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rt-pcr技术诊断猪繁殖与呼吸综合征

畜牧与兽医 2010年第10期42卷 74-76页

作者：魏明奎薛邦玉郭小参陶长城信阳农业高等专科学校河南信阳464000 信阳市动物疫病预防与控制中心河南信阳464000

参照GenBank已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型代表株VR-2332的ORF6(M蛋白)基因序列,设计1对引物,扩增大约420 bp的基因片段,建立检测PRRSV的rt-pcr方法,同时应用该方法对PRRSV美洲毒株、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)... 详细信息

参照GenBank已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型代表株VR-2332的ORF6(M蛋白)基因序列,设计1对引物,扩增大约420 bp的基因片段,建立检测PRRSV的rt-pcr方法,同时应用该方法对PRRSV美洲毒株、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)及空白对照进行检测。结果显示,除PRRSV外,CSFV、PRV、PCV及空白对照的检测结果均为阴性。将250μL细胞培养的PRRSV提取RNA后,依次稀释成10-1～10-8,均能扩增出明显的目的条带;且多次重复均能得到一致的结果。表明本研究建立的rt-pcr方法具有特异性强、敏感性高、重现性好的优点。用此方法对信阳市10县区疑似PRRS病例进行临床检测,检测病料478份,检出阳性病料265份,阳性率为55.4%。

关键词： rt-pcr技术诊断猪繁殖 PRRSV 临床检测 rt-pcr方法空白对照猪伪狂犬病毒检测结果猪圆环病毒猪瘟病毒细胞培养特异性强美洲扩增基因序列基因片段呼吸综合 CSFV GenBank

应用rt-pcr技术检测动物组织中的口蹄疫病毒

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微生物学通报 2002年第4期29卷 9-13页

作者：娄高明杜伟贤杨傲冰周秀蓉谢明权广东省兽医生物技术实验室广州510640

通过对影响rt-PER检出率的条件和试剂进行了筛选,确定了提取FMDV RNA的最佳方法和试剂,优选出rt-pcr反应的试剂和最佳反应条件,建立了检测口蹄疫病毒核酸的rt-PER方法。应用所建立的方法检测送检的鲜牛奶、淋巴结、脊髓、牛鼻咽拭子,结... 详细信息

通过对影响rt-PER检出率的条件和试剂进行了筛选,确定了提取FMDV RNA的最佳方法和试剂,优选出rt-pcr反应的试剂和最佳反应条件,建立了检测口蹄疫病毒核酸的rt-PER方法。应用所建立的方法检测送检的鲜牛奶、淋巴结、脊髓、牛鼻咽拭子,结果阳性率分别为41.4％(24/58)、13.33％(2/15)、20％(1/5)、37.5％(12/32);检测4个屠宰场送检的组织样品40份,结果阳性率为.10％-70％;检测送检的奶粉(1份)、水泡皮(1份)、老鼠(2份)、患儿口腔棉拭子(4份),阳性率均为100％;而检测送检的蟑螂4份,阳性率为0。研究表明检测FMDV的rt-PER技术能准确快速地检测肉类、奶类、分泌物、排泄物的带毒、排毒情况,可用于口蹄疫的诊断和流行病学调查。

关键词： rt-pcr技术检测动物组织口蹄疫病毒

利用rt-pcr技术检测甘薯病毒的研究进展

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分子植物育种 2017年第2期15卷 648-651页

作者：肖海峻孟利前陈梦然杨春林北京农业职业学院北京102442

病毒是导致甘薯产量降低和品质改变的主要因素,生产上主要采用茎尖脱毒的方法解决这一问题,但茎尖脱毒的效果主要采取指示植物法、酶联免疫吸附法进行测定,这些方法各有优缺点,因而在生产上没有得到广泛应用。随着现代分子生物学技术的... 详细信息

病毒是导致甘薯产量降低和品质改变的主要因素,生产上主要采用茎尖脱毒的方法解决这一问题,但茎尖脱毒的效果主要采取指示植物法、酶联免疫吸附法进行测定,这些方法各有优缺点,因而在生产上没有得到广泛应用。随着现代分子生物学技术的发展,反转录聚合酶链式反应技术在甘薯病毒检测上的应用越来越广泛。采用rt-pcr技术可检测出甘薯组织中含量极低的病毒RNA,具有灵敏度高、特异性强等优点。本研究综述了rt-pcr检测技术的原理、分类、操作中存在的问题、解决办法及其在甘薯病毒检测中的应用情况,旨在为从事甘薯病毒检测技术的科研工作者提供一些思路和方法。

关键词： rt-pcr技术甘薯病毒检测

rt-pcr技术检测非洲猪瘟病毒的作用研究

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中兽医学杂志 2022年第4期 92-94页

作者：李兴旺山东省武城县畜牧渔业发展中心山东德州253300

2018年非洲猪瘟病毒在中国出现并蔓延,造成养猪业巨大损失。非洲猪瘟来势汹汹,如何对非洲猪瘟进行有效的检测对防治猪瘟病毒至关重要。rt-pcr检测技术是当前较好的一种检测方法。本文主要分析了rt-pcr技术检测猪瘟病毒的效果。

关键词： rt-pcr技术非洲猪瘟病毒检测

rt-pcr技术在肝癌患者循环肿瘤细胞检测中的应用

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中国实验诊断学 2004年第3期8卷 252-255页

作者：彭吉润李澍北京大学人民医院肝胆外科中心北京100044

原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一。肝癌细胞具有容易侵犯血管的特性，极易造成癌细胞的血行播散，这可能是导致肝癌切除术后及肝移植术后肿瘤复发、转移率高、预后较差的主要原因。寻求新的... 详细信息

原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一。肝癌细胞具有容易侵犯血管的特性，极易造成癌细胞的血行播散，这可能是导致肝癌切除术后及肝移植术后肿瘤复发、转移率高、预后较差的主要原因。寻求新的、敏感的检测循环肿瘤细胞的方法，对于判断肝癌的病理分期、

关键词： rt-pcr技术肝癌肿瘤细胞检测外周血

mRNA差异显示rt-pcr技术在昆虫学研究中的应用

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昆虫知识 2005年第2期42卷 119-123页

作者：马彩霞何凤琴邱星辉刘惠霞中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室北京100080 西北农林科技大学植物保护学院陕西杨凌712100

mRNA差异显示rt- pcr是近 1 0年广泛使用的用于克隆和分析差异表达基因的有效技术。该文简要介绍了差异显示rt -pcr技术的原理、优缺点及其优化方法 ,重点综述了mRNA差异显示rt -pcr技术在昆虫学研究中的应用。

关键词： rt-pcr技术 mRNA差异显示昆虫学应用差异表达基因优化方法优缺点克隆

应用rt-pcr技术快速诊断疑似高致病性猪蓝耳病病例

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2016年第3期 109-110,239页

作者：张敏梅小伟周建红王芹宜昌市动物疫病预防控制中心湖北宜昌443000 当阳市动物疫病预防控制中心湖北当阳443000

高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状、高死亡率为特征的传染病。该病最早于1987年报道，见于美国南部，现已遍及世界各地，给全球养猪业造成了巨大的经济损... 详细信息

高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状、高死亡率为特征的传染病。该病最早于1987年报道，见于美国南部，现已遍及世界各地，给全球养猪业造成了巨大的经济损失[1].

关键词： rt-pcr技术猪蓝耳病高致病性快速诊断病例应用呼吸道症状繁殖障碍

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rt-pcr技术诊断猪瘟的应用研究

养猪大视野 2005年第3期 28-30页

作者：罗廷荣黄玉华莫扬黄伟坚秦爱珍刘芳温荣辉陆芹章余克伦吴文德广西大学动物科技学院预防兽医学实验室530004 广西大学动物疫病防治研究所530005

应用反转录—聚合酶链反应(rt-pcr)对猪瘟进行诊断应用研究。应用rt—pcr对来自广西不同地区的135份疑似猪瘟病料进行检测，84份诊断为阳性，阳性率62．296。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共276份，经rt—pcr检测，37... 详细信息

应用反转录—聚合酶链反应(rt-pcr)对猪瘟进行诊断应用研究。应用rt—pcr对来自广西不同地区的135份疑似猪瘟病料进行检测，84份诊断为阳性，阳性率62．296。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共276份，经rt—pcr检测，37份为阳性，阳性率为13．4％。其中健康猪扁桃体带毒较高，246份扁桃体中有35份阳性，占14．2％。采自柳州健康猪的26份淋巴结材料全为阴性，只有邕宁县的1份健康猪淋巴结阳性。结果表明，rt-pcr技术可应用于猪瘟的临床诊断。

关键词：应用猪瘟技术诊断 rt-pcr技术聚合酶链反应 pcr检测淋巴结扁桃体柳州地区临床诊断阳性率健康反转录邕宁县病料

rt-pcr技术在BVDV检测中的应用研究进展

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山东畜牧兽医 2010年第2期31卷 50-51页

作者：李兆华山东畜牧兽医职业学院潍坊261041

牛病毒性腹泻／黏膜病，简称牛病毒性腹泻病。1946年在纽约州病牛中首先发现并报道为牛病毒性腹泻病（BVD），1953年Ransey与Chiver发现了牛黏膜病（MD），后经Gillespie等1961年研究证实两种病为同一病毒引起，并于1971年由美国兽医协... 详细信息

牛病毒性腹泻／黏膜病，简称牛病毒性腹泻病。1946年在纽约州病牛中首先发现并报道为牛病毒性腹泻病（BVD），1953年Ransey与Chiver发现了牛黏膜病（MD），后经Gillespie等1961年研究证实两种病为同一病毒引起，并于1971年由美国兽医协会统一命名为牛病毒性腹泻／黏膜病，是由牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，

关键词： rt-pcr技术牛病毒性腹泻病毒 BVDV 应用检测 virus 黏膜病兽医协会