检索结果-南通市图书馆

RIsK信号通路在1-磷酸鞘氨醇后适应减轻心肌缺氧/复氧损伤中的作用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

RISK信号通路在1-磷酸鞘氨醇后适应减轻心肌缺氧/复氧损伤中的作用

作者：郑新彬天津医科大学

学位级别：硕士

目的：研究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate, s1p)后适应对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其与pI3K/Akt和ERK1/2信号通路的关系。方法： 1.大鼠H9c2细胞的缺氧/复氧模型的建立用含10%FBs的DMEM培养基培养24h后,... 详细信息

目的：研究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate, s1p)后适应对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其与pI3K/Akt和ERK1/2信号通路的关系。方法： 1.大鼠H9c2细胞的缺氧/复氧模型的建立用含10%FBs的DMEM培养基培养24h后,换用预先经95%N2+5%CO2昆合气饱和的缺氧液,然后放入通有95%N2+5%CO2的37℃培养箱缺氧培养若干小时,复氧时换用无FBs的DMEM培养基,在正常培养条件下培养若干小时,MTT测定细胞存活率。选择适宜的缺氧复氧时间,建立缺氧/复氧模型。 2.s1p后适应对H9c2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其(?)pI3K/Akt信号通路的关系。将培养的大鼠H9c2细胞随机分为5组,即(1)正常对照组(C组);(2)缺氧/复氧(H/R)组;(3)s1p组;(4)s1p+LY组;(5)LY组。C组换用无血清的DMEM培养;H/R组缺氧培养16h,复氧培养4h;s1p组在复氧时加入终浓度为4μM s1p复氧培养4h;s1p+LY组在复氧时加入终浓度为10μM的LY294002(pI3K/Akt抑制剂)预处理30min,再同时加入终浓度为4μM sIp复氧培养3.5h;LY组在复氧时加入终浓度为10μM的LY294002复氧培养4h。MTT法测定各组细胞存活率;比色法测定细胞培养液中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、总超氧化物歧化酶(Total super oxide dismutase, T-sOD)和锰超氧化物歧化酶(Manganese super oxide dismutase, Mn-sOD)活力;Fluo-3AM标记细胞内游离钙离子,激光共聚焦显微镜检测荧光强度;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;Western Blot法测定H9c2细胞中p-Akt(?)t-Akt蛋白的表达水平。 3.s1p后适应对H9c2胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其(?)ERK1/2信号通路的关系。将培养的大鼠H9c2细胞随机分为5组,(1)～(3)组同上;(4) s1p+pD组：(5)pD组。s1p+pD组在复氧时加入终浓度为50μM的pD98059(ERK1/2抑制剂)预处理30rmin,再同时加入终浓度为4μM s1p复氧培养3.5h;pD组在复氧时加入终浓度为50μM的pD98059复氧培养4h。MTT法测定各组细胞存活率;比色法测定细胞培养液中MDA含量、T-sOD和Mn-sOD活力;Fluo-3AM标记细胞内游离钙离子,激光共聚焦显微镜检测荧光强度;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;Western Blot法测定H9c2细胞中p-ERK1/2(?)t-ERK1/2蛋白的表达水平。结果： 1.大鼠H9c2细胞的缺氧/复氧模型的建立用缺氧16h、复氧4h制备模型时,细胞出现皱缩、破裂等,与正常对照组组相比(100%±0),细胞存活率(67.2%±5.62%)显著降低,且降低程度适当,结果重复性好,确定后续实验采用此模型。 2.s1p后适应对H9c2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其和pI3K/Akt信号通路的关系。与H/R组相比,s1p组的细胞存活率明显升高(73.13%±1.21%vs60.44%+3.19%,p1);细胞培养液中MDA含量明显降低(1.57±0.050nmol/L vs3.86±0.069nmol/L, p1)、T-sOD (19.46±1.31U/ml vs10.67±1.44U/ml, p1)及Mn-sOD (9.24±0.77U/ml vs6.60±0.97U/ml, p1)活力显著提高;细胞内钙离子的荧光强度明显降低(0.75±0.043vs2.77±0.11,p1),细胞凋亡率显著降低(16.80%±0.57%vs28.83%±1.23%, p1)。加入pI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002以后,s1p+LY组与s1p相比细胞存活率明显降低(63.41%±2.74%vs73.13±1.21%,p1);细胞培养液中MDA含量明显升高(2.94±0.072nmol/L vs1.57±0.050nmol/L, p1)、T-sOD (13.60±1.46U/ml vs19.46±1.31U/ml,p1)及Mn-sOD (5.01±0.61U/ml vs9.24±0.77U/ml, p1)活力显著降低;细胞内钙离子的荧光强度明显升高(1.27±0.038vs0.75±0.043, p1),细胞凋亡率显著升高(23.46%±0.91%vs16.80%±0.57%,p1)。 Western Blot结果显示,与C组相比,H/R组p-Akt蛋白的表达明显增加(p1);与H/R组相比,s1p组能明显增加p-

关键词： s1p 缺氧/复氧 H9c2细胞 pI3K/Akt ERK1/2

KLF2调控s1pR1对类中性粒细胞迁移的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

KLF2调控S1PR1对类中性粒细胞迁移的影响

作者：石丹丹南华大学

学位级别：硕士

目的和意义：支气管哮喘是一种慢性气道炎症性疾病，约50%的哮喘与嗜酸性粒细胞炎症有关，而其余的哮喘中大部分伴随着中性粒细胞增多。在重症哮喘患者的诱导痰中，中性粒细胞比例明显增加。哮喘中性粒细胞增多与中性粒细胞凋亡延迟或... 详细信息

目的和意义：支气管哮喘是一种慢性气道炎症性疾病，约50%的哮喘与嗜酸性粒细胞炎症有关，而其余的哮喘中大部分伴随着中性粒细胞增多。在重症哮喘患者的诱导痰中，中性粒细胞比例明显增加。哮喘中性粒细胞增多与中性粒细胞凋亡延迟或减少有关，也与中性粒细胞表面粘附迁移分子表达增加，引起迁移增加有关。本文从细胞水平研究KLF2是否调控s1pR1，影响类中性粒细胞迁移。方法：（1）将HL-60细胞用含1.3%DMsO培养5天后，分化为类中性粒细胞，通过迪夫快速染色法观察细胞核形态及Realtime pCR检测中性粒细胞分化标志物CD11b mRNA的表达，确定是否诱导成功。（2）用空载及KLF2-RNAi慢病毒载体感染类中性粒细胞。应用荧光显微镜鉴定感染率。应用Western blot、Realtime pCR进行KLF2敲减率鉴定。（3）Realtime pCR检测三组(空白组、空载组、干扰组)中KLF2、s1pR1mRNA的表达，Western blot检测三组中KLF2、s1pR1蛋白的表达，免疫荧光检测KLF2蛋白表达。（4）应用Transwell实验计数0.1μM s1p对三组类中性粒细胞的趋化迁移率。结果：1.成功的将HL-60细胞诱导成类中性粒细胞将HL-60细胞用含1.3%DMsO培养5天后提取细胞，经迪夫快速染色法发现细胞体积变小，出现肾型核。Real-timepCR检测CD11b mRNA表达情况，类中性粒细胞CD11b表达明显增加（p＜0.01）。2.慢病毒转染①荧光显微镜下观察干扰组和空载组的感染效率，感染效率达到90%以上。②KLF2表达情况Real-timepCR结果中，干扰组较空白组、空载组KLF2表达明显减少（p＜0.01），空载组和空白组KLF2表达基本相同（p＞0.05），计算其敲除率约为81%。慢病毒成功干扰KLF2基因表达，且排除病毒本身的干扰。免疫荧光显示，干扰组较空白组、空载组KLF2表达减少。3.s1pR1mRNA表达变化Realtime pCR结果中，干扰组较空白组、空载组s1pR1表达明显减少（p＜0.01），4.s1pR1蛋白表达变化Western blot结果中，干扰组较空白组、空载组s1pR1表达明显减少（p＜0.01）。5.Transwell实验：选取0.1μM浓度的s1p进行Transwell实验，干扰组较空白组、空载组，迁移率明显减少（p＜0.01）。结论：KLF2通过上调s1pR1表达，促进s1p趋化下的类中性粒细胞迁移。

关键词： KLF2 s1pR1 s1p 类中性粒细胞迁移

s1p/s1pR信号与自身免疫病关系的研究进展

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

S1P/S1PR信号与自身免疫病关系的研究进展

s1p通路在胆盐所致HL-7702细胞毒性损伤中的作用

第九届全国免疫学学术大会

作者：孙静芳续薇吉林大学第一医院检验科

鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,s1p)是鞘磷脂的重要代谢产物,由鞘氨醇经鞘氨醇激酶磷酸化合成,可被sIp磷酸酶降解成鞘氨醇或由s1p裂解酶降解成软脂醛和磷酸胆碱。s1p通过作用于鞘氨醇-1-磷酸受体(s1pR)发挥重要的细胞内外功能... 详细信息

鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,s1p)是鞘磷脂的重要代谢产物,由鞘氨醇经鞘氨醇激酶磷酸化合成,可被sIp磷酸酶降解成鞘氨醇或由s1p裂解酶降解成软脂醛和磷酸胆碱。s1p通过作用于鞘氨醇-1-磷酸受体(s1pR)发挥重要的细胞内外功能。s1pR是G蛋白偶联受体家族,目前已发现s1pR1、s1pR2、s1pR3、s1pR4和s1pR5五种亚型,分别调节不同的生理功能。s1p可作为第二信使通过细胞内途径或者通过自分泌或旁分泌的途径分泌到细胞外与细胞膜上的s1pR结合,经过不同的信号转到途径发挥一系列的生物学作用,包括细胞增殖、血管生成、炎症、细胞迁移等。目前已有一些方法用于检测标本中s1p的含量,如放射自显影技术、放射性受体竞争性结合实验、HpLC柱前衍生化、质谱等方法。很多研究表明,s1p/s1pR信号与自身免疫病存在密切关系。在免疫系统,s1p与未成熟的和记忆T细胞膜上的s1pR相互作用,调节T淋巴细胞的发育和组织归巢。s1p是引起淋巴细胞迁移的重要因素,s1p的拮抗剂将导致淋巴细胞停留在淋巴组织内,可防止他们进入外周血和炎性病变部位,从而抑制外周的免疫反应。在多发性硬化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节、干燥综合征、炎症性肠病、克罗恩病等自身免疫病中s1p/s1pR信号参与疾病的发生发展,但具体机制仍不是很清楚,有待进一步的研究。随着s1p/s1pR信号与自身免疫病关系研究的深入,将有助于自身免疫病的机制明确、对其治疗及药物研究提供新的思路。

关键词： s1p s1pR 自身免疫病

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医学创新 2015年第20期12卷 15-17页

作者：梁君铭曾宽邹堂斌广东省佛山市顺德区第一人民医院附属杏坛医院广东佛山528325 中山大学附属孙逸仙纪念医院广东医学院公共卫生学院

目的:探讨s1p通路在胆盐所致HL-7702细胞毒性损伤中的作用。方法:应用甘氨鹅脱氧胆酸盐(GCDC)处理HL-7702细胞建立胆盐损伤肝细胞模型,应用CCK-8试剂盒-8检测细胞存活率,ELIsA方法检测细胞培养上清液s1p的表达,Western blot法测定caspas... 详细信息

目的:探讨s1p通路在胆盐所致HL-7702细胞毒性损伤中的作用。方法:应用甘氨鹅脱氧胆酸盐(GCDC)处理HL-7702细胞建立胆盐损伤肝细胞模型,应用CCK-8试剂盒-8检测细胞存活率,ELIsA方法检测细胞培养上清液s1p的表达,Western blot法测定caspase-3蛋白的表达水平。结果:应用150μmol/L GCDC处理HL-7702细胞24 h可引起毒性损伤,10μmol/L VpC23019(s1pR1抑制剂)预处理30 min可对抗GCDC引起的损伤,使细胞存活率升高,凋亡细胞数目和cleaved caspase-3表达均减少。结论:GCDC可以引起HL-7702细胞毒性,s1p通路介导GCDC对HL-7702细胞的损伤作用。

关键词：甘氨鹅脱氧胆酸盐凋亡 s1p sphK1激酶 HL-7702细胞

s1p信号通路在肥厚心肌缺血后适应中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

海南医学 2015年第1期26卷 1-4页

作者：李海霞李晓梅陈邦党刘芬杨毅宁盖敏涛陈小翠马依彤山东省中医药大学第二附属医院心内科山东济南250000 新疆医科大学第一附属医院心脏中心冠一科新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一临床医学院新疆乌鲁木齐830011

目的探讨在缺血后适应(Ipost)减轻肥厚心肌缺血再灌注(IR)损伤中s1p信号通路的作用。方法选取12周龄C57/BL小鼠,利用Langendorff灌流装置建立小鼠肥厚心肌IR模型,30 min全心缺血随后再灌注90 min。64只小鼠随机分为缺血再灌注组(IR组)... 详细信息

目的探讨在缺血后适应(Ipost)减轻肥厚心肌缺血再灌注(IR)损伤中s1p信号通路的作用。方法选取12周龄C57/BL小鼠,利用Langendorff灌流装置建立小鼠肥厚心肌IR模型,30 min全心缺血随后再灌注90 min。64只小鼠随机分为缺血再灌注组(IR组)、缺血后适应组(Ipost组)、Ipost+W-146组和Ipost+pD98059组,每组14只,进行心脏血流动力学和心肌梗死范围检测,Western印迹方法检测s1p1、ERK1/2总蛋白及磷酸化蛋白表达水平。脱氧核苷酸转移酶介导的生物素原位缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞的凋亡。结果与IR组比较,Ipost组小鼠心脏血流动力学指标左心室收缩压[(66±6)mm Hg vs(85±5)mm Hg]、左室压力上升最大速度[(2 820±220)mm Hg vs(3 778±230)mm Hg]显著降低(ps(40.2±4.6)%]。Ipost+抑制剂组显示在再灌注的最初15 min使用W-146、pD98059能消除Ipost对肥厚心肌的上述保护作用并显著增加心肌梗死面积,与IR组水平相同。与IR组比较,Ipost组在再灌注结束后心肌组织中的s1p1、ERK1/2蛋白磷酸化水平表达显著增加;Ipost+W-146组与Ipost+pD98059组分别与IR组比较,上述指标差异均无统计学意义(p>0.05);TUNEL法检测结果显示,Ipost组Bcl-2的表达较其他各组明显升高,Bax的表达较其他各组明显降低,经比较各组之间Bcl-2和Bax的表达差异无统计学意义(p>0.05)。结论 Ipost能有效地减轻离体小鼠肥厚心肌缺血再灌注损伤,Ipost的心肌细胞保护作用可能是通过s1p结合s1p1后激活ERK1/2信号通路实现的。

关键词： s1p s1p1 肥厚心肌缺血再灌注缺血后适应

s1p-sTAT3信号通路在炎症性疾病中的作用及其机制研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物学通报 2021年第8期56卷 1-6页

作者：方翔王民陈涛姚静济宁医学院山东济宁272067

研究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,s1p)-转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,sTAT3)通路在炎症发生、发展中的作用,主要以s1psTAT3通路在结肠炎、神经炎、自身免疫性甲状腺炎、类风湿性关节炎等不同类型的炎症性疾病中的作用为例进行论述:s1p激活sTAT3,sTAT3可上调鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,sphK1)的表达,促进s1p产生。即s1p和sTAT3相互促进激活,在炎症发生、发展过程中发挥重要作用。

关键词： s1p sTAT3 炎症

血清s1p、Adropin水平对脑血管支架植入术后再狭窄的预测价值及其与血管活性物质、细胞因子的关系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

海南医学院学报 2017年第11期23卷 1516-1519页

作者：王力李志国刘艳代高英许萍四川省自贡市第三人民医院神经内科四川自贡643020 四川省自贡市第三人民医院急诊科四川自贡643020 四川省自贡市第三人民医院检验科四川自贡643020

目的:探讨血清s1p、Adropin水平对脑血管支架植入术后再狭窄的预测价值及其与血管活性物质、细胞因子的关系。方法:选取在本院接受脑血管支架植入术治疗的脑梗死患者109例,回顾其治疗结局并将脑血管支架植入术后再狭窄患者35例作为观察... 详细信息

目的:探讨血清s1p、Adropin水平对脑血管支架植入术后再狭窄的预测价值及其与血管活性物质、细胞因子的关系。方法:选取在本院接受脑血管支架植入术治疗的脑梗死患者109例,回顾其治疗结局并将脑血管支架植入术后再狭窄患者35例作为观察组、脑血管支架植入术后未狭窄患者74例作为对照组。对比两组支架植入前后血清中s1p、Adropin的水平,进一步探讨s1p、Adropin水平与脑血管支架植入术后再狭窄患者血管活性物质、细胞因子水平的内在联系。结果:支架植入前,两组血清中s1p、Adropin水平,血管活性物质、细胞因子水平的差异无统计学意义(p>0.05)。支架植入后,观察组血清中s1p、Adropin的水平低于对照组;血清中血管活性物质NO的水平低于对照组,ET-1、TXB2、AngⅡ的水平高于对照组;血清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10、IL-13的水平高于对照组(ppearson检验发现,脑血管支架植入术后再狭窄患者血清s1p、Adropin水平与血管活性物质、细胞因子水平呈直接相关关系。结论:脑血管支架植入术后再狭窄患者存在血清s1p、Adropin低表达,且其具体表达量与血管活性物质、炎症因子水平直接相关,可作为脑血管支架植入术后再狭窄早期预测的可靠指标。

关键词：脑血管支架植入术 s1p Adropin 血管活性物质

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

s1p在臀肌挛缩症发病过程中的表达及作用

山西医科大学学报 2014年第9期45卷 799-802,902页

作者：俞洁赵晨光许刚贾勇冯毅汪伟基兰州军区乌鲁木齐总医院全军骨科中心乌鲁木齐830000 第四军医大学西京医院康复理疗科

目的探讨磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,s1p)在臀肌挛缩带中的表达情况及其对臀肌挛缩症(gluteal muscle contracture,GMC)发病的作用。方法收集臀肌挛缩症病人病理标本,采用免疫组织化学、Western blot和酶联免疫吸附技术(ELIsA... 详细信息

目的探讨磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,s1p)在臀肌挛缩带中的表达情况及其对臀肌挛缩症(gluteal muscle contracture,GMC)发病的作用。方法收集臀肌挛缩症病人病理标本,采用免疫组织化学、Western blot和酶联免疫吸附技术(ELIsA)观察s1p在臀肌挛缩带中的表达特征,以及其对瘢痕成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原蛋白分泌的作用。结果s1p定位于成纤维细胞的胞质中,呈强阳性表达,瘢痕成纤维细胞在s1p作用下呈时间及浓度依赖性增殖,且最高增殖达3.2倍(psMA)也呈现出对s1p浓度依赖性表达,其最高表达分别为初始值的1.4倍和3倍(ps1p的高表达及其对瘢痕成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原和α-sMA的正性调控可能是引起臀肌挛缩症发病的重要机制。

关键词： s1p 臀肌挛缩症纤维化胶原

s1p协同骨骼肌成肌细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

S1P协同骨骼肌成肌细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的研究