检索结果-南通市图书馆

华南农业大学学报 2017年第1期38卷 58-62页

作者：江彤单文书夏伟伟张享享蒋西子安徽农业大学植物保护学院安徽合肥230036

【目的】探讨南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black-streaked dwarf virus,sRBsDV)安徽分离物(sRBsDVAn Hui-HN2)的遗传特性,并获得原核表达的P5-2蛋白。【方法】RT-PCR扩增sRBsDV s5片段,克隆、测序并进行序列分析。将s5-2基因插... 详细信息

【目的】探讨南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black-streaked dwarf virus,sRBsDV)安徽分离物(sRBsDVAn Hui-HN2)的遗传特性,并获得原核表达的P5-2蛋白。【方法】RT-PCR扩增sRBsDV s5片段,克隆、测序并进行序列分析。将s5-2基因插入原核表达载体,重组载体转化大肠埃希菌并用IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化融合蛋白,sDs-PAGE分析P5-2蛋白的表达情况。【结果】sRBsDV-An Hui-HN2 s5片段全长3 167 bp,包含s5-2基因全长612 bp,编码204个氨基酸。序列比对结果显示,sRBsDV-An Hui-HN2 s5片段与其他sRBsDV分离物s5片段的序列相似性极高,达99.0%~99.7%,而与斐济病毒属(Fijivirus)其他成员s5片段的序列相似性较低,仅为38.0%~71.3%;构建的s5片段系统发育树表明sRBsDV和RBsDV聚成1个分支,其中6个sRBsDV分离物聚成1个亚分支。原核表达获得相对分子质量约为47 000的重组蛋白,Western blot分析显示,GsT单抗能够与重组融合蛋白发生特异性反应。【结论】sRBsDV各分离物之间亲缘关系非常近,而与Fijivirus其他成员亲缘关系较远,原核表达获得的融合蛋白为靶标蛋白。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒 s5片段 s5-2基因原核表达

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