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南京医科大学学报（自然科学版） 2016年第6期36卷 726-729页

作者：晏芾于韶荣曹海霞井昶雯马蓉冯继锋南京医科大学附属江苏省肿瘤医院肿瘤内科江苏南京210009

目的 :比较3种提取非小细胞肺癌A549细胞培养上清中外泌体(Exosomes)的方法 ,为获得高质量的Exosomes提供参考。方法:分别采取超速离心法、进口Exo Quick-TC提取法、国产ribo提取法提取A549细胞培养上清中的Exosomes。利用透射电镜进行... 详细信息

目的 :比较3种提取非小细胞肺癌A549细胞培养上清中外泌体(Exosomes)的方法 ,为获得高质量的Exosomes提供参考。方法:分别采取超速离心法、进口Exo Quick-TC提取法、国产ribo提取法提取A549细胞培养上清中的Exosomes。利用透射电镜进行形态学观察,2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠法进行蛋白定量,Western blot检测Exosomes表面标志物CD63表达。结果:3种方法均可提取到Exosomes,电镜下可观察到圆形膜性囊泡结构。进口Exo Quick-TC提取法及国产ribo提取法提取样本浓度显著高于超速离心法(P提取样本均有Exosomes特异性标志蛋白CD63表达,超速离心法CD63表达最高。结论:超速离心法、进口Exo Quick-TC提取法、国产ribo提取法均可成功分离Exosomes,超速离心法获得的Exosomes纯度较高,应用试剂盒方法获得的Exosomes浓度高。

关键词：外泌体超速离心法 Exoquick提取法 ribo提取法

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