检索结果-南通市图书馆

中国输血杂志 2020年第6期33卷 555-558页

作者：伍昌林邵超鹏张印则易品党鑫堂朱奕周世乔深圳市第二人民医院输血科广东深圳518035 深圳大学总医院输血科南方医科大学深圳医院输血科

目的分析比较不同血型鉴定方法对定期输血地贫患者rhccee表型检出率,探讨毛细管离心法鉴定地贫患者血型混合视野的可行性。方法 PCR-SSP法对随机收集的100例地贫患者外周血进行rhccee基因分型,再分别采用微柱凝胶卡直接离心法、毛细管... 详细信息

目的分析比较不同血型鉴定方法对定期输血地贫患者rhccee表型检出率,探讨毛细管离心法鉴定地贫患者血型混合视野的可行性。方法 PCR-SSP法对随机收集的100例地贫患者外周血进行rhccee基因分型,再分别采用微柱凝胶卡直接离心法、毛细管离心结合微柱凝胶卡法及毛细管离心改良法对定期输血的地中海贫血患者外周血进行rhccee血型鉴定,三种方法检测rhccee血型的结果与PCR-SSP法检测结果比较,分析各种方法鉴定rhccee血型的检出率。结果 100例地贫定期输血患者外周血样本,微柱凝胶卡直接离心法可鉴定出18例rhccee表型,82例呈混合视野或分层,检出率为18%(18/100);对82例呈混合视野样本,毛细管离心结合微柱凝胶卡法可鉴定出rhccee血型28例,54例仍存在不同程度的混合视野或分层现象,检出率为34.2%(28/82);从82例呈混合视野的地贫患者中,毛细管离心改良法可鉴定出53例,29例呈不同程度的混合视野,检出率为64.6%(53/82),统计分析3种方法的检出率,差别有统计学意义(Prhccee血型检出率,发现随着输血间隔期延长,地贫患者rhccee血型的检出逐渐升高(Prhccee血型基因可行但需具备一定实验条件;毛细管离心结合微柱凝胶卡法简便且快速,但检出率较低;毛细管离心改良法检出率随着输血间隔期延长而提高,但临床应用仍需探索改良。

关键词：毛细管离心法定期输血地贫患者 rhccee血型混合视野

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产前分子技术非创伤性诊断胎儿血型的研究

产前分子技术非创伤性诊断胎儿血型的研究

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作者：秦斐浙江大学

学位级别：硕士

目前产前诊断在许多国家是固定的产科检查的一部分。然而,常规的获得遗传学分析的胎儿组织的方法是有创伤的并且是对胎儿有一定的风险,这些方法包括羊膜腔穿刺和绒毛活检被称为侵入性产前诊断。非创伤性产前诊断早期主要研究将自孕妇外... 详细信息

目前产前诊断在许多国家是固定的产科检查的一部分。然而,常规的获得遗传学分析的胎儿组织的方法是有创伤的并且是对胎儿有一定的风险,这些方法包括羊膜腔穿刺和绒毛活检被称为侵入性产前诊断。非创伤性产前诊断早期主要研究将自孕妇外周血中富集、纯化获得的胎儿细胞用于产前诊断,然而母血循环中胎儿细胞是很稀少的,这一点限制了它的临床应用。自从1997年母亲血浆中胎儿的游离DNA的发现为非创伤性产前诊断开辟了新的研究途径,它已经被用于产前诊断胎儿性别、胎儿Rh血型以及产前诊断单基因缺陷病如β-地中海贫血,Huntington病、胆囊纤维化和强直性肌营养不良等疾病。母婴血型不合而引起的新生儿溶血病(HDN)在临床上较为常见,其发病率约为1%。可导致胎儿出生后核黄疸等后遗症,甚至可引起胎儿宫内死亡。非创伤性产前诊断胎儿血型对预防血型不合导致的HDN有重要的意义。目前国外的研究主要集中在Rh血型系统,关于ABO血型血型系统的产前诊断报道也甚少。Kidd、Duffy等血型系统的产前诊断国内外尚无报道。本研究旨在建立适合中国人群的产前胎儿血型分子诊断的技术平台。本研究的研究对象为不同孕期的孕妇,抽提其静脉外周血血浆的DNA,应用多重荧光PCR技术扩增胎儿父源性STR位点,确认胎儿DNA的存在作为内源胎儿标记物;自母婴血型不合的高危孕妇血浆中提取胎儿DNA,应用PCR-SSP技术对胎儿ABO血型进行分型;应用RQ-PCR方法对胎儿rhccee和Kidd血型进行分型。 STR研究结果为不同孕期36份孕妇标本中有32份检测到了胎儿父源性STR等位基因。ABO检测结果为39例O型血的孕妇标本中,10例孕A型血胎儿的孕妇血浆中扩增出A基因8例;6例孕B型血胎儿的孕妇血浆中扩增出B基因6例;23例孕O型血胎儿扩增出O基因而无A或B基因21例。rhccee检测结果为21例孕妇样本中,11例母亲表型为ee纯合子样本检测到胎儿E基因;12例母亲表型为CC纯合子检测到胎儿c基因;5例母亲表型为EE纯合子检测到胎儿e基因;9例母亲表型为cc纯合子检测到胎儿C基因。Kidd检测结果为38例孕妇样本中,6例母亲表型为Jk(a+b-)检测到胎儿JK*B基因;32例母亲表型为Jk(a-b+)检测到胎儿JK*A基因。上述研究结果表明我们成功建立了产前胎儿血型分子诊断的技术平台,所建立的产前检测胎儿ABO血型基因、RHCE基因型、Kidd血型基因诊断方法结果可靠,为产前非创伤性诊断新生儿溶血病提供了方法。

关键词：非创伤性产前诊断血浆DNA 新生儿溶血病 STR Kidd血型 rhccee血型 ABO血型基因分型

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