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丙戊茶碱对切口痛大鼠镇痛机制与MKP-1/p-p38关系的研究

丙戊茶碱对切口痛大鼠镇痛机制与MKP-1/p-p38关系的研究

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作者：杨园园兰州大学

学位级别：硕士

第一部分计算ro 318220对丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1的 IC50 值目的:计算鞘内注射ro 318220对大鼠脊髓MKP-1表达的IC50值。方法:采用健康、雄性、SD大鼠30只,体重250-280g、月龄1.5-2.0,按随机数字表法分为5组(n=6):Naive组(Ⅰ组)、ro 3... 详细信息

第一部分计算ro 318220对丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1的 IC50 值目的:计算鞘内注射ro 318220对大鼠脊髓MKP-1表达的IC50值。方法:采用健康、雄性、SD大鼠30只,体重250-280g、月龄1.5-2.0,按随机数字表法分为5组(n=6):Naive组(Ⅰ组)、ro 318220 10ug/20ul组(Ⅱ组)、ro 318220 20ug/20ul组(Ⅲ组)、ro 318220 40ug/20ul组(Ⅳ组)、ro 31822080ug/20ul组(Ⅴ组)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别鞘内注射ro 318220 10、20、40、80ug/20ul,Ⅰ组不做处理。鞘内注射24h后各组大鼠用Western blot法检测脊髓MKP-1的表达量,用SPSS软件计算ro 318220抑制大鼠脊髓MKP-1表达的IC50值。结果:ro 318220抑制大鼠脊髓MKP-1表达的IC50值为33ug。结论:ro 318220能有效抑制大鼠脊髓MKP-1的表达,其IC50值为33ug。第二部分丙戊茶碱对切口痛大鼠镇痛机制与MKP-1/p-p38关系的研究目的:评价鞘内注射丙戊茶碱对切口痛模型大鼠镇痛效果及此效果与MKP-1/p-p38的关系。方法:采用SPF级健康、雄性、SD大鼠90只,体重250-300g、月龄1.5-2.0,按随机数字表法分6组:空白组(Naive组,n=6)、生理盐水组(NS组,n=6)、二甲基亚砜组(DMSO组,n=6)、切口痛组(IP组,n=30)、丙戊茶碱组(PPF组,n=36)、抑制剂组(ro组,n=6)。IP、PPF、ro组制备大鼠急性切口痛模型,NS组鞘内注射10ul NS,DMSO组鞘内注射10ul 10%DMSO,PPF组术后30min鞘内注射PPF 10ug/10ul,ro组术前鞘内注射ro 318220 40ug/20ul,术后30min鞘内注射PPF 10ug/10ul。Naive,NS,DMSO,ro组于术前和术后1d测机械缩足反应阈值(MWT),IP组和PPF组于术前和术后2h、5h、1d、2d、3d测MWT。PPF组大鼠术后72h待行为学测试完毕用免疫荧光双标法检测脊髓MKP-1表达位置,剩余大鼠待行为学检测完毕用Western blot法检测脊髓MKP-1/p-p38表达量。结果:与Naive组比较,NS组和DMSO组MWT、MKP-1和p-p38表达差异均无统计学意义(P>0.05);与术前比较,IP组术后2h、5h、1d、2d、3d大鼠MWT均降低(Pro组鞘内预先注射ro 318220后1d大鼠MWT降低(P<0.05),脊髓MKP-1表达降低(P<0.05),p-p38表达增多(P<0.05);免疫荧光共表达结果表明MKP-1在脊髓神经元、星型胶质细胞及小胶质细胞均表达。结论:丙戊茶碱具有缓解大鼠趾部切口痛作用,其机制可能与提高大鼠脊髓MKP-1的表达和降低p-p38的表达相关。

关键词： ro 318220 MKP-1 抑制剂 IC50 丙戊茶碱 p-p38 鞘内注射神经胶质细胞急性痛

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