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RhoA/rock signaling in chondrogenic differentiation of MSCs induced by TGF-β1

Journal of Nanjing Medical University 2006年第6期20卷 346-350页

作者： Liang Xu Shuhua Yang Hongtao Tian Department of Orthopedics Union Hospital Tongji Medical College Huazhong University of Science and Technology Wuhan 430022 China

Objective： To investigate the role of RhoA/rock in the process of chondrogenic differentiation of MSCs in vitro induced by TGF-β1. Methods ： MSCs were isolated from rat bone marrow, cultured and passaged. The cultured MSCs at the 3rd passage were induced to differentiate into chondrocytes in induction medium containing TGF-β1, the expressions of RhoA and rockI/2 in the induced MSCs cells were detected by Western-blot and RT-PCR. Results： In parallel to chondrogenic marker gene expressions of collagen Ⅱand aggrecan, rock inhibition by Y27632 in these cells caused a significant decrease in mRNA level of collagen Ⅱ. Conclusion： The results suggest that RhoA/rock pathway may play an important and complex role in regulation of chondrogenic differentiation and gene expression.

关键词： mesenchymal stromal cell transforming growth factor beta differentiation RhoA rock1/2

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RhoA在产前应激子代大鼠抑郁样行为中的作用及干预

RhoA在产前应激子代大鼠抑郁样行为中的作用及干预

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作者：冯彩霞西北大学

学位级别：硕士

研究目的:抑郁症作为一种常见的疾病,其核心症状为持续性的情绪低落,缺乏动力,意志消沉,最严重时可导致自杀。产前应激(prenatal stress,PS)暴露可导致啮齿动物后代的抑郁行为,但机制尚不清楚。RhoA(Ras homolog gene family,member A)... 详细信息

研究目的:抑郁症作为一种常见的疾病,其核心症状为持续性的情绪低落,缺乏动力,意志消沉,最严重时可导致自杀。产前应激(prenatal stress,PS)暴露可导致啮齿动物后代的抑郁行为,但机制尚不清楚。RhoA(Ras homolog gene family,member A)在应激相关的突触可塑性改变中有重要作用,通过对下游的效应分子rock(Rho-associated protein kinase)的活化来启动下游通路,从而参与抑郁的发生。本研究建立了PS模型,探讨了RhoA和下游rock1/2基因在PS子鼠抑郁样行为中表达水平的变化。同时本研究还注射了RhoA抑制剂辛伐他汀(simvastatin),观察了其对PS子代抑郁的影响。研究方法:本研究使用了产前束缚应激模型,在PS母鼠怀孕的第14-20天对其进行束缚应激,一天3次,一次45min,而对照组的母鼠在孕期不进行任何干扰。在子鼠出生第21天将雌雄分开,并随机分组,分为对照组(CON,n=8),产前应激组(PS,n=8),产前应激+生理盐水组(PS-Saline,n=8),产前应激+辛伐他汀组(PS-SMV,n=8)。在子代出生后第44-50天,PS-SMV组雌雄子鼠腹腔注射辛伐他汀,连续7天。随后在第51、52和53天分别通过糖水偏好实验、强迫游泳还有旷场实验,来检测子鼠的抑郁样行为。最后采用Western blotting和RT-q RCR分别检测子鼠海马以及前额叶皮层中RhoA、rock1、rock2的蛋白和m RNA表达水平。研究结果:***组子鼠的糖水偏好较对照组相比明显降低;强迫游泳不动时间明显多于对照组;旷场实验中子鼠穿越总格数、穿越中央格次数、中央格停留时间均显著减少,即表现出明显的抑郁样行为。***-q PCR、Western-blotting结果显示,PS显著增加了子鼠海马和前额叶皮层中RhoA m RNA及蛋白表达水平,同时增加了rock1、rock2 m RNA及蛋白表达水平。***子鼠腹腔注射辛伐他汀后,可以增加糖水偏好百分比,减少强迫游泳不动时间,改善旷场实验中子鼠运动活性,对抑郁样行为有一定的缓解作用。此外,辛伐他汀使子鼠海马和前额叶皮层中RhoA及rock2 m RNA和蛋白表达明显下调,对rock1的表达没有影响。研究结论:PS导致子代大鼠表现出抑郁样行为,这可能是由于RhoA表达上调引起的,还可能与rock1和rock2的表达水平升高有关。在给予PS子鼠辛伐他汀之后,伴随着RhoA、rock2表达水平的减少,PS子鼠的抑郁样行为得到明显改善,进一步说明了RhoA可能参与PS诱导的子代抑郁样行为的发生,可能作为潜在的抗抑郁治疗靶点。

关键词：产前应激抑郁样行为 RhoA rock1/2

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