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miR-125a-5p对子宫内膜癌rl95-2细胞增殖凋亡的影响

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贵州医科大学学报 2018年第11期43卷 1279-1283页

作者：毛小梅马园园周宓郝小华黄明陈必良空军军医大学西京医院陕西西安710032

目的:探讨miR-125a-5p对子宫内膜癌rl95-2细胞增殖、凋亡的影响及可能作用机制。方法:取对数生长期rl95-2细胞随机分为未转染组、mimic阴性对照组和mimic转染组,做相应处理后24 h,采用Real-time PCR检测miR-125a-5p表达,MTT检测细胞增殖... 详细信息

目的:探讨miR-125a-5p对子宫内膜癌rl95-2细胞增殖、凋亡的影响及可能作用机制。方法:取对数生长期rl95-2细胞随机分为未转染组、mimic阴性对照组和mimic转染组,做相应处理后24 h,采用Real-time PCR检测miR-125a-5p表达,MTT检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、cleaved caspase3、cytochrome C)和信号通路相关蛋白(p-AKT、AKT、p-mTOR、m TOR)的表达。结果:同mimic阴性对照组比较,mimic转染组中miR-125a-5p表达显著增加,细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显升高,Bax、cleaved caspase3表达水平显著上调,Bcl-2和线粒体cytochrome C、p-AKT、p-mTOR的表达水平明显下降。结论:miR-125a-5p能够抑制子宫内膜癌rl95-2细胞增殖,机制可能与其改变PI3K/AKT/m TOR通路活性及调节凋亡相关基因有关。

关键词： miR-125a-5p 子宫内膜癌 rl95-2细胞细胞增殖细胞凋亡

醋酸诺美孕酮抑制人子宫内膜癌rl95-2细胞增殖可能与上调SUFU和Wnt7a的表达有关

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醋酸诺美孕酮抑制人子宫内膜癌RL95-2细胞增殖可能与上调SUFU和Wn...

YAP1靶向抑制剂CA3对人子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2...

作者：马阿影周洁芸钟瑞华谢淑武杨文捷李钊李国停郭湘洁朱焰复旦大学生殖与发育研究院上海市计划生育科学研究所生殖药理组国家人口计生委计划生育药具重点实验室上海交通大学附属上海市第一人民医院呼吸内科

目的:目前醋酸诺美孕酮（Nomegestrol acetate,NOMAC）已成功用于治疗一些妇科疾病,如月经紊乱等,并与雌二醇结合作为口服避孕药。本研究主要从体内、体外探讨NOMAC用于子宫内膜癌治疗的可能性及相关机制。方法:采用CCK-8法和EdU细胞增... 详细信息

目的:目前醋酸诺美孕酮（Nomegestrol acetate,NOMAC）已成功用于治疗一些妇科疾病,如月经紊乱等,并与雌二醇结合作为口服避孕药。本研究主要从体内、体外探讨NOMAC用于子宫内膜癌治疗的可能性及相关机制。方法:采用CCK-8法和EdU细胞增殖检测方法检测人子宫内膜癌细胞rl95-2增殖率。以全基因表达谱芯片技术检测NOMAC对人子宫内膜癌细胞rl95-2基因表达的影响,RT-qPCR和Western blotting验证差异基因的表达。选择成功建立皮下裸鼠移植瘤模型的裸鼠,以醋酸甲羟孕酮（medroxyprogesterone acetate,MPA 100 and 200 mg/kg）为对照,采用不同剂量的NOMAC（50、100、200 mg/kg）治疗28天。结果:NOMAC呈浓度依赖性的显著抑制rl95-2细胞增殖。进一步的研究显示NOMAC能够显著抑制裸鼠皮下移植瘤生长,不同剂量NOMAC（50、100、200mg/kg）的抑瘤率分别为24.74%、47.04%、58.06%,且优于MPA阳性对照组（MPA100和200 mg/kg剂量组的抑瘤率分别为41.06%和27.01%）。全基因表达谱芯片结果显示NOMAC显著改变包括SUFU和Wnt7a等细胞增殖相关基因的表达。在rl95-2细胞及rl95-2细胞诱导的移植瘤组织中,NOMAC能够显著上调SUFU和Wnt7a的表达。结论:NOMAC显著抑制rl95-2细胞增殖并显著抑制rl95-2细胞诱导的移植瘤生长,且优于MPA。初步的机制探讨显示NOMAC对子宫内膜癌细胞增殖的抑制作用可能与上调SUFU和Wnt7a表达相关。

关键词：醋酸诺美孕酮子宫内膜癌 rl95-2细胞增殖 SUFU Wnt7a

来源： cnki会议评论

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中国现代应用药学 2023年第10期40卷 1307-1312页

作者：田爽赵莹刘超锦州医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室辽宁锦州121000

目的探讨YAP1靶向抑制剂CA3对人子宫内膜癌Ishikawa和rl95-2细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法采用不同浓度CA3处理Ishikawa和rl95-2细胞,利用CCK-8和克隆形成试验检测细胞增殖能力,微板检测系统检测细胞内ROS水平,流式细胞术检测... 详细信息

目的探讨YAP1靶向抑制剂CA3对人子宫内膜癌Ishikawa和rl95-2细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法采用不同浓度CA3处理Ishikawa和rl95-2细胞,利用CCK-8和克隆形成试验检测细胞增殖能力,微板检测系统检测细胞内ROS水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测YAP1、MCM5、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果与对照组相比,CA3处理组能够明显降低细胞生存率、减少克隆形成数目、增强细胞内ROS水平和诱导细胞凋亡,下调YAP1、MCM5和Bcl-2蛋白表达水平,但对Bax蛋白表达水平没有影响。结论CA3靶向沉默YAP1抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡,起到明显的抗肿瘤作用,有望成为临床干预和治疗子宫内膜癌的潜在药物。

关键词： CA3 Ishikawa细胞 rl95-2细胞细胞增殖细胞凋亡

Galectin-3表达抑制对子宫内膜上皮细胞生长周期和黏附性的影响

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复旦学报（医学版） 2007年第2期34卷 169-175页

作者：雷彩霞张炜孙晓炜杜国平王丽刘银坤复旦大学附属妇产科医院妇产科研究所生殖内分泌科上海200011 复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032

目的探讨半乳凝素-3（Galectin-3）在人类子宫内膜容受性形成中的作用.方法采用人子宫内膜上皮细胞株rl95-2进行体外培养,应用RNA干扰技术（siRNA）抑制Galectin-3表达,RT-PCR法和western blot测定Galectin-3 mRNA和蛋白表达水平.体... 详细信息

目的探讨半乳凝素-3（Galectin-3）在人类子宫内膜容受性形成中的作用.方法采用人子宫内膜上皮细胞株rl95-2进行体外培养,应用RNA干扰技术（siRNA）抑制Galectin-3表达,RT-PCR法和western blot测定Galectin-3 mRNA和蛋白表达水平.体外观察细胞黏附率的变化,并用流式细胞术观察Galectin-3表达抑制对细胞生长和整联蛋白β1表达的影响.结果 Galectin-3 siRNA转染效率达到70%～90%.siRNA转染后Galectin-3 mRNA和蛋白表达水平可下调70%～90%.Galectin-3表达抑制后rl95-2细胞G1期上升,S期下降;整联蛋白β1表达降低;对细胞外纤维黏连蛋白（Fibronectin,FN）黏附性显著降低.结论 Galectin-3可以影响子宫内膜上皮细胞的增殖、黏附,对黏附性的影响可能与调节整联蛋白的表达有关.Galectin-3可能通过调节细胞增殖、黏附等过程参与子宫内膜容受性的形成.

关键词：半乳凝素子宫内膜容受性整联蛋白黏附性 rl95-2细胞

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共轭亚麻酸对子宫内膜癌细胞凋亡的影响

共轭亚麻酸对子宫内膜癌细胞凋亡的影响

作者：陈红州大连工业大学

学位级别：硕士

共轭亚麻酸(Conjugated linolenic acid, CLnA)是十八碳多不饱和脂肪酸的一组位置和几何异构体,具有抑制肿瘤形成、增强机体免疫力和影响脂代谢等功能。石榴酸(c9,t11,c13-CLnA, punicic acid, PA)和a-桐酸(c9,t11,t13-CLnA, alpha-eleostearic acid, α-ESA)是共轭亚麻酸的两种常见异构体。本文通过分步结晶法提取并纯化了石榴酸,研究了石榴酸和α-桐酸对子宫内膜癌细胞rl95-2凋亡的影响,并对其作用机制进行了初步探讨。首先通过单因素试验,分别研究了-18℃、4℃、25℃条件下,结晶时间对石榴酸纯度的影响。结果为：-18℃条件下结晶时间1h;4℃条件下结晶时间2h;25℃条件下结晶时间16h,乙醇与脂肪酸的比为1：2(v/v)时,石榴酸纯度可以达到95.2%。进一步分析了石榴酸和α-桐酸对子宫内膜癌细胞凋亡的影响。MTT分析结果显示,在10μM至160μM的浓度范围内,石榴酸和α-桐酸处理人子宫内膜癌细rl95-248小时,能够明显抑制细胞活力,其作用呈现时间依赖性和剂量依赖性。石榴酸和α-桐酸的半数致死浓度(IC50)分别为30μM和60μM。应用Hoechst荧光染色荧光显微镜观察细胞核形态变化,石榴酸和α-桐酸处理48h后,细胞核体积明显变小,并呈现皱缩致密的颗粒状的强荧光,可见核固缩或断裂碎片。应用流式细胞术分析石榴酸和α-桐酸对细胞凋亡的影响,发现石榴酸和α-桐酸能够诱导人子宫内膜癌细胞rl95-2的凋亡。40μM的石榴酸和α-桐酸处理细胞48h,凋亡率分别为68.24%和44.91%。应用蛋白免疫印迹分析,发现石榴酸和α-桐酸能够上调Bax、活性型caspase-3、p53凋亡相关蛋白和降低了Bcl-2凋亡相关蛋白的表达。此外,α-桐酸和石榴酸还能够上调PPARy蛋白的表达。综上,本文应用分步结晶法提取并纯化了石榴酸,发现石榴酸和α-桐酸能够显著诱导子宫内膜癌rl95-2细胞的凋亡,其作用可能与对Bax、Bcl-2、caspase-3、p53等凋亡相关蛋白及脂质过氧化相关蛋白PPARy表达的调控有关。

关键词： α-桐酸石榴酸提纯凋亡 rl95-2细胞

子宫内膜上皮细胞整合素αvβ3超表达及其对胚胎黏附的影响

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子宫内膜上皮细胞整合素αvβ3超表达及其对胚胎黏附的影响

作者：魏勉扬州大学

学位级别：硕士

一、目的和意义胚胎着床(Embryo implantation)是处于活化状态的胚胎定位、黏附、入侵并最终植入容受态子宫内膜的复杂过程。胚胎的侵入能力和子宫内膜容受性(Endometrial receptivity, ER)的建立是胚胎成功着床的关键。随着辅助生殖技... 详细信息

一、目的和意义胚胎着床(Embryo implantation)是处于活化状态的胚胎定位、黏附、入侵并最终植入容受态子宫内膜的复杂过程。胚胎的侵入能力和子宫内膜容受性(Endometrial receptivity, ER)的建立是胚胎成功着床的关键。随着辅助生殖技术(Assisted reproductive technology, ART)的发展,个体化的控制性超促排卵方案、受精及实验室胚胎培养技术的进步使胚胎质量得到了显著提高,但低种植率始终是生殖医学领域尚未解决的难题之一。子宫内膜容受性受损可能是导致胚胎低种植率的主要原因,而无法诊断和治疗子宫内膜容受性受损是ART成功的主要障碍。因此,评估和改善子宫内膜容受性对提高ART成功率具有极其重要的临床意义,探究子宫内膜容受性标志物及其作用机制是改善内膜容受性和提高妊娠率的基础。整合素a v β3(Integrin alphavbeta3, ITGAVB3)特异性表达于子宫内膜种植窗期(Window of implantation, WOI),其表达异常使子宫内膜容受性受损,与不孕症的发生密切相关,是目前公认的子宫内膜容受性重要生物学标志之一,但其在胚胎着床过程中的具体作用机制目前仍不明确。本研究通过构建整合素α ν β3真核表达载体,使子宫内膜上皮细胞的整合素α ν β3水平超表达,观察其对胚胎细胞球状体黏附的影响,初步探讨整合素α v β3在胚胎黏附过程中的作用机制,为进一步阐明其在胚胎着床及生殖过程中的功能及分子机制提供研究基础。二、方法1.构建pcDNA3.1-3FLAG-ITGAV、pcDNA3.1-3FLAG-ITGB3真核表达载体,通过脂质体转染人子宫内膜上皮细胞(rl95-2细胞)。2.经Real time RT-PCR检测整合素α v (ITGAV)、整合素β3(ITGB3)及骨桥蛋白(OPN)的mRNA表达。3.经流式细胞术、间接免疫荧光检测IITGAV、ITGB3的蛋白表达。4.建立Bewo细胞球状体与rl95-2细胞单层的体外胚胎着床模型,通过黏附实验观察和分析整合素αvβ3超表达对胚胎与子宫内膜上皮细胞的黏附情况的影响,经间接免疫荧光检测共培养体系ITGAV、ITGB3及OPN的表达。三、结果1.与单独转染pcDNA3.1-3FLAG-ITGAV、pcDNA3.1-3FLAG-ITGB3相比,ITGAV、ITGB3真核表达载体共转染使rl95-2细胞的整合素αv、整合素β3表达水平均明显升高。2.rl95-2细胞整合素αvβ3超表达显著提高Bewo球状体与rl95-2细胞单层的黏附率(74.44±4.51%vs53.31±3.14%,Prl95-2细胞单层的扩展(118.26±6.00μm vs111.88Π3.72μm, P细胞整合素avβ3超表达促进Bewo球状体整合素α v和骨桥蛋白的表达。四、结论1.成功构建了1TGAV、ITGB3真核表达载体。2. ITGAV、ITGB3共转染使rl95-2细胞的整合素ανβ3水平超表达。3.子宫内膜细胞整合素ανβ3超表达促进胚胎在子宫内膜的黏附和扩展。4.整合素αvβ3和骨桥蛋白介导胚胎在子宫内膜细胞上的黏附与侵入,在胚胎着床中发挥重要作用。

关键词：整合素αvβ3 rl95-2细胞超表达子宫内膜容受性胚胎着床

HAND1在子宫内膜容受性和胚胎着床中的作用及机制研究

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HAND1在子宫内膜容受性和胚胎着床中的作用及机制研究