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组织蛋白酶B对自发性高血压大鼠胸腺细胞凋亡的影响(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2001年第1期22卷 28-33页

作者：赵小松田德志丁滢炯朱依纯姚泰复旦大学医学院生理教研室复旦大学医学院生理教研室上海中国 200032

目的:本实验研究自发性高血压大鼠胸腺机能异常的机制。方法:用原位杂交确定蛋白酶B的表达位置,Northern杂交分析组织蛋白酶B的表达水平,用TUNEL和流式细胞仪分别检测胸腺细胞的凋亡情况。结果:在离体和在体水平,胸腺组织蛋白酶B的表达... 详细信息

目的:本实验研究自发性高血压大鼠胸腺机能异常的机制。方法:用原位杂交确定蛋白酶B的表达位置,Northern杂交分析组织蛋白酶B的表达水平,用TUNEL和流式细胞仪分别检测胸腺细胞的凋亡情况。结果:在离体和在体水平,胸腺组织蛋白酶B的表达与胸腺细胞凋亡伴行,在胸腺细胞的胞浆中检测到组织蛋白酶B的转录产物在6周和8周的自发性高血压大鼠胸腺中的表达高于WKY大鼠。结论:自发性高血压大鼠的胸腺细胞凋亡增加,与组织蛋白酶B的表达相关。

关键词：近交SHR大鼠胸腺组织蛋白酶B 细胞凋亡原位杂交 rna印迹

OsCOI1,水稻中一个受茉莉酸甲酯和脱落酸诱导表达的F-box家族基因

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生物化学与生物物理进展 2006年第4期33卷 388-393页

作者：胡廷章王维平曹凯鸣王喜萍复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室生物多样性与生态工程教育部重点实验室生物化学系

利用Blast检索、EST分析和RT-PCR,在水稻中分离到一个与拟南芥COI1同源的新基因,命名为***1编码595个氨基酸.推测的OsCOI1编码蛋白有一个F-boxmotif和16个富含亮氨酸的重复序列,这与拟南芥COI1相似.OsCOI1在氨基酸水平上和COI1有很高的... 详细信息

利用Blast检索、EST分析和RT-PCR,在水稻中分离到一个与拟南芥COI1同源的新基因,命名为***1编码595个氨基酸.推测的OsCOI1编码蛋白有一个F-boxmotif和16个富含亮氨酸的重复序列,这与拟南芥COI1相似.OsCOI1在氨基酸水平上和COI1有很高的同源性(74%).经半定量RT-PCR法和rna印迹分析,表明水稻中OsCOI1表达水平在经茉莉酸甲酯和脱落酸处理后呈明显变化,但不受水杨酸和乙烯的影响,说明OsCOI1可能在茉莉酸信号途径和脱落酸途径中具有特定功能.

关键词：水稻 F-box motif 半定量RT-PCR rna印迹茉莉酸信号途径脱落酸途径

猪生殖与呼吸综合征病毒5′非翻译区序列的反向遗传操作

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中国兽医科学 2007年第8期37卷 655-660页

作者：高飞姚火春孙志王金勇袁世山中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心农业部动物寄生虫病重点实验室上海200232 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,利用突变PCR获得在病毒基因组5′非编码区(5′UTR)和ORF1起始密码子之间插入NdeⅠ的全长克隆pTLNd4,并以此为基础将5′UTR替换为欧洲株的5′UTR,获得全长... 详细信息

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,利用突变PCR获得在病毒基因组5′非编码区(5′UTR)和ORF1起始密码子之间插入NdeⅠ的全长克隆pTLNd4,并以此为基础将5′UTR替换为欧洲株的5′UTR,获得全长克隆pTLV8。以体外转录的rna转染MARC-145细胞。结果显示,pTLNd4产生了细胞病变(CPE),而pTLV8未产生。通过RT-PCR和Northern blot试验,分别对这2株突变病毒的基因组rna复制和亚基因组mrna转录水平进行了分析,同时还对pTLNd4进行了病毒学试验。证实,它们与亲本病毒无论从分子生物学水平或病毒学水平都无明显差异;pTLV8虽未产生CPE,但在病毒传代细胞中检测到了基因组rna,说明替换不同基因型5′UTR的突变病毒虽然丧失了复制能力和感染性,但仍然能够提供病毒rna合成所需要的顺式调控因子。

关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒感染性克隆体外转录转染 rna印迹

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mirna检测方法的研究进展

药物分析杂志 2020年第1期40卷 70-82页

作者：刘亮肖瑶张驰武汉大学中南医院药学部武汉430071 武汉市第八医院药剂科武汉430010 湖北省妇幼保健院药剂科武汉430070

mirna在基因调控方面起着重要作用,而其异常表达与多种疾病相关,其异常和特异性的表达提示其可成为诊断或预后的生物标志物。因此准确测定其表达水平对于其应用十分关键。但是由于mirna序列短,同源序列相似度高,含量低,缺乏能够使其选... 详细信息

mirna在基因调控方面起着重要作用,而其异常表达与多种疾病相关,其异常和特异性的表达提示其可成为诊断或预后的生物标志物。因此准确测定其表达水平对于其应用十分关键。但是由于mirna序列短,同源序列相似度高,含量低,缺乏能够使其选择性扩增的共同特征,使得检测mirna十分具有挑战性。本文对近年来mirna的检测方法进行了概述,包括传统方法及其改进进展,以及一些新的检测方法,并对这些方法的优缺点进行了总结。

关键词： mirna检测方法研究进展 rna印迹微阵列实时定量PCR(qRT-PCR) 生物标志物

人肿瘤相关基因Dief 33L在肺癌中的表达

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第二军医大学学报 2001年第Z1期22卷 34-36页

作者：惠雨徐志云余龙张宝仁辽宁省丹东市第230医院外三科丹东118000 第二军医大学长海医院胸心外科上海200433 复旦大学遗传学研究所第二军医大学长海医院胸心外科上海200433

目的:观察Dief33L基因在肺癌组织中的表达情况,并初步探讨其与肺癌的关系.方法:通过Northern印迹技术,检测29例肺癌和正常肺组织中的Dief33L基因mrna的表达,杂交结果用UVP全自动图像分析仪检测杂交信号,并分析mrna的表达与肺癌临床特征... 详细信息

目的:观察Dief33L基因在肺癌组织中的表达情况,并初步探讨其与肺癌的关系.方法:通过Northern印迹技术,检测29例肺癌和正常肺组织中的Dief33L基因mrna的表达,杂交结果用UVP全自动图像分析仪检测杂交信号,并分析mrna的表达与肺癌临床特征的关系.结果:Dief33L基因在癌旁正常组织中均有不同程度表达,在肺鳞癌组织中均未见表达,在部分肺腺癌组织有表达,且相对表达量较癌旁肺组织显著降低(P<0.05);在有或无淋巴结转移的肺腺癌组织之间相比也有显著差异(P<0.05).结论:Dief33L 基因的表达量降低可能是肺腺癌发生发展过程中一个因素,且可能与腺癌的转移有关.

关键词：肺肿瘤 Dief33L基因 rna印迹

系统性红斑狼疮患者CCR7^+CD8^+CD45RO^+T细胞诱导CD4^+T细胞向Th2分化

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中华皮肤科杂志 2005年第6期38卷 374-376页

作者：陈朗吴春晨何玉玲谢珞琨周钢谭锦泉武汉大学医学院免疫系 430071

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CCR7+CD8+CD45RO+记忆性T细胞对CD4+T细胞的诱导分化作用及其与SLE发病的关系。方法流式细胞仪、实时定量RT-PCR和rna印迹检测同系CCR7+CD8+CD45RO+T细胞和树突细胞协同刺激CD4+T细胞分泌细胞因... 详细信息

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CCR7+CD8+CD45RO+记忆性T细胞对CD4+T细胞的诱导分化作用及其与SLE发病的关系。方法流式细胞仪、实时定量RT-PCR和rna印迹检测同系CCR7+CD8+CD45RO+T细胞和树突细胞协同刺激CD4+T细胞分泌细胞因子。结果活动期SLE患者CCR7+CD8+CD45RO+记忆性T细胞诱导CD4+T细胞表达Th2类细胞因子:白介素4的表达效率显著高于正常人对照组和非活动期SLE患者组(P<0.01),1型调节性T细胞(Tr1)源性细胞因子:白介素10和转化生长因子β的表达效率均低于正常对照组和非活动期SLE患者组(P<0.01);而活动期和非活动期SLE患者干扰素γ的表达效率显著低于正常人对照组(P<0.01)。结论活动期SLE患者外周血CCR7+中央型记忆性T细胞可与树突细胞相互作用,诱导同系CD4+T细胞向Th2分化,发挥CCR7-CD45RO+效应性记忆性T细胞的功能。

关键词： CD4^+T细胞系统性红斑狼疮患者细胞诱导 CD45RO^+T细胞记忆性T细胞 SLE患者 Th2类细胞因子转化生长因子β 诱导分化作用分泌细胞因子表达效率调节性T细胞细胞相互作用活动期流式细胞仪 rna印迹 T细胞表达正常对照组

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mirna的鉴定及检测方法的概述

饲料工业 2014年第3期35卷 58-60页

作者：丛立新张金玉赵志辉吉林农业科技学院动物科学学院吉林省吉林市132101 吉林大学农学部畜牧兽医学院吉林长春130062

Microrna(mirna)因其分子序列短小,与基因组中较多的序列以互补方式存在,在不同生物体内以不同的方式与靶基因结合,且能够与多种蛋白相互作用,因而建立一种有效且普遍适用的鉴定及检测方法异常困难。科研人员经过不断的研究和探索,总结... 详细信息

Microrna(mirna)因其分子序列短小,与基因组中较多的序列以互补方式存在,在不同生物体内以不同的方式与靶基因结合,且能够与多种蛋白相互作用,因而建立一种有效且普遍适用的鉴定及检测方法异常困难。科研人员经过不断的研究和探索,总结出Microrna的鉴定和检测方法,研究重点介绍mirna的两种鉴定方法及其几种有效的检测方法,为进一步对其进行研究提供理论基础。

关键词： Microrna 芯片技术 rna印迹原位杂交

BMP-2 mrna在实验性黄韧带骨化组织中的表达及其意义

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中国矫形外科杂志 2001年第8期8卷 787-790页

作者：陈雄生贾连顺倪斌戴建新第二军医大学长征医院骨科上海200003 第二军医大学分子遗传教研室

目的 :从分子水平研究BMP 2在黄韧带骨化过程中的作用机理。方法 :以rhBMP 2诱导的黄韧带骨化 (实验组 ,O组 )为研究对象 ,分别于诱导物植入后 2、4、6周取实验节段黄韧带 ,提取总rna ,采用Dotblot和Northernblot方法检测其BMP 2mrna的... 详细信息

目的 :从分子水平研究BMP 2在黄韧带骨化过程中的作用机理。方法 :以rhBMP 2诱导的黄韧带骨化 (实验组 ,O组 )为研究对象 ,分别于诱导物植入后 2、4、6周取实验节段黄韧带 ,提取总rna ,采用Dotblot和Northernblot方法检测其BMP 2mrna的表达程度 ,设立PBS溶液 /明胶海绵植入为实验对照组 (EC组 ) ,未手术动物为阴性对照组(N组 ) ,pSBMP 2质粒为阳性对照组 (P组 )。结果 :Dotblot和Northernbloe放射自显影图像显示 :rhBMP 2植入 2周时 ,黄韧带内BMP 2mrna表达程度最高 ,然后逐渐下降 ,到 6周时明显减弱 ,与病理组织学研究中所见的韧带组织中成纤维细胞软骨化生的活跃程度呈正相关。实验对照组和阴性对照组均未见BMP 2mrna表达。图像灰度扫描示 :0 2组、0 4组和 0 6组BMP 2mrna的表达程度分别为 0 .6 15± 0 .14 84、 0 .443± 0 .0 982、 0 .2 32± 0 .0 749。结论 :rhBMP 2诱导的骨化过程中黄韧带组织内存在不同程度BMP 2mrna的表达 ,其表达水平与成纤维细胞软骨化生的活跃程度呈正相关 ;内源性BMP -2可能参与黄韧带骨化的启动和持续发展。

关键词：脊柱黄韧带骨化骨形态发生蛋白-2 mrna表达斑点 rna印迹