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Inducible rubicon facilitates viral replication by antagonizing interferon production

Cellular & Molecular Immunology 2017年第7期14卷 607-620页

作者： Yushun Wan Wei Cao Tao Han Sheng Ren Jian Feng TieLong Chen Jun Wang Ruth Broering Mengji Lu Ying Zhu State Key Laboratory of Virology and College of Life Sciences Wuhan UniversityWuhan 430072China Department of Infectious Diseases Zhongnan Hospital of Wuhan UniversityWuhan 430072China Medical Faculty Department of Gastroenterology and HepatologyUniversity of Duisburg-EssenEssen 45127Germany Institute of Virology University of Duisburg-EssenEssen 45127Germany

The RUN domain Beclin-1-interacting cysteine-rich-containing(rubicon)protein is involved in the maturation step of autophagy and the endocytic pathway as a Beclin-1-binding partner,but little is known regarding the role of rubicon during viral ***,we performed functional studies of the identified target in interferon(IFN)signaling pathways associated with rubicon to elucidate the mechanisms of viral resistance to *** rubicon protein levels were elevated in peripheral blood mononuclear cells,sera and liver tissues from patients with hepatitis B virus(HBV)infection relative to those in healthy *** of the overexpression and knockdown of rubicon showed that rubicon significantly promoted HBV *** addition,rubicon knockdown resulted in the inhibition of enterovirus 71,influenza A virus and vesicular stomatitis *** expression o0f rubicon led to the suppression of virus-induced type-I interferon(IFN-αand IFN-β)and type-III interferon(IFN-λ1).Translocation of activated IRF3 and IRF7 from the cytoplasm to the nucleus was involved in this process,and the NF-κB essential modulator(NEMO),a key factor in the IFN pathway,was the target with which rubicon *** results reveal a previously unrecognized function of rubicon as a virus-induced protein that binds to NEMO,leading to the inhibition of type-I interferon *** thus functions as an important negative regulator of the innate immune response,enhances viral replication and may play a role in viral immune evasion.

关键词： host response immune evasion interferon rubicon viral infection

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c-Jun N-terminal kinase-mediated rubicon expression enhances hepatocyte lipoapoptosis and promotes hepatocyte ballooning

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World Journal of Gastroenterology 2016年第28期22卷 6509-6519页

作者： Akiko Suzuki Keisuke Kakisaka Yuji Suzuki Ting Wang Yasuhiro Takikawa division of hepatology department of internal medicine iwate medical university Morioka 0208505 Japan

AIM: To clarify the relationship between autophagy and lipotoxicity-induced apoptosis, which is termed "lipoapoptosis," in non-alcoholic steatohepatitis. METHODS: Male C57BL/6J mice were fed a high-fat diet(HFD) for 12 wk, after which the liver histology and expression of proteins such as p62 or LC3 were evaluated. Alpha mouse liver 12(AML12) cells treated with palmitate(PA) were used as an in vitro model. RESULTS: LC3-Ⅱ, p62, and Run domain Beclin-1 interacting and cysteine-rich containing(rubicon) proteins increased in both the HFD mice and in AML12 cells in response to PA treatment. rubicon expression was decreased upon c-Jun N-terminal kinase(JNK) inhibition at both the m RNA and the protein level in AML12 cells. rubicon knockdown in AML12 cells with PA decreased the protein levels of both LC3-Ⅱ and p62. rubicon expression peaked at 4 h of PA treatment in AML12, and then decreased. Treatment with caspase-9 inhibitor ameliorated the decrease in rubicon protein expression at 10 h of PA and resulted in enlarged AML12 cells under PA treatment. The enlargement of AML12 cells by PA with caspase-9 inhibition was canceled by rubicon ***: The JNK-rubicon axis enhanced lipoapoptosis, and caspase-9 inhibition and rubicon had effects that were cytologically similar to hepatocyte ballooning. As ballooned hepatocytes secrete fibrogenic signals and thus might promote fibrosis in the liver, the inhibition of hepatocyte ballooning might provide antifibrosis in the NASH liver.

关键词： Ballooned hepatocyte Caspase 9 c-Jun N-terminal kinase rubicon SP600125

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rubicon deficiency exacerbates fasting-induced hepatic steatosis

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Journal of Bio-X Research 2022年第1期5卷 35-41页

作者： Fan Dong Xiao-Wen Hu Shasha Zhang Fan He Amber Naz Lin He Hongxin Zhu Bio-X Institutes Key Laboratory for the Genetics of Developmental and Neuropsychiatric DisordersMinistry of EducationShanghai Jiao Tong UniversityShanghaiChina

Objective: rubicon is an inhibitory interacting protein of the autophagy-related protein Uvrag. We previously showed thatrubicon deficiency promotes autophagic fluxin vivo and that autophagy can degrade lipid droplets. This study aimed to investigate the effects of rubicon deficiency on fasting-induced hepatic ***: Two-month-old wild-type (WT) andrubicon-deficient mice were subjected to feeding or fasting for 24 hours to induce hepatic steatosis. The distribution of liver lipid droplets was revealed by oil red O staining. Hepatic and plasma triglyceride, non-esterified fatty acid (NEFA), and cholesterol levels were detected using commercially available kits. Real-time reverse transcriptasepolymerase chain reaction was performed to analyze the mRNA expression of genes related to lipid metabolism in the liver. Western blot was conducted to assess autophagy-related protein levels in the liver. The animal experiments were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee at Shanghai Jiao Tong University, ***: We showed that under fasting conditions,rubicon-deficient mice had more lipid droplets in the liver than WT controls. Consistent with these results, the hepatic triglyceride, NEFA, and cholesterol levels in fastedrubicon-deficient mice were significantly higher than those of fasted WT controls. The levels ofSREBP-1, a key regulator of lipid synthesis, were significantly lower in livers from fasted WT mice than those of fed WT mice. However, the decrease inSREBP-1 in fasted mice was attenuated byrubicon deficiency. Western blot analysis demonstrated that the fasting-induced increase in autophagic flux was amplified byrubicon deficiency. Finally, we showed thatrubicon deficiency in mice led to elevated plasma triglyceride and NEFA acid levels under fasting ***: rubicon deficiency exacerbates fasting-induced hepatic steatosis in mice.

关键词： autophagy fasting hepatic steatosis liver rubicon

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自噬相关基因rubicon缺失可抑制心脏细胞衰老

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中国组织工程研究 2022年第24期26卷 3897-3902页

作者：何帆来帅威张沙沙董凡 Amber Naz Haniya Mazhar 贺林朱洪新上海交通大学Bio-X研究院遗传发育与精神神经疾病教育部重点实验室上海市200240

背景:心脏衰老是心脏疾病的主要危险因素之一,而细胞衰老是心脏衰老的主要机制,在衰老相关心脏疾病中起重要作用。作者前期工作发现自噬相关基因Uvrag缺失促进小鼠心脏细胞衰老,rubicon是Uvrag的抑制性互作蛋白,其对小鼠心脏细胞衰老的... 详细信息

背景:心脏衰老是心脏疾病的主要危险因素之一,而细胞衰老是心脏衰老的主要机制,在衰老相关心脏疾病中起重要作用。作者前期工作发现自噬相关基因Uvrag缺失促进小鼠心脏细胞衰老,rubicon是Uvrag的抑制性互作蛋白,其对小鼠心脏细胞衰老的作用尚不明确。目的:探讨rubicon基因对心脏细胞衰老的影响。方法:使用15月龄野生型小鼠、rubicon基因缺失小鼠、Uvrag基因缺失小鼠作为观察对象,其中Uvrag基因缺失小鼠作为阳性对照。采用荧光定量PCR检测小鼠心脏组织衰老相关分泌表型相关因子mRNA表达变化,苏木精-伊红染色、天狼猩红染色、衰老相关β-半乳糖苷酶染色进行心肌组织学观察,蛋白免疫印迹检测小鼠心脏组织p53和p16蛋白表达量。实验方案经上海交通大学动物实验伦理委员会批准。结果与结论:①苏木精-伊红染色和天狼猩红染色结果显示,rubicon基因缺失改善了衰老过程中心肌细胞重塑及心脏纤维化;②衰老相关β-半乳糖苷酶染色发现,rubicon基因缺失小鼠心脏衰老细胞较野生型对照组显著减少(Prubicon基因缺失小鼠心脏白细胞介素1β、白细胞介素6、转化生长因子β和Ⅲ型胶原α1链、基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA表达量较野生型对照组显著下调(Prubicon基因缺失导致心脏组织衰老调控关键基因p53表达较野生型对照组显著降低(Prubicon基因缺失可显著抑制小鼠心脏细胞衰老并延缓心脏衰老,rubicon是潜在的抑制心脏细胞衰老、抗心脏衰老及衰老相关心脏疾病的靶分子。

关键词： rubicon 细胞衰老心脏衰老衰老相关分泌表型 p53 小鼠

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rubicon缺失改善阿霉素诱导的心脏毒性

RUBICON缺失改善阿霉素诱导的心脏毒性

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作者：刘晓芸上海交通大学

学位级别：硕士

阿霉素（DOX）是目前治疗恶性肿瘤最有效的化疗药物之一。然而,其治疗潜力却受到心脏毒性的限制。线粒体损伤引起的活性氧增加是DOX诱导心脏毒性的主要机制之一。在本研究中,我们提出了rubicon（自噬蛋白UVRAG的抑制性互作蛋白）缺失可... 详细信息

阿霉素（DOX）是目前治疗恶性肿瘤最有效的化疗药物之一。然而,其治疗潜力却受到心脏毒性的限制。线粒体损伤引起的活性氧增加是DOX诱导心脏毒性的主要机制之一。在本研究中,我们提出了rubicon（自噬蛋白UVRAG的抑制性互作蛋白）缺失可以通过改善线粒体质量减轻由DOX引起心脏毒性的假设。通过一次性腹腔注射20 mg/kg DOX建立急性DOX诱导的心脏毒性小鼠模型。DOX处理16小时后,rubicon在心脏组织中表达降低。rubicon缺失改善了DOX处理后动物的存活率。组织病理学分析表明,在rubicon缺失小鼠心脏组织中,DOX诱导的细胞质空泡化和胶原蛋白积累显著减少。此外,rubicon缺失小鼠心肌损伤特异性标志物乳酸脱氢酶和心肌肌酸激酶的活性均显著降低。DOX处理后,与野生型小鼠比较,rubicon缺失小鼠心肌活性氧水平降低,ATP含量增高。超声心动图显示,DOX处理后,野生型小鼠心脏左心室后壁变薄,而rubicon缺失小鼠心脏左心室后壁厚度较野生型小鼠显著增加。透射电镜显示,rubicon缺失改善了DOX诱导的心脏线粒体损伤。进一步研究发现,rubicon缺失改善了由DOX引起的心脏自噬流损伤。此外,DOX处理的野生型小鼠Parkin介导的线粒体自噬受损,而rubicon缺失小鼠线粒体自噬没有明显损伤。此外,rubicon缺失阻止了DOX处理导致的线粒体融合和分裂标志物的改变。综上所述,DOX处理后,rubicon缺失能够促进心脏自噬流、改善心脏组织线粒体自噬及线粒体动力学提高线粒体质量,从而改善DOX诱导的心脏毒性。此外,以上结果提示rubicon是预防和治疗DOX诱导心脏毒性的潜在分子靶点。

关键词： rubicon 阿霉素心脏毒性线粒体

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作者：陈雅峻重庆医科大学

学位级别：硕士

背景:肝移植术后急性排斥反应与患者术后生存密切相关。增强库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)清除凋亡细胞的能力可有效缓解急性排斥反应。方法:从小鼠肝组织中提取KCs并将rubicon过表达慢病毒和小干扰RNA转染到其中以构建过表达组和沉默... 详细信息

背景:肝移植术后急性排斥反应与患者术后生存密切相关。增强库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)清除凋亡细胞的能力可有效缓解急性排斥反应。方法:从小鼠肝组织中提取KCs并将rubicon过表达慢病毒和小干扰RNA转染到其中以构建过表达组和沉默组;提取原代KCs并与酵母聚糖和凋亡T淋巴细胞共培养。通过蛋白质印迹(Western blotting,WB)和q-PCR检测CD86、CD163、IL-10、TNF-α、TGF-β、JAK1、STAT6、AKT1、mTOR和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator–activated receptor-γ,PPARγ)的表达水平。通过流式细胞术检测CD86和CD163的表达。将mCherry-GFP-LC3腺病毒转染到KCs中。通过免疫荧光观察LC3II的募集以及吞噬体和溶酶体的融合。将rubicon腺相关病毒经门静脉转染小鼠肝组织,然后建立肝移植免疫耐受和急性排斥模型。HE染色检测肝组织病理变化;TUNEL染色评估凋亡细胞数目;免疫组织化学染色检测KCs的极化状态。结果:在体外,随着rubicon的过表达,LC3相关吞噬作用(LAP)必需的蛋白和ROS均有明显的增加,LC3 II的募集以及吞噬体、溶酶体的融合有明显的增加(Prubicon的过表达促进了KCs的M2极化,与Control组相比,rubicon过表达组CD163、IL-10、TGF-β随着rubicon的过表达有着明显的增加(Prubicon有效地减轻了急性排斥模型小鼠的肝功能损伤,AST、ALT有明显的降低,HE显示rubicon过表达组急性排斥标志物相比急性排斥组有明显的降低(Prubicon过表达组的CD163阳性KCs比例明显升高(Prubicon介导的LAP促进了KCs降解和清除凋亡T淋巴细胞的能力;凋亡T淋巴细胞的降解产物多不饱和脂肪酸(PUFA)激活PPARγ,进一步促进KCs的M2极化;在体内,过表达rubicon可以促进KCs的M2极化以及减轻急性排斥损伤。

关键词： rubicon LC3相关吞噬作用 PPARγ 库普弗细胞急性排斥

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病毒通过rubicon抑制自噬晚期或干扰素的产生实现先天免疫逃逸的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年

作者：宿俊玮袁瑾王峰李珺岳磊严敏昆明医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系浙江大学邵逸夫医院麻醉科云南省普洱市中医医院检验科中国医学科学院医学生物学研究所

先天免疫反应是宿主抵御病毒感染的第一道防线。通过自噬靶向降解病原微生物，协同模式识别受体诱导干扰素（IFN）产生，是机体抵御病毒感染的重要途径。rubicon，一种Run结构域Beclin-1相互作用和富含半胱氨酸结构域蛋白，对自噬和IFN... 详细信息

先天免疫反应是宿主抵御病毒感染的第一道防线。通过自噬靶向降解病原微生物，协同模式识别受体诱导干扰素（IFN）产生，是机体抵御病毒感染的重要途径。rubicon，一种Run结构域Beclin-1相互作用和富含半胱氨酸结构域蛋白，对自噬和IFN产生具有抑制效应。一方面，rubicon作为磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）复合体的一种结合成分，通过不同的结构域分别与液泡蛋白分选34（Vps34）、紫外线辐射耐受相关基因(UVRAG)和小鸟苷三磷酸（GTP）激酶，RAS癌基因家族成员7（Rab7）相互作用，介导自噬成熟抑制；另一方面，rubicon抑制核因子 κB 关键调节因子（NEMO）的泛素化和干扰素调节因子3（IRF3）的二聚化，进而阻断IFN产生相关的信号转导。研究发现卡波西肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）、乙型肝炎病毒（HBV）、仙台病毒（SeV）、丙型肝炎病毒（HCV）等多种病毒，通过调节rubicon的表达或功能实现先天免疫逃逸，rubicon有望成为抗病毒治疗的新靶点。

关键词：病毒 rubicon 干扰素(IFN) 自噬先天免疫逃逸综述

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少有人走的路——寻找中国rubicon之路黑戈壁线

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汽车杂志 2009年第10期 182-187页

作者：李婷王宁(图)

临行前，我在机场买下这本书《少有人走的路》，这是一本难读的书，直言不讳地抓出你身上的小毛病，又要你用极强的理智去克服，但终归都是为你好。

关键词：轿车发动机车型 rubicon

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牧马人rubicon体现定位的媒介运用

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商学院 2012年第2期 29-30页

自从2002年rubicon被克莱斯勒作为牧马人系列的顶级子系列推出以来,就以其无与伦比的越野性能和近乎极致的安全性能被众多越野爱好者追捧,而作为唯一不经改装便穿越美国的"牧马人"量产车型,更是让业界将其奉为越野之王。与之相对应的,... 详细信息

自从2002年rubicon被克莱斯勒作为牧马人系列的顶级子系列推出以来,就以其无与伦比的越野性能和近乎极致的安全性能被众多越野爱好者追捧,而作为唯一不经改装便穿越美国的"牧马人"量产车型,更是让业界将其奉为越野之王。与之相对应的,是随着中国经济的发展,高端越野车市场的空白。rubicon进军中国市

关键词：牧马人 rubicon 电视专题报道墨脱越野车越野性能《中国国家地理》媒介定位

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行走腾格里的“牧马人”——Jeep牧马人rubicon 10周年限量版沙漠试驾成功举办

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宁夏画报（生活版） 2013年第4期 90-91页

作者：陈镛安

Jeep不仅是个家喻户晓的名字,更是一个超越车型与技术的越野代名词。在超过半个世纪的时间里,它已经成功跨越国界抵达众多爱车人士的内心。从1941年7月23日至今,Jeep品牌一直象征着真正的四轮驱动性能、创新技术和持续改进。也正因为如... 详细信息

Jeep不仅是个家喻户晓的名字,更是一个超越车型与技术的越野代名词。在超过半个世纪的时间里,它已经成功跨越国界抵达众多爱车人士的内心。从1941年7月23日至今,Jeep品牌一直象征着真正的四轮驱动性能、创新技术和持续改进。也正因为如此,Jeep汽车已销售到近100个国家和地区,拥有众多Jeep爱好者。Jeep品牌不仅奠定了四驱越野车型的标准。

关键词：牧马人 Jeep rubicon 10 限量版四轮驱动持续改进越野汽车腾格原装进口发动机

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