检索结果-南通市图书馆

弓形虫Ⅰ型和Ⅱ型rop16蛋白对人肺腺癌A549细胞增殖、周期和凋亡的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病原生物学杂志 2022年第2期17卷 180-185页

作者：李琴惠曾瑾汪澎涛杨宁爱马磊李佳铭马慧慧赵志军西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021 宁夏大学生命科学学院宁夏医科大学总医院宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏医科大学总院医学实验中心

目的探讨弓形虫Ⅰ型和Ⅱ型rop16蛋白对人肺腺癌A549细胞增殖、周期和凋亡的影响及分子机制。方法将构建好的Ⅰ型和Ⅱ型rop16重组慢病毒表达载体(A549-RH rop16、A549-Me49rop16)感染A549细胞,经嘌呤筛选稳定后获得单克隆过表达细胞株。... 详细信息

目的探讨弓形虫Ⅰ型和Ⅱ型rop16蛋白对人肺腺癌A549细胞增殖、周期和凋亡的影响及分子机制。方法将构建好的Ⅰ型和Ⅱ型rop16重组慢病毒表达载体(A549-RH rop16、A549-Me49rop16)感染A549细胞,经嘌呤筛选稳定后获得单克隆过表达细胞株。实时荧光定量PCR和Western blot法鉴定过表达效果,免疫荧光法检测其定位。CCK-8法测定A549细胞的增殖活性。流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化水平。Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspases-3、Caspase9、p53和细胞周期相关蛋白p21、CDK6、CyclinD1的蛋白水平。结果Western blot和q-PCR检测结果显示,重组慢病毒表达载体转染A549细胞72h后其rop16mRNA和蛋白都有明显表达(Prop16蛋白抑制A549细胞增殖(Prop16过表达组中细胞凋亡率下降20.69%,G1期细胞百分由原来的63.2%升高到83.2%。Western blot结果显示促细胞周期G1/S转化因子CDK6、CyclinD1蛋白表达明显降低,而细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子p21表达明显升高(P蛋白的表达明显升高,抗凋亡因子Bcl-2表达受到抑制(Prop16过表达组与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论Ⅰ型rop16蛋白过表达可诱导人肺腺癌A549细胞周期停滞和细胞凋亡。

关键词：肺腺癌 A549细胞 rop16蛋白细胞增殖细胞周期细胞凋亡

弓形虫rop16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、周期和凋亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2023年第1期39卷 38-43页

作者：马慧慧汪鹏涛刘春兰李佳铭王艺璇兰敏赵志军宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室银川750004 宁夏医科大学总院医学实验中心银川750004

目的探讨弓形虫Ⅰ型(RH)rop16蛋白在人乳腺癌MCF-7细胞增殖、周期及凋亡方面的作用。方法以空载体(MCF-7-HBLV)和过表达rop16蛋白的慢病毒(HBLV-RH rop16)分别感染MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选出稳定表达rop16的细胞株,Real time PCR、Wester... 详细信息

目的探讨弓形虫Ⅰ型(RH)rop16蛋白在人乳腺癌MCF-7细胞增殖、周期及凋亡方面的作用。方法以空载体(MCF-7-HBLV)和过表达rop16蛋白的慢病毒(HBLV-RH rop16)分别感染MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选出稳定表达rop16的细胞株,Real time PCR、Western blot法检测MCF-7细胞中rop16 mRNA和蛋白表达水平。CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖、周期和凋亡。Western blot法检测细胞周期及凋亡相关蛋白表达。结果相比MCF-7-HBLV(空载体组)和MCF-7细胞组(对照组),MCF-7-RH rop16细胞组中rop16 mRNA和蛋白表达升高;细胞增殖率降低(P蛋白依赖激酶抑制因子P21表达增高(P蛋白Bcl-2及细胞周期蛋白A1(CyclinA1)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达均下降(Prop16蛋白可通过调节与凋亡、周期相关的细胞因子的表达,诱导MCF-7细胞凋亡,抑制其增殖并引起细胞周期阻滞。

关键词：乳腺癌 rop16蛋白 MCF-7细胞增殖周期凋亡

弓形虫VEG株rop16蛋白对THP-1细胞免疫调节及机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2022年第4期52卷 466-474页

作者：陈梅贾伟杨峥党甜甜潘亚菲苏雅静杨宁爱赵志军宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总院医学实验中心宁夏银川750004

为了探究弓形虫VEG株rop16蛋白在THP-1细胞中的表达及对其免疫反应的影响和相关机制,本研究利用慢病毒构建过表达rop16(overEep-rop16)载体,空载体(overEep-NC)为对照,通过转染THP-1细胞构建稳转细胞株,对其荧光蛋白表达情况、rop16在TH... 详细信息

为了探究弓形虫VEG株rop16蛋白在THP-1细胞中的表达及对其免疫反应的影响和相关机制,本研究利用慢病毒构建过表达rop16(overEep-rop16)载体,空载体(overEep-NC)为对照,通过转染THP-1细胞构建稳转细胞株,对其荧光蛋白表达情况、rop16在THP-1细胞中的表达及定位进行检测;通过RT-PCR检测炎性因子IL-1β、IL-18、TNF-α、IL-10、IL-12 mRNA相对表达水平;Western-blot方法检测炎性小体NLRP3、Caspase-1蛋白与信号通路蛋白STAT3、pTyr705-STAT3的表达水平。结果显示,构建的过表达rop16重组慢病毒转染THP-1细胞后可观察到强绿色荧光,在THP-1细胞中rop16基因在mRNA与蛋白水平均成功表达且该蛋白定位于THP-1细胞核;与对照组相比,过表达组促炎细胞因子IL-1β、IL-18、TNF-αmRNA表达水平上调(P蛋白与信号通路蛋白pTyr705-STAT3相对表达量上调(P0.05)。上述结果表明,构建的过表达rop16重组慢病毒稳转染至THP-1细胞内并表达蛋白,表达的蛋白定位于THP-1细胞核内,该蛋白能激活NLRP3炎性小体促发炎症的发生并通过磷酸化STAT3 Tyr705调控抗炎作用。

关键词：刚地弓形虫 rop16蛋白 THP-1细胞炎性小体 STAT3

刚地弓形虫ME49虫株rop16蛋白的生物信息学分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病原生物学杂志 2023年第12期18卷 1401-1406页

作者：党甜甜殷荷李佳铭田婷婷周月赵志军宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏医科大学检验学院宁夏临床病原微生物重点实验室

目的应用生物信息学方法分析弓形虫ME49虫株rop16蛋白(ME49-rop16)的理化性质、结构特点等,并预测其潜在的B、T细胞抗原表位及其互作蛋白,为弓形虫疫苗的研究提供理论基础。方法登录NCBI数据库下载ME49虫株rop16蛋白的氨基酸序列,利用... 详细信息

目的应用生物信息学方法分析弓形虫ME49虫株rop16蛋白(ME49-rop16)的理化性质、结构特点等,并预测其潜在的B、T细胞抗原表位及其互作蛋白,为弓形虫疫苗的研究提供理论基础。方法登录NCBI数据库下载ME49虫株rop16蛋白的氨基酸序列,利用在线软件ProtParam预测rop16蛋白的理化性质;使用ProScale预测rop16蛋白的亲水性、柔韧性、表面可及性及β-折叠;采用SignalP-4.1预测rop16蛋白的信号肽;运用TMHMM-2.0预测rop16蛋白的跨膜结构;利用SOMPA和Phyre2预测rop16蛋白的二、三级结构;通过Netphos3.1、NetNGlyc1.0、YinOYang-1.2预测rop16蛋白的磷酸化位点、N-糖基化位点和O-糖基化位点;运用Predicting Antigenic Peptides预测rop16蛋白的抗原决定簇;使用IEDB预测rop16蛋白的优势B细胞表位;运用SYFPEITHI预测rop16蛋白的T细胞优势表位;采用STRING预测软件分析与其相互作用的蛋白。结果ME49-rop16蛋白由707个氨基酸组成,分子式为C_(3338)H_(5350)N_(966)O_(1033)S_(21),相对分子质量76.21631×10^(3),其理论等电点是8.97,不稳定系数为59.30,为不稳定蛋白;脂溶性指数为79.25,总的平均亲水性为-0.320,为亲水性蛋白;其二级结构中α-螺旋占35.64%,延伸链占10.75%,β-转角占5.94%,无规卷曲占47.67%;该蛋白含有83个氨基酸磷酸化位点,14个N-糖基化位点,无O-糖基化位点。ME49-rop16蛋白具有信号肽序列,无跨膜结构;其平均抗原倾向指数为1.0340,共有25个抗原决定簇区域,有7条B细胞优势表位,14条CTL细胞优势表位,14条Th细胞优势表位,与ACC1、ACC2、PKG、rop18为互作蛋白。结论生物信息学分析ME49-rop16蛋白为不稳定亲水性蛋白,含有多个B、T细胞优势表位,并与ACC1、ACC2、PKG、rop18为互作蛋白,为以该蛋白为靶点的弓形虫疫苗研制奠定了基础。

关键词：刚地弓形虫 rop16蛋白生物信息学免疫原性

弓形虫Ⅰ/Ⅱ型rop16蛋白对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡和周期及增殖的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2022年第11期52卷 1465-1473页

作者：刘春兰赵志军汪澎涛马慧慧李佳铭兰敏王艺璇于欣宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院医学检验系宁夏银川750004

为了探讨刚地弓形虫Ⅰ(RH)、Ⅱ(Me49)型rop16蛋白对SH-SY5Y细胞凋亡、周期及增殖的影响,本研究通过表达Ⅰ、Ⅱ型rop16蛋白(HBLV-rop16Ⅰ、HBLV-rop16Ⅱ)和空载(HBLV-NC)的慢病毒感染SH-SY5Y细胞以获得稳转株,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和W... 详细信息

为了探讨刚地弓形虫Ⅰ(RH)、Ⅱ(Me49)型rop16蛋白对SH-SY5Y细胞凋亡、周期及增殖的影响,本研究通过表达Ⅰ、Ⅱ型rop16蛋白(HBLV-rop16Ⅰ、HBLV-rop16Ⅱ)和空载(HBLV-NC)的慢病毒感染SH-SY5Y细胞以获得稳转株,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western-blot验证SH-SY5Y细胞内rop16过表达情况,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,CCK-8法检测细胞增殖情况,RT-PCR和Western-blot分别对凋亡相关因子(Bax、p53、Bcl-2、Caspase-9)及细胞周期相关因子(p21、CDK6)的mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果显示,相比于空白组(Control)和空载体组(HBLV-NC),过表达组(HBLV-rop16Ⅰ、HBLV-rop16Ⅱ)细胞的rop的16 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P蛋白均高表达(P蛋白均低表达(P0.05)。上述结果表明弓形虫Ⅰ、Ⅱ型rop16蛋白可诱导SH-SY5Y细胞凋亡、细胞周期阻滞在G1期及抑制SH-SY5Y细胞增殖。

关键词：刚地弓形虫 rop16蛋白 SH-SY5Y细胞细胞凋亡细胞周期细胞增殖

弓形虫Ⅱ型rop16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞增殖凋亡迁移和侵袭的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2023年第3期53卷 396-402页

作者：马慧慧汪鹏涛刘春兰李佳铭王艺璇兰敏赵志军宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏临床病原微生物重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学总院医学实验中心宁夏银川750004

为探讨弓形虫Ⅱ型(ME49)rop16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,利用Ⅱ型rop16(MCF-7-rop16Ⅱ)和空载体(MCF-7-HBLV)慢病毒载体分别感染MCF-7细胞,用实时荧光PCR、Western-blot验证rop16蛋白在MCF-7细胞的表达,用CC... 详细信息

为探讨弓形虫Ⅱ型(ME49)rop16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,利用Ⅱ型rop16(MCF-7-rop16Ⅱ)和空载体(MCF-7-HBLV)慢病毒载体分别感染MCF-7细胞,用实时荧光PCR、Western-blot验证rop16蛋白在MCF-7细胞的表达,用CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡,用细胞划痕试验和Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,用Western-blot检测凋亡相关因子Bax、p53、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3的表达。结果显示:相比MCF-7-HBLV(空载体组)和MCF-7细胞组(空白组),过表达组(MCF-7-rop16Ⅱ)中rop16 m RNA和蛋白表达显著升高;过表达组的细胞增殖率、侵袭率和迁移率显著降低(Prop16蛋白抑制MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭,且诱导细胞凋亡。

关键词：乳腺癌 rop16蛋白 MCF-7细胞增殖凋亡迁移侵袭

弓形虫rop16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞的表型影响及其作用机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

弓形虫ROP16蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞的表型影响及其作用机制研究

作者：马慧慧宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的构建弓形虫Ⅰ（RH株）、Ⅱ（ME49株）、Ⅲ（VEG株）型rop16蛋白过表达慢病毒载体,转染至人乳腺癌MCF-7细胞,探究其对MCF-7细胞表型的影响及机制,并进行转录谱分析,以期为临床治疗激素受体阳性乳腺癌以及寄生虫分泌蛋白抗肿瘤的研究... 详细信息

目的构建弓形虫Ⅰ（RH株）、Ⅱ（ME49株）、Ⅲ（VEG株）型rop16蛋白过表达慢病毒载体,转染至人乳腺癌MCF-7细胞,探究其对MCF-7细胞表型的影响及机制,并进行转录谱分析,以期为临床治疗激素受体阳性乳腺癌以及寄生虫分泌蛋白抗肿瘤的研究提供参考。方法1.将构建好的慢病毒载体p HBLV-CMV、p HBLV-CMV rop16转染至人乳腺癌MCF-7细胞,荧光显微镜观察细胞荧光蛋白,Real time PCR和Western blot检测rop16m RNA和蛋白表达;2.CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖、周期和凋亡;3.细胞划痕和Transwell检测细胞迁移和侵袭;4.Real time PCR和Western blot检测与细胞凋亡、周期以及JAK-STAT通路相关基因和蛋白的表达,明确rop16蛋白调控MCF-7细胞表型的作用机制;5.各组细胞通过Trizol裂解后进行RNA-Seq分析。结果1.rop16蛋白成功表达于人乳腺癌MCF-7细胞,荧光显微镜观察到MCF-7-HBLV、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16组细胞发出强绿色荧光;Real time PCR和Western-blot结果显示,MCF-7-rop16、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16细胞组中rop16 m RNA和蛋白表达量升高。2.CCK-8结果显示,相比于MCF-7、MCF-7-HBLV细胞组,MCF-7-rop16、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16组细胞增殖明显受到抑制;流式细胞术结果显示,MCF-7-rop16、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16组细胞凋亡明显增加且细胞周期在S期停滞;Transwell和细胞划痕实验结果显示,MCF-7-rop16、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16组细胞侵袭和迁移能力明显受到抑制。3.Western-blot和Real time PCR结果显示,相比于MCF-7、MCF-7-HBLV细胞组,MCF-7-rop16、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16细胞组中促凋亡因子Bax、P53、Caspase-9、Caspase-3表达显著增高（P蛋白Bcl-2的表达均显著下降;相比于MCF-7、MCF-7-HBLV细胞组,MCF-7-rop16、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16组中细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子P21表达显著增高（P蛋白A1（Cyclin A1）和周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）表达均显著下降。4.Western-blot结果显示,相比于MCF-7、MCF-7-HBLV细胞组,MCF-7-rop16、MCF-7-rop16细胞组中JAK-STAT通路相关蛋白JAK1、STAT3、STAT6、p-STAT3、p-STAT6蛋白的表达明显上调,MCF-7-rop16细胞组则无明显变化。5.细胞测序结果显示,相比于MCF-7、MCF-7-HBLV细胞组,MCF-7-rop16、MCF-7-rop16、MCF-7-rop16细胞组中KEGG富集的Pathway差异表现在Pathways in cancer、PI3K-Akt、MAPK等信号通路,涉及JAK1、JAK3、STAT6、STAT3、CDK6、MAP4K3、MAP3K11、MYD88等基因的改变。结论1.Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型rop16蛋白过表达慢病毒载体成功转染人乳腺癌MCF-7细胞;2.Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型rop16蛋白抑制MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移,诱导其细胞周期停滞和凋亡;3.Ⅰ/Ⅲ型rop16蛋白通过调控JAK-STAT信号通路影响MCF-7细胞增殖、凋亡、周期、迁移、侵袭等细胞表型;而Ⅱ型rop16蛋白则无此作用;4.转录组学初步分析,稳定表达rop16蛋白的MCF-7细胞在Pathways in cancer、PI3K-Akt、MAPK等信号通路上基因表达量发生变化。

关键词： rop16蛋白乳腺癌细胞表型 JAK-STAT通路

弓形虫rop16Ⅰ/Ⅲ蛋白对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2019年第10期54卷 1506-1510页

作者：金郁计永胜姚湧汪学龙安徽医科大学基础医学院人体寄生虫教研室

目的探讨弓形虫rop16Ⅰ/Ⅲ蛋白对妊娠小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法原代培养小鼠子宫基质细胞,用雌二醇、孕酮和cAMP体外诱导蜕膜化的同时加入rop16重组慢病毒,72 h后qRT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素(PRL)mRNA的表达,流式细胞术检... 详细信息

目的探讨弓形虫rop16Ⅰ/Ⅲ蛋白对妊娠小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法原代培养小鼠子宫基质细胞,用雌二醇、孕酮和cAMP体外诱导蜕膜化的同时加入rop16重组慢病毒,72 h后qRT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素(PRL)mRNA的表达,流式细胞术检测蜕膜细胞凋亡率的变化,并用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果提取的小鼠子宫基质细胞纯度为95%以上,在体外诱导蜕膜化后,PRL mRNA的表达随时间延长而显著升高(Prop16Ⅰ/Ⅲ,相比于对照组,蜕膜细胞的凋亡率降低(P蛋白Bax表达降低,Bcl-2蛋白表达上调。结论弓形虫rop16Ⅰ/Ⅲ蛋白会抑制蜕膜细胞的凋亡,可能会影响蜕膜细胞增殖与凋亡的平衡,从而影响胚胎的植入。

关键词：弓形虫 rop16蛋白蜕膜化凋亡

弓形虫rop16蛋白诱导肝癌细胞凋亡的检测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肝胆外科杂志 2016年第6期24卷 466-468页

作者：刁玉洁昌庆琛刘珍计永胜安徽医科大学第四附属医院检验科合肥230022 安徽医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室

目的观察弓形虫rop16蛋白转染肝癌细胞Hep G2后,肝癌细胞的凋亡比率的变化以及细胞凋亡蛋白的表达水平变化。方法克隆弓形虫rop16基因,构建真核转染质粒,并用脂质体转染的方式转染Hep G2细胞,48小时后,用流式细胞仪检测细胞凋亡比率,用w... 详细信息

目的观察弓形虫rop16蛋白转染肝癌细胞Hep G2后,肝癌细胞的凋亡比率的变化以及细胞凋亡蛋白的表达水平变化。方法克隆弓形虫rop16基因,构建真核转染质粒,并用脂质体转染的方式转染Hep G2细胞,48小时后,用流式细胞仪检测细胞凋亡比率,用western blotting和RT-PCR的方法检测细胞凋亡相关蛋白caspase-9、Bax、Bcl-2等的表达水平。结果与未转染细胞组相比,弓形虫rop16转染Hep G2细胞后,肝癌细胞的凋亡比率明显升高。促细胞凋亡蛋白caspase-9、Bax的蛋白表达水平和基因转录水平均升高,而抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2的表达水平和转录水平下降。结论 rop16蛋白可以诱导肝癌细胞Hep G2发生凋亡。

关键词： rop16蛋白肝癌细胞