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毛细管离心技术在rhd抗原混合外观患者D抗原鉴定中的应用

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临床输血与检验 2024年第2期26卷 236-239页

作者：陈吉翠高海燕马现君山东大学齐鲁医院山东济南250012

目的探讨毛细管离心技术在rhd抗原呈混合外观患者D抗原鉴定中的应用可行性。方法对11例rhd抗原呈混合视野的患者红细胞进行清洗,制备压积红细胞。之后用毛细管离心法分离血细胞,分别向近端患者自身红细胞和远端红细胞加入抗D试剂鉴定Rh... 详细信息

目的探讨毛细管离心技术在rhd抗原呈混合外观患者D抗原鉴定中的应用可行性。方法对11例rhd抗原呈混合视野的患者红细胞进行清洗,制备压积红细胞。之后用毛细管离心法分离血细胞,分别向近端患者自身红细胞和远端红细胞加入抗D试剂鉴定rhd抗原。根据献血者代码追踪输入红细胞的rhd抗原。结果经毛细管离心,1例患者rhd抗原阴性,8例患者rhd抗原阳性,其余两例患者rhd抗原仍为混合视野。结论毛细管离心技术可有效分离患者新生红细胞,准确鉴定患者rhd抗原,为临床输血提供安全保障。

关键词：毛细管离心技术 rhd抗原血型鉴定

1例部分D表型献血者rhd抗原表位及分子机制研究

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临床输血与检验 2022年第1期24卷 16-21页

作者：李明浩杨佳璇李艾静朱自严叶璐夷上海市血液中心上海市输血研究所分子免疫血液学学科课题组200051

目的研究1例rhd抗原表型为部分D的献血者rhd抗原和分子机制。方法利用血清学方法对1例初筛为rhd阴性样本进行rhd阴性确认并进行CE分型;采用D-screen检测该样本rhd抗原表位。利用Sanger测序法对rhd基因的全部外显子测序。建立数字PCR鉴定... 详细信息

目的研究1例rhd抗原表型为部分D的献血者rhd抗原和分子机制。方法利用血清学方法对1例初筛为rhd阴性样本进行rhd阴性确认并进行CE分型;采用D-screen检测该样本rhd抗原表位。利用Sanger测序法对rhd基因的全部外显子测序。建立数字PCR鉴定rhd基因型的方法并分析该例样本rhd基因合子型。采用Robetta同源建模方法比较该例样本与野生型rhd蛋白的构象。结果经血清学鉴定为部分D表型,CE分型为CcEe。基因测序发现,rhd基因4号外显子存在c.492C>G突变。数字PCR鉴定该例样本的rhd基因型为D+/D–。同源建模结果提示天冬氨酸被谷氨酸替换影响rhd蛋白第3个胞外环的构象。结论rhd*492G导致部分抗原表位缺失,表现为部分D表型,属于国内首次报道。数字PCR技术用于rhd基因合子型检测,相比于实时定量PCR技术重复性和准确性均有改进。

关键词： rhd抗原部分D表型数字PCR 同源建模

单采血小板输注rhd抗原引起的同种免疫作用及其临床应用

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中国现代医学杂志 2010年第2期20卷 234-236页

作者：刘正敏高新谱韩雪莹李华李健山东省血液中心济南血站检验科山东济南250001 山东省立医院中心实验室山东济南250021

目的研究单采血小板(APC)输注中由rhd抗原引起的同种免疫频率及其临床应用效果。方法在没有预防性应用Rh免疫球蛋白的情况下,给予rhd阴性的血小板减少症出血患者rhd阳性血小板,测定输注前及输注后1h的外周血血小板计数(BPC),计算校正血... 详细信息

目的研究单采血小板(APC)输注中由rhd抗原引起的同种免疫频率及其临床应用效果。方法在没有预防性应用Rh免疫球蛋白的情况下,给予rhd阴性的血小板减少症出血患者rhd阳性血小板,测定输注前及输注后1h的外周血血小板计数(BPC),计算校正血小板增加值(CCI)来评估临床疗效;在接下来的随访中,以低离子强度间接抗球蛋白试验检测每份标本的抗-D水平,计算同种免疫频率。结果输注后27例患者出血症状均得到明显缓解,输注后1h的CCI为(12.7±1.2)×109/L;输注rhd不合血小板引起的同种免疫频率为3.7%。结论输注rhd不合APC临床疗效明显,引起同种免疫反应几率很低,在紧急情况下可给予rhd阴性患者rhd阳性的APC。

关键词：单采血小板 rhd抗原同种免疫频率临床应用

马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇遮盖红细胞rhd抗原研究

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现代预防医学 2007年第19期34卷 3660-3663页

作者：李执如江波王乃红杨群身周英吕文彬郑家生成都市血液中心四川大学化学学院

[目的]马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(MDPEG)修饰红细胞,遮蔽rhd抗原,使Rh+红细胞转变为Rh-红细胞。[方法]甲基苯甲酸和聚乙二醇单甲醚(分子量5000)为原料合成MDPEG(分子量5910)。红细胞修饰:3%～5%RBC+MDPEG+2-亚氨基硫烷(IT)、pH 7.4、... 详细信息

[目的]马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(MDPEG)修饰红细胞,遮蔽rhd抗原,使Rh+红细胞转变为Rh-红细胞。[方法]甲基苯甲酸和聚乙二醇单甲醚(分子量5000)为原料合成MDPEG(分子量5910)。红细胞修饰:3%～5%RBC+MDPEG+2-亚氨基硫烷(IT)、pH 7.4、室温2 h。盐水法进行红细胞与ABO血型、rhd血型血清学实验。血流变仪测定红细胞黏度等指数。盐水梯度法测定红细胞渗透脆性。[结果]30 mg/ml马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇能有效遮蔽3%～5%红细胞rhd抗原,红细胞与抗rhd抗体无凝集反应,光学显微镜观察红细胞无聚集,细胞形态正常。红细胞膜渗透性、红细胞聚集指数轻微升高,刚性指数轻微下降。[结论]马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(MD-PEG)能完全遮盖rhd抗原,获得rhd阴性红细胞,细胞形态,结构正常。

关键词：马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇红细胞 rhd抗原

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隐蔽红细胞rhd抗原遮盖效果研究

现代预防医学 2009年第3期36卷 578-579页

作者：李执如杨群身宋玲周琼秀陈雪成都市血液中心医科院输血研究所

[目的]研究马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(MDPEG)对红细胞rhd抗原的遮盖程度。[方法]MDPEG修饰红细胞为rhd抗原隐蔽红细胞,隐蔽红细胞与FITC标记IgG类抗D抗体进行抗人球蛋白试验,用流式细胞仪测定红细胞上抗D抗体的结合。[结果]隐蔽红细... 详细信息

[目的]研究马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(MDPEG)对红细胞rhd抗原的遮盖程度。[方法]MDPEG修饰红细胞为rhd抗原隐蔽红细胞,隐蔽红细胞与FITC标记IgG类抗D抗体进行抗人球蛋白试验,用流式细胞仪测定红细胞上抗D抗体的结合。[结果]隐蔽红细胞与抗D抗体的血清学凝集试验阴性,流式细胞仪测定隐蔽红细胞上抗D抗体的荧光强度比阴性对照高,统计学检验差异有统计学意义(t=37.2509,P﹤0.0001)。[结论]实验证明MD-PEG-RBC上仍有少量rhd+抗原裸露,可能导致宿主产生rhd免疫。

关键词：隐蔽红细胞 rhd抗原马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇

慢性淋巴细胞白血病患者rhd抗原减弱的原因分析1例

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中国输血杂志 2017年第12期30卷 1404-1405页

作者：林智杰本钢总医院检验科辽宁本溪117000

目的分析1例慢性淋巴细胞白血病患者rhd抗原减弱的原因。方法应用血清学方法鉴定该例标本的ABO、Rh血型及红细胞血型抗体鉴定。PCR-SSP方法扩增RH基因。结果先证者为A型,rhd抗原盐水介质阴性,经间接2批抗人球蛋白方法(IAT)确认样本为Rh... 详细信息

目的分析1例慢性淋巴细胞白血病患者rhd抗原减弱的原因。方法应用血清学方法鉴定该例标本的ABO、Rh血型及红细胞血型抗体鉴定。PCR-SSP方法扩增RH基因。结果先证者为A型,rhd抗原盐水介质阴性,经间接2批抗人球蛋白方法(IAT)确认样本为rhd阳性,血清中检测抗-D。PCR-SSP检测RH基因为Dccee。结论慢性淋巴细胞白血病患者rhd抗原减弱,产生类抗-D,导致rhd抗原检测及配血困难。

关键词： rhd抗原抗-D 慢性淋巴细胞白血病

用于rhd抗原流式细胞检测的固定透化方法评价

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中国输血杂志 2017年第9期30卷 984-986页

作者：李桢徐华周华友张印则深圳市血液中心广东深圳518035 陕西省血液中心 Rh血型系统基础与临床研究关键技术攻关合作组南方医科大学南方医院

目的寻找具有回收率高且适于rhd抗原荧光检测的红细胞固定透化方法。方法分别采用4%甲醛、4%多聚甲醛、2%戊二醛对红细胞进行固定,同时采用4%甲醛-Triton X-100、4%多聚甲醛-Triton X-100、2%戊二醛-Triton X-100对红细胞进行透化固定,... 详细信息

目的寻找具有回收率高且适于rhd抗原荧光检测的红细胞固定透化方法。方法分别采用4%甲醛、4%多聚甲醛、2%戊二醛对红细胞进行固定,同时采用4%甲醛-Triton X-100、4%多聚甲醛-Triton X-100、2%戊二醛-Triton X-100对红细胞进行透化固定,未处理红细胞作为对照。冰上固定20 min,洗涤后计算红细胞回收率。在各组红细胞中加入1∶128的rhd Ig G单克隆抗体,同时设组内空白对照,37℃孵育30 min。PBS洗涤3次后加入1∶200的FITC荧光抗体,37℃孵育30 min,PBS洗涤3次后流式细胞仪检测。结果 2%戊二醛及2%戊二醛-Triton X-100 2组的回收率分别为72.83%与72.80%,高于对照组(58.32%),甲醛及多聚甲醛2组的回收率在4.00%左右,远低于对照组。流式检测结果显示,不同固定剂的荧光本底均高于未处理红细胞。与对照组相比甲醛与多聚甲醛会减弱rhd抗原荧光强度,而戊二醛不影响rhd荧光强度,戊二醛-Triton X-100可增强rhd抗原检测的灵敏度。结论2%戊二醛-Triton X-100固定透化法不仅可得到较高的红细胞回收率,且rhd荧光检测的灵敏度也得到提升,是荧光检测rhd抗原较理想的固定透化方法。

关键词：甲醛多聚甲醛戊二醛固定透化 rhd抗原

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微量rhd抗原检测法

中国卫生检验杂志 2014年第13期24卷 1911-1912页

作者：王振芳吴春富代伟伟赵胜昔王帅胡佳丽冀中能源邢台矿业集团总医院输血科河北邢台054000 邢台医学高等学校河北邢台054000 广宗县人民医院检验科河北广宗054600

目的为解决患儿、烧伤患者以及危重患者,因采集rhd抗原检测的血标本困难,而研究的一种微量rhd抗原检测方法。方法取洁净玻片一张,用加样器加入rhd单克隆试剂血清和被检测患者5%红细胞悬液各10μl,再加入低离子介质溶液20μl于玻片上。... 详细信息

目的为解决患儿、烧伤患者以及危重患者,因采集rhd抗原检测的血标本困难,而研究的一种微量rhd抗原检测方法。方法取洁净玻片一张,用加样器加入rhd单克隆试剂血清和被检测患者5%红细胞悬液各10μl,再加入低离子介质溶液20μl于玻片上。将上述3种液体混匀,置室温5 min观察结果。对幼儿园206份儿童体检血标本与常规玻片法进行检测比较。结果 206份儿童血标本微量法与常规法平行对照,2种方法检测rhd抗原结果完全吻合。结论该方法操作简便、价格低廉,且血标本和试剂用量少,适用于儿童、大面积烧伤患者以及危重患者,进行rhd抗原检测。

关键词：微量法 Rh血型系统 rhd抗原

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rhd抗原的鉴定我们该做的多深入

临床输血与检验 2016年第4期18卷 305-307,311页

作者：朱自严上海市血液中心 200051

rhd抗原是最具有免疫原性的血型抗原。正常rhd阳性表型红细胞表面有10000~30000个D抗原位点[1],每个D抗原决定簇由三十多个D表位组成[2]。D抗原数量表达下调,或部分D表位缺失的红细胞,被称为D变异型（Dvariants）。目前,D变异型可分为... 详细信息

rhd抗原是最具有免疫原性的血型抗原。正常rhd阳性表型红细胞表面有10000~30000个D抗原位点[1],每个D抗原决定簇由三十多个D表位组成[2]。D抗原数量表达下调,或部分D表位缺失的红细胞,被称为D变异型（Dvariants）。目前,D变异型可分为两个亚类：

关键词： rhd抗原血型鉴定 D变异型