序列同源性为 10 0 %。表达产物分子量约为 6 2kD ,经Westernblotting分析表明表达产物具有较好的抗原性。结论　通过序列分析表明 ,我国的JEVsa - 14 - 14 - 2减毒株未发生基因突变。表达产物的稳定高效表达及其抗原特异性分析为今后ELIsa早期诊断试剂盒的研制提供了依据。

关键词：流行性乙型脑炎病毒 sa14-14-2株 E蛋白基因表达原核细胞抗原性基因克隆

猪乙型脑炎病毒sa14-14-2疫苗株基础种子的鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽药杂志 2014年第7期48卷 15-18页

作者：巢伟张桂红徐雷湖南中岸生物药业有限公司长沙410100

建立了猪乙型脑炎活疫苗基础种子库,对三批基础种子进行了鉴定。结果表明,三批猪乙型脑炎基础种子无外源病毒污染,对敏感实验动物小鼠、乳猪和怀孕母猪接种均安全、无异常反应,原代地鼠肾细胞传代至F12代,免疫原性保持稳定、毒力不返强... 详细信息

建立了猪乙型脑炎活疫苗基础种子库,对三批基础种子进行了鉴定。结果表明,三批猪乙型脑炎基础种子无外源病毒污染,对敏感实验动物小鼠、乳猪和怀孕母猪接种均安全、无异常反应,原代地鼠肾细胞传代至F12代,免疫原性保持稳定、毒力不返强。由此可见,猪乙型脑炎sa14-14-2疫苗株基础种子无外源病毒污染,具有可靠安全性和良好、稳定的免疫原性,可用于疫苗生产,研究为研制猪乙型脑炎活疫苗打下基础。

关键词：猪乙型脑炎病毒 sa14-14-2株基础种子鉴定

乙型脑炎减毒活疫苗生产株sa14-14-2全基因组序列测定及基因遗传稳定性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学免疫学进展 2017年第1期45卷 22-26页

作者：黄敏袁良玉吕冰凌潘海龙卓金蓉成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室四川成都610023

目的对乙型脑炎减毒活疫苗生产株sa14-14-2株进行全基因组序列测定和分析,并观察该生产株在疫苗制备过程中的基因遗传稳定性。方法根据DNA序列数据库(Gen Bank)公布的sa14-14-2株的序列,设计合成7对引物,提取疫苗生产株sa14-14-2及其工... 详细信息

目的对乙型脑炎减毒活疫苗生产株sa14-14-2株进行全基因组序列测定和分析,并观察该生产株在疫苗制备过程中的基因遗传稳定性。方法根据DNA序列数据库(Gen Bank)公布的sa14-14-2株的序列,设计合成7对引物,提取疫苗生产株sa14-14-2及其工作种子批生产的3批原液、3批成品疫苗的病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增sa14-14-2株的cDNA片段,分别克隆到pGEM-T载体,转化至大肠埃希菌DH5α中,挑取阳性菌落克隆、鉴定后测定全序列并对序列进行比较分析,观察毒株在传代的过程中病毒滴度的稳定性。结果乙型脑炎减毒活疫苗生产株sa14-14-2株基因组全长10 976 bp,编码3 433个氨基酸。3批原液和3批成品疫苗的基因组全长为10 977 bp,比较分析发现,在3'端非编码区10 701处多一个G核苷酸的插入。与DNA序列数据库(Genbank)登录号为D90195的全长序列同源性分别是99.9%、99.9%、99.9%、99.9%、99.8%、99.9%、99.8%,其中E蛋白的同源性均为100%。sa14-14-2生产株的病毒滴度为7.22 lg PFU/mL,原液和成品疫苗的滴度分别为7.32、7.23、7.32、6.86、6.92、6.70 lg PFU/mL。结论乙型脑炎减毒活疫苗生产株sa14-14-2基因稳定,具有良好的一致性,为乙型脑炎减毒活疫苗的质量的稳定性提供了可靠依据。

关键词：乙型脑炎减毒活疫苗 sa14-14-2株全基因组序列 E蛋白遗传稳定性

乙型脑炎病毒sa_(14)-14-2减毒疫苗株的生物学和基因稳定性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2008年第10期21卷 833-837页

作者：许乐燕徐闻青徐帆洪王兵张秀娟上海生物制品研究所疫苗二室上海200052

目的研究乙型脑炎病毒(JEV)sa14-14-2减毒疫苗株传代过程中的生物学和基因稳定性,为疫苗的安全性和免疫原性提供依据。方法将JEVsa14-14-2减毒疫苗株PHKC7代病毒在原代地鼠肾细胞(PHKC)上连续传代,检测各代次病毒的培养特性以及第8、12... 详细信息

目的研究乙型脑炎病毒(JEV)sa14-14-2减毒疫苗株传代过程中的生物学和基因稳定性,为疫苗的安全性和免疫原性提供依据。方法将JEVsa14-14-2减毒疫苗株PHKC7代病毒在原代地鼠肾细胞(PHKC)上连续传代,检测各代次病毒的培养特性以及第8、12、17和22代病毒的安全性及免疫原性;对起止代次病毒(PHKC8和22代)进行全基因组序列测定,对中间代次病毒(PHKC12和17代)的结构蛋白基因进行测序,并与基因库乙脑病毒sa14-14-2株(D90195)比较。结果各代次病毒产生的细胞病变基本一致,病毒滴度在17代前较稳定;在BHK21细胞上形成的蚀斑形态一致;小鼠脑内的致病力未发生变化,乳鼠传代返祖试验高代次病毒毒力有升高趋势。8、12、17和22代病毒免疫小鼠后,对P3强毒攻击均具有保护作用。E蛋白核苷酸和氨基酸序列,PHKC8代与D90195完全一致;而PHKC12、17和22代出现单个碱基(第2142或2143位)突变,导致E389氨基酸改变(D→N或D→A),但并非回复突变。4个代次病毒的PrM-C区结构蛋白基因均未发生变化。PHKC8、22代病毒的其他核苷酸突变发生在基因组非结构蛋白区和3′端非编码区;全序列PHKC8和22代与D90195比较,发现7～8个核苷酸不同,导致3～4个氨基酸的差异,核苷酸和氨基酸的同源性分别大于99.93%和99.88%,且以上突变不存在于明确的相关减毒位点上。结论JEVsa14-14-2减毒疫苗株在PHKC上连续传15代,仍保持高度的生物学和基因稳定性,疫苗生产用病毒控制在10代以内较为安全。

关键词：乙型脑炎减毒活疫苗 sa14-14-2株基因稳定性生物学稳定性

乙型脑炎减毒活疫苗(sa_(14-14-2))病毒原液及成品疫苗的稳定性观察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物制品学杂志 2009年第12期22卷 1196-1198页

作者：刘少祥彭维刘盛涛刘晓华吴玉权余可易维维周卫成都生物制品研究所病毒性疫苗室成都610023

目的观察乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗(sa14-14-2)病毒原液及成品疫苗的稳定性。方法取3批乙脑减毒活疫苗病毒原液,分别于20～25、2～8、-18～-22及-38～-42℃储存,间隔一定时间取样,检测病毒滴度;将2～8、-18～-22及-38～-42℃储存的在观... 详细信息

目的观察乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗(sa14-14-2)病毒原液及成品疫苗的稳定性。方法取3批乙脑减毒活疫苗病毒原液,分别于20～25、2～8、-18～-22及-38～-42℃储存,间隔一定时间取样,检测病毒滴度;将2～8、-18～-22及-38～-42℃储存的在观察末期符合规定的病毒原液制备成品疫苗,观察其于2～8℃储存的稳定性。结果3批疫苗病毒原液在20～25℃储存16h、2～8℃储存12d、-18～22℃冻存3个月及-38～-42℃冻存6个月,病毒滴度均符合《中国药典》三部(2005版)的要求;由2～8℃储存12d、-18～-22℃冻存3个月、-38～-42℃冻存6个月的病毒原液所制备的成品疫苗2～8℃储存24个月,病毒滴度下降缓慢,且热稳定性良好,符合《中国药典》三部(2005版)的要求。结论乙脑减毒活疫苗病毒原液的稳定性随温度的变化而变化,温度越低,稳定性越好;所制备的相应成品疫苗,在观察期内稳定性良好。

关键词：乙型脑炎减毒活疫苗 sa14-14-2株原液成品病毒滴度稳定性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

嵌合乙型脑炎活疫苗的期临床试验

国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册） 2005年第3期28卷 139-140页

作者：赵玉麟

乙型脑炎病毒疫苗株与树突状细胞相互作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型脑炎病毒疫苗株与树突状细胞相互作用研究