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RNA干扰抑制s100a8基因表达对Hec-1B细胞凋亡及体外药敏的影响

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中国肿瘤临床 2008年第8期35卷 441-444页

作者：黄带发林朝胜富伟能孙开来沈阳军区总医院干二科沈阳市110015 中国医科大学遗传病教研室

目的:子宫内膜癌是女性生殖器最常见的恶性肿瘤之一,晚期及复发性患者预后差,对多种化疗药物耐药。本文探讨RNA干扰抑制s100a8基因表达对子宫内膜癌细胞Hec-1B凋亡及体外药敏的影响。方法:体外合成RNA干扰用s100a8siRNA,采用脂质体将s10... 详细信息

目的:子宫内膜癌是女性生殖器最常见的恶性肿瘤之一,晚期及复发性患者预后差,对多种化疗药物耐药。本文探讨RNA干扰抑制s100a8基因表达对子宫内膜癌细胞Hec-1B凋亡及体外药敏的影响。方法:体外合成RNA干扰用s100a8siRNA,采用脂质体将s100a8siRNA转染到人子宫内膜癌细胞Hec-1B中,用RT-PCR、West-ern blot检测s100a8基因表达,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡变化,MTT法检测细胞抑制率。在转染s100a8siRNA后不同时间的Hec-1B细胞中分别加入2个浓度的顺铂,表柔比星,紫杉醇等药物,设立阴性对照,观察Hec-1B细胞体外生长的变化。结果:1)转染s100a8siRNA可抑制Hec-1B细胞的s100a8基因表达,该作用可维持10天,随着该基因表达被抑制,细胞凋亡增加,在第5天达最高峰,转染组细胞凋亡率(30.34±10.30)%,明显高于对照组(18.14±2.68)%,(P=0.01),而随着s100a8基因表达恢复,细胞凋亡率下降至转染前水平。2)Hec-1B细胞s100a8基因表达抑制后,顺铂,表柔比星,紫杉醇等药物抑制Hec-1B细胞生长作用明显增强。除40.0μmol/L表阿霉素(P=0.056)外,33.3μmol/L和66.5μmol/L顺铂,20.0μmol/L表阿霉素,5.0μmol/L和10.0μmol/L紫杉醇,与对照组比较,均显示对Hec-1B细胞生长抑制增强,存在显著差异(Ps100a8基因表达,诱导该细胞凋亡,抑制s100a8基因表达使Hec-1B对化疗药物敏感性增加,提示该基因可能与子宫内膜癌耐药相关。

关键词： s100a8基因 RNA干扰肿瘤细胞细胞调亡药物敏感性

s100a8基因在喉鳞癌发生中作用机制的研究

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现代肿瘤医学 2010年第6期18卷 1090-1093页

作者：黄带发富伟能尚超徐振明孙开来沈阳军区总医院辽宁沈阳110840 中国医科大学医学遗传学教研室辽宁沈阳110001

目的:研究s100a8与喉癌发生的关系,揭示炎症在喉癌发生中的作用。方法:应用RT-PCR、Western Blot、免疫组化检测s100a8表达,RNAi方法检测其功能、Transwell检测细胞侵袭力,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT检测细胞生长活性。结果:36... 详细信息

目的:研究s100a8与喉癌发生的关系,揭示炎症在喉癌发生中的作用。方法:应用RT-PCR、Western Blot、免疫组化检测s100a8表达,RNAi方法检测其功能、Transwell检测细胞侵袭力,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT检测细胞生长活性。结果:36例喉鳞癌组织中17例出现s100a8 mRNA表达上调(47.2%),而7例喉部良性肿瘤中2例出现表达上调(28.5%)。13例病人喉鳞癌组织中7例s100a8蛋白表达增高。免疫组化分析喉鳞癌组织s100a8蛋白阳性率为54.3%。在高分化喉鳞癌组织为71.4%,而分化程度差的喉癌组织中阳性率为12.8%(P=0.023)。RNAi抑制s100a8基因使Hep2细胞凋亡率增高近9倍,使Hep2细胞侵袭力下降,影响Bcl-2基因表达,但对Hep2细胞的IKKα表达无明显影响。结论:s100a8与喉鳞癌发生相关并参与喉鳞癌分化,s100a8基因具有抑制喉癌细胞凋亡,促进Hep2细胞侵袭的作用。s100a8基因可能部分通过NF-κB通路参与喉癌发生、发展,在此通路中s100a8基因位于p65下游。

关键词：喉鳞状细胞癌 s100a8基因 RNA干涉 NF-κB通路

冠状动脉粥样硬化患者外周血单个核细胞钙结合蛋白s100a8和s100A9基因表达的变化

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中国循环杂志 2010年第2期25卷 107-110页

作者：赵汉军山下静也永井義幸中川理首都医科大学附属北京安贞医院28病房北京市100029 大阪府泉佐野市いんくラ医療ヤソタ循環器科大阪府豐中市立病院循環器科

目的:探讨外周血单个核细胞钙结合蛋白s100a8和s100A9基因表达水平与冠状动脉粥样硬化的关系。方法:稳定性心绞痛(CAD)组61例:经冠状动脉造影(CAG)发现左主干有≥50%狭窄,或在左前降支、左回旋支和右冠状动脉主支发现至少有一处病变狭窄... 详细信息

目的:探讨外周血单个核细胞钙结合蛋白s100a8和s100A9基因表达水平与冠状动脉粥样硬化的关系。方法:稳定性心绞痛(CAD)组61例:经冠状动脉造影(CAG)发现左主干有≥50%狭窄,或在左前降支、左回旋支和右冠状动脉主支发现至少有一处病变狭窄≥75%;对照组53例:有胸痛症状或有异常心电图、异常超声心动图表现,但冠状动脉造影表现为冠状动脉管壁光滑、未见明显粥样硬化斑块的患者。CAG前获得空腹静脉血进行血常规和高敏C反应蛋白(hs-CRP)检测、提取总核糖核酸并合成互补脱氧核糖核酸用于实时定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)。结果:CAD组糖尿病比例(34.4%比15.1%,P=0.032)、合并闭塞性动脉硬化和(或)缺血性脑卒中病史比例(19.7%比0%,P=0.0006)以及hs-CRP水平[0.20比0.10,P=0.022]均高于对照组。CAD组淋巴细胞百分比低于对照组(27.2%比31.7%,P=0.019)。CAD组s100a8和s100A9基因表达水平均高于对照组[分别为0.92(0.83-1.03)比0.84(0.72-0.99),P=0.028;1.09(0.91-1.41)比0.92(0.65-1.25),P=0.009]。s100a8和s100A9基因表达水平与白细胞分类计数水平均不存在相关性(均P>0.05)。糖尿病患者和无糖尿病患者的s100a8和s100A9基因表达水平无统计学意义(均P>0.05)。s100a8和s100A9基因表达水平均与hs-CRP水平相关(分别为r=0.52,P=0.0000;r=0.62,P=0.0000)。结论:稳定性心绞痛患者的外周血单个核细胞s100a8和s100A9基因表达水平升高,提示其持续高表达与冠状动脉粥样硬化有关。

关键词： s100a8基因 s100A9基因动脉粥样硬化冠心病稳定性心绞痛

人源s100a8重组质粒的构建及其对他莫昔芬治疗乳腺癌的影响

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成都医学院学报 2018年第5期13卷 542-545页

作者：汪彦阳陶志嵩徐佩南京鼓楼医院核医学科南京210000

目的构建人源s1000A8的重组质粒,并在人乳腺癌细胞MCF7中表达,初步探索其对他莫昔芬处理下MCF7细胞的影响。方法设计合成针对人源s100a8基因cds区的引物序列,采用PCR的方法以人乳腺癌细胞MCF7的cDNA为模板,扩增目的基因s100a8,经过NdeⅠ... 详细信息

目的构建人源s1000A8的重组质粒,并在人乳腺癌细胞MCF7中表达,初步探索其对他莫昔芬处理下MCF7细胞的影响。方法设计合成针对人源s100a8基因cds区的引物序列,采用PCR的方法以人乳腺癌细胞MCF7的cDNA为模板,扩增目的基因s100a8,经过NdeⅠ和BamHⅠ双酶切后,克隆至pCMV5-myc质粒上。通过脂质体转染至MCF7细胞中,应用Western Blot法检测其蛋白表达。脂质体转染s100a8至MCF7细胞并应用他莫昔芬处理后,用MTT法检测其细胞活力,Western Blot法检测相关蛋白表达。结果酶切鉴定证明s100a8基因重组质粒构建成功,并且可以在MCF7细胞中过表达。MTT法显示s100a8可以部分逆转他莫昔芬所造成的细胞活力下降,部分抗凋亡分子表达上升。结论人源s100a8基因的重组质粒构建成功,为进一步研究s100a8在乳腺癌对他莫昔芬发生耐药的过程中的作用奠定了基础。

关键词： s100a8基因重组质粒乳腺癌他莫昔芬耐药