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rna编辑酶ADAR1对淋巴细胞系增殖的影响

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免疫学杂志 2002年第4期18卷 266-268,277页

作者：赵青川张德新罗晓星苏映军扬静华第四军医大学西京医院肝胆外科陕西西安710032 美国耶鲁大学创伤外科实验室康涅狄格州纽黑文市ct06520

目的　探索ADAR1活性升高对淋巴细胞细胞增殖的影响。方法　①构建反转录病毒载体 :PCR从小鼠cDNA中放大ADAR1全长基因 ,连入反转录病毒MIEV载体 ,感染包装细胞后分泌病毒颗粒 ;②病毒颗粒感染T淋巴细胞CTLL2和B淋巴细胞A2 0 ,观察细胞... 详细信息

目的　探索ADAR1活性升高对淋巴细胞细胞增殖的影响。方法　①构建反转录病毒载体 :PCR从小鼠cDNA中放大ADAR1全长基因 ,连入反转录病毒MIEV载体 ,感染包装细胞后分泌病毒颗粒 ;②病毒颗粒感染T淋巴细胞CTLL2和B淋巴细胞A2 0 ,观察细胞增殖的变化 ;③MTT法测定细胞增殖率。结果　ADAR1/MIEV病毒感染淋巴细胞后 ,使细胞增殖速度减慢。结论　ADAR1在淋巴细胞发挥功能方面起有重要的作用 ,但哪些物质需要编辑以及具体机制如何 ,需要进一步研究。

关键词： rna编辑酶 ADAR1 淋巴细胞反转录病毒细胞增生炎症反应

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rna编辑酶在结直肠癌组织标本中的表达

中国实验诊断学 2010年第7期14卷 1047-1048页

作者：张广姜涛田宇王巍张连波吉林大学中日联谊医院吉林长春130033

目的探讨rna编辑酶在结直肠癌组织标本中的表达及其意义。方法收集临床结直肠癌组织标本及癌周正常组织标本12例,应用RT-PCR法检测rna编辑酶ADAR1、ADAR2在结直肠癌组织及癌旁正常组织标本中的表达并分析。结果编辑酶ADAR1在人结直肠癌... 详细信息

目的探讨rna编辑酶在结直肠癌组织标本中的表达及其意义。方法收集临床结直肠癌组织标本及癌周正常组织标本12例,应用RT-PCR法检测rna编辑酶ADAR1、ADAR2在结直肠癌组织及癌旁正常组织标本中的表达并分析。结果编辑酶ADAR1在人结直肠癌组织及癌旁组织中未见明显表达,而编辑酶ADAR2在结直肠癌组织及结直肠癌旁组织中阳性表达,并在结直肠癌组织中表达增强(癌组织中阳性表达率为75%,癌旁组织阳性表达率为41.7%,P编辑酶ADAR2阳性表达可能与结直肠癌的发生发展有关。

关键词：结直肠癌 rna编辑酶表达

rna编辑酶ADAR1在大鼠肝移植排斥反应及人肝癌中的表达及意义

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RNA编辑酶ADAR1在大鼠肝移植排斥反应及人肝癌中的表达及意义

作者：张洪涛第四军医大学

学位级别：硕士

rna编辑是DNA转录成rna后，rna编辑酶对前体mrna中的核苷酸进行删除、添加或修饰等重新修饰的过程，从而改变其基因序列以及遗传信息，最终调节受体介导的信号转导，产生广泛的生理效应。rna编辑酶以脱氨的方式使得rna特异位点的腺嘌呤... 详细信息

rna编辑是DNA转录成rna后，rna编辑酶对前体mrna中的核苷酸进行删除、添加或修饰等重新修饰的过程，从而改变其基因序列以及遗传信息，最终调节受体介导的信号转导，产生广泛的生理效应。rna编辑酶以脱氨的方式使得rna特异位点的腺嘌呤脱氨转变为次黄嘌呤，或者是特异位点的胞嘧啶变为尿嘧啶，而次黄嘌呤在碱基配对时被识别为鸟嘌呤。这些替换使得原有的遗传密码或者剪切位点发生转变，从而使其编码的蛋白质结构和功能也发生改变。哺乳动物的rna编辑酶的研究是个新兴的研究方向，本研究分为两部分，分别从移植排斥反应和肝癌这两个肝胆外科目前的热点领域入手，探索大鼠肝移植排斥反应以及人肝癌、癌旁组织中rna编辑酶ADAR1的表达变化及意义。

关键词： rna编辑酶大鼠肝移植移植物排斥肝细胞癌

8-氯腺苷调节rna编辑酶ADAR1对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和迁移的影响

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重庆医科大学学报 2017年第11期42卷 1411-1416页

作者：谢凤莫小梅杨生永李梨重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的:研究8-氯腺苷(8-chloro-adenosine,8-Cl-Ado)对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和迁移的影响,以及与rna编辑酶1(adenosine deaminases acting on rna 1,ADAR1)表达的相关性。方法:蛋白印迹实验检测乳腺癌组织中ADAR1的蛋白表达量以及8-Cl-Ado(10μmol/L)处理乳腺癌SK-BR-3细胞不同时间ADAR1蛋白表达量的变化;MTT法和形态学观察检测不加药组和8-Cl-Ado(10μmol/L)加药组对SK-BR-3细胞增殖的影响;MTT法和伤口愈合实验检测SK-BR-3细胞过表达ADAR1质粒(空白对照组、空载组、ADAR1-P110组、ADAR1-P150组)对8-Cl-Ado作用SK-BR-3细胞增殖及迁移的影响。结果:乳腺癌癌组织中ADAR1-P110和ADAR1-P150蛋白表达量均明显高于癌旁组织(t=9.871,P=0.000;t=7.169,P=0.000);8-Cl-Ado作用SK-BR-3细胞48 h后ADAR1-P110和ADAR1-P150蛋白表达量均明显降低(t=-8.838,P=0.013;t=-19.866,P=0.003);8-Cl-Ado作用SK-BR-3细胞ADAR1-P110组和ADAR1-P150组48 h后增殖抑制率均明显低于空白组(P均为0.000);8-Cl-Ado作用SK-BR-3细胞ADAR1-P110组和ADAR1-P150组48 h后的迁移率均明显高于空白组(P均为0.000)。结论:8-Cl-Ado能明显抑制SK-BR-3细胞增殖和迁移,其作用机制可能与ADAR1的表达下调有关。

关键词： 8-氯腺苷乳腺癌 SK-BR-3 rna编辑酶 ADAR1

小鼠原代淋巴细胞增殖过程中rna编辑酶ADAR1的变化

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第3期18卷 208-210页

作者：赵青川张德新罗晓星苏映军杨静华第四军医大学西京医院肝胆外科陕西西安710032 美国耶鲁大学医学院创伤外科

目的　探索淋巴细胞增殖时rna编辑酶ADAR1的变化。方法　①ADAR1底物的合成 ,利用含有α -tropomyosin基因的质粒pBluescriptSK(+/- ) ,体外转录的方法 ,合成双链rna底物 ,掺入α - 3 2 P -ATP标记 ;②分离小鼠脾脏和淋巴结内的淋巴细... 详细信息

目的　探索淋巴细胞增殖时rna编辑酶ADAR1的变化。方法　①ADAR1底物的合成 ,利用含有α -tropomyosin基因的质粒pBluescriptSK(+/- ) ,体外转录的方法 ,合成双链rna底物 ,掺入α - 3 2 P -ATP标记 ;②分离小鼠脾脏和淋巴结内的淋巴细胞 ,加入IL - 2 /ConA刺激淋巴细胞增殖 ,于不同的时间点收取细胞 ,裂解后用合成好的底物测定ADAR1的活性 ;③应用薄层色谱 ,观察细胞裂解物作用后的rna中有多少腺嘌呤核苷变成了次黄嘌呤核苷 ;④用MTT法测定细胞的增殖率。结果　加入IL - 2 /ConA的淋巴细胞与未加入的比较 ,前者于 30h起ADAR1的活性升高 ,72h达高峰 ,其变化与细胞增殖曲线相一致。结论　首次发现淋巴细胞增殖过程中ADAR1的活性升高。

关键词： rna编辑酶 ADAR1 小鼠原代淋巴细胞

共培养体系中小鼠淋巴细胞rna编辑酶的表达

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第四军医大学学报 2006年第5期27卷 392-395页

作者：孔亚林窦科峰张洪涛冯全新张福琴赵青川第四军医大学西京医院肝胆外科陕西西安710033

目的:通过小鼠脾细胞与人肝细胞肝癌细胞共培养,了解在异种抗原刺激下小鼠淋巴细胞rna编辑酶表达的变化;并且通过免疫抑制药FK506的应用,观察rna编辑酶与淋巴细胞功能状态的联系.方法:观察共培养1,2,4,6,8,10,12,16,20及24h的小鼠脾细胞... 详细信息

目的:通过小鼠脾细胞与人肝细胞肝癌细胞共培养,了解在异种抗原刺激下小鼠淋巴细胞rna编辑酶表达的变化;并且通过免疫抑制药FK506的应用,观察rna编辑酶与淋巴细胞功能状态的联系.方法:观察共培养1,2,4,6,8,10,12,16,20及24h的小鼠脾细胞,用半定量PCR的方法检测rna编辑酶表达的变化,并以相同时段单独培养的小鼠脾细胞rna编辑酶的表达情况进行对照;制备免疫功能受FK506抑制的小鼠模型,取其脾细胞与刺激细胞进行相同时段的共培养,用半定量PCR的方法检测FK506对脾细胞rna编辑酶的影响.结果:①各组淋巴细胞的活细胞率24h内都能达到70%;②共培养组rna编辑酶的表达呈降低后升高、再降低的趋势,对照组呈一直降低、至12h后维持在较低的水平;③FK506对rna编辑酶的表达呈现明显的抑制,与共培养组和对照组相比,这种抑制随着共培养时间的延长而减弱.结论:脾细胞rna编辑酶在异种抗原的刺激下表达活跃,其表达的高低与脾细胞的功能状态有关.

关键词：脾细胞共培养 rna编辑酶 PCR FK506 免疫抑制剂

共培养体系中小鼠淋巴细胞rna编辑酶ADAR1的表达及ADAR1在小鼠细胞免疫应答中的作用研究

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共培养体系中小鼠淋巴细胞RNA编辑酶ADAR1的表达及ADAR1在小鼠细...

作者：孔亚林第四军医大学

学位级别：硕士

rna编辑是近年来发现的一种遗传信息修饰机制，它通过对前rna特异位点的修饰，使腺嘌呤核苷转化为次黄嘌呤核苷(Adenosine-to-inosine，A-to-Ⅰ)，从而在转录后水平对目的基因进行修饰。接受编辑后的rna翻译产物可能会比基因组编码的基... 详细信息

rna编辑是近年来发现的一种遗传信息修饰机制，它通过对前rna特异位点的修饰，使腺嘌呤核苷转化为次黄嘌呤核苷(Adenosine-to-inosine，A-to-Ⅰ)，从而在转录后水平对目的基因进行修饰。接受编辑后的rna翻译产物可能会比基因组编码的基因产物具有多样性，除了传统的蛋白翻译途径外，rna编辑可以产生蛋白的同功异构体，从而在蛋白质多样性的形成中发挥重要的作用。越来越多的研究发现，在哺乳动物体内，许多与维持生命活动有关的重要功能蛋白质都受到A-to-Ⅰrna编辑的调控，使其结构和功能以及信号传导通路都受到影响。目前发现A-to-Ⅰrna编辑酶的底物多局限于中枢系统，而对Ⅰ-mrna含量丰富的众多外周组织中的A-to-Ⅰrna编辑情况的研究相对较薄弱。在哺乳类已经克隆到四种rna编辑酶(ADARs)，即ADAR1、ADAR2、ADAR3、ADATs，它们具有相似的催化结构域。本实验通过建立共培养细胞体系，观察小鼠淋巴细胞在异种抗原细胞的刺激下ADAR1的表达情况;并通过sirna质粒下调小鼠淋巴细胞ADAR1的表达，观察ADAR1表达抑制后的淋巴细胞免疫功能的变化。本实验首次系统的对ADAR1在不

关键词：共培养半定量PCR FK506 rna编辑酶细胞免疫 sirna 小鼠淋巴细胞

rna编辑酶ADAR1在大鼠肝移植排斥反应中的变化

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中国普外基础与临床杂志 2007年第2期14卷 134-137页

作者：张洪涛窦科峰李军冯全新孔亚林张福琴赵青川第四军医大学西京医院肝胆外科西安710032

目的观察rna编辑酶ADAR1在大鼠肝移植排斥反应中的表达变化。方法实验分为4组①同基因移植组(n=15),取Wistar大鼠的肝脏原位移植给Wistar大鼠;②异基因移植组(n=15),取SD大鼠的肝脏移植给Wistar大鼠;③异基因移植+FK506治疗组(n=15),取S... 详细信息

目的观察rna编辑酶ADAR1在大鼠肝移植排斥反应中的表达变化。方法实验分为4组①同基因移植组(n=15),取Wistar大鼠的肝脏原位移植给Wistar大鼠;②异基因移植组(n=15),取SD大鼠的肝脏移植给Wistar大鼠;③异基因移植+FK506治疗组(n=15),取SD大鼠的肝脏移植给Wistar大鼠,术后肌注FK506,2mg/(kg·d);④对照组(n=15),对Wistar大鼠不行肝移植,仅行开、关腹手术。建立大鼠原位肝移植模型,分别于术后第3、5及7d各处死5只大鼠,取脾脏组织,用RT-PCR方法检测ADAR1 mrna的表达变化。结果移植后各组大鼠肝脏、脾脏病理变化随时间发展而呈进行性变化,异基因移植组病理变化最明显。ADAR1 mrna表达在异基因移植组的各个时相点明显高于同基因移植组和异基因移植+FK506治疗组(P<0.001),于第5d时最明显。结论在大鼠原位肝移植发生急性排斥反应时,ADAR1增高程度与排斥反应的强度变化趋势一致。FK506可以抑制ADAR1的表达,明显减轻移植肝组织的急性排斥反应。

关键词： rna编辑酶大鼠肝移植排斥反应

rna编辑酶ADAR1在小鼠细胞免疫应答中的作用研究

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中国普外基础与临床杂志 2006年第3期13卷 279-282页

作者：孔亚林窦科峰冯全新张洪涛李军张福琴赵青川第四军医大学西京医院肝胆外科西安710032

目的通过sirna质粒转染小鼠淋巴细胞,降低rna编辑酶ADAR1的表达,观察其对淋巴细胞免疫功能的影响。方法反复冻融人肝癌细胞株,制备肿瘤细胞可溶性抗原,将分离出的小鼠原代淋巴细胞以ADAR1sirna质粒转染,然后以肿瘤细胞可溶性抗原致敏,... 详细信息

目的通过sirna质粒转染小鼠淋巴细胞,降低rna编辑酶ADAR1的表达,观察其对淋巴细胞免疫功能的影响。方法反复冻融人肝癌细胞株,制备肿瘤细胞可溶性抗原,将分离出的小鼠原代淋巴细胞以ADAR1sirna质粒转染,然后以肿瘤细胞可溶性抗原致敏,以此作为实验组;设原代培养未经转染的致敏小鼠淋巴细胞为对照组,采用细胞毒性实验检测ADAR1对淋巴细胞免疫功能的影响。结果实验组淋巴细胞对靶细胞的杀伤作用明显弱于对照组(Prna编辑酶ADAR1在小鼠细胞免疫中有重要作用,下调rna编辑酶ADAR1表达可以减弱淋巴细胞的杀伤作用。

关键词： rna编辑酶细胞免疫小干扰rna 小鼠