检索结果-南通市图书馆

作者：廖萍四川农业大学

学位级别：硕士

被子植物是世界上现存最大的植物类群,其主要原因之一便是能够进行有性生殖。而正是因为花的出现才保证被子植物能够有效地进行有性生殖,这也是为什么被子植物被称为显花植物的原因。五彩缤纷、各式各样的花为被子植物提供了更多地生殖... 详细信息

被子植物是世界上现存最大的植物类群,其主要原因之一便是能够进行有性生殖。而正是因为花的出现才保证被子植物能够有效地进行有性生殖,这也是为什么被子植物被称为显花植物的原因。五彩缤纷、各式各样的花为被子植物提供了更多地生殖机会。而花器官的形态结构,特别是花型对称性的发育是影响花多样性的因素之一,因此,对花器官形态建成调控机制的研究也成为了近年来进化发育生物学的研究热点之一。通过对模式植物金鱼草花对称性发育分子调控机制的研究,人们对双子叶植物中的花对称性调控机制也有了较为深入的认识。虽然双子叶植物和单子叶植物在花器官发育的分子机制上具有一定保守性,但是,由于单子叶植物在花器官形态上存在着显著差异,单子叶的花器官形态结构及对称性建成的分子机制可能与双子叶研究结果不同。另一方面,作为最重要的粮食作物之一,水稻具有基因组小,易于进行转基因操作等优点,并且已经完成了全基因测序,因此,水稻作为单子叶模式植物,为我们提供了理想的实验材料。通过筛选突变体,我们发现了内稃发育缺陷突变体并通过对单双突变体的表型观察和表达模式分析,确定这些基因在水稻花器官形成建成及花型对称性发育过程中的作用以及相互关系。研究结果如下： 1、repEN1缺失影响水稻小花内稃的发育 repen1突变体的内稃侧的稃状结构为内外稃的嵌合体,部分区域具有内稃属性,而部分区域具有外稃属性,这说明repen1突变体的内稃发生了向外稃属性的部分转化,repEN1的缺失影响水稻小花内稃属性的发育,这种影响早在内稃原基开始起始时就发生了。因此,我们可以推测repEN1从内稃原基起始时期就开始参与调控了水稻小花内稃发育。 ***1与rep1相互作用,共同参与调控水稻小花内稃发育 rep1/repen1双突变的表型与rep1和repen1单突变体的表型具有显著差异,而且rep1在repen1中的表达量轻微上调。因此,我们推论repEN1与rep1之间的相互作用是由repEN1对rep1表达量上的抑制产生的。并且,repEN1和rep1共同参与到了对水稻小花内稃发育的调控过程中。 ***1与OsMADS6共同作用于水稻小花内稃发育过程 repen1/osmads6双突变的表型与osmads6和repen1单突变体的表型具有显著差异,而且OsMADS6在repen1中的表达量轻微上调,同时在表达部位上也发生明显改变。因此,我们推论repEN1与OsMADS6之间通过由repEN1对OsMADS6表达量上的抑制以及表达部位的改变共同参与调控水稻小花内稃发育过程。 ***1、rep1与OsMADS6通过对影响水稻小花内稃发育,共同参与调控水稻花对称性 repEN1可以通过参与内稃发育,从而参与调控水稻花对称性的。而对rep1/repen1和repen1/osmads6双突变表型的观察,不仅表明了rep1、repEN1和OsMADS6共同参与水稻小花的内稃发育,同时说明它们的缺失改变了花器官的数量和分布,从而共同参与到花对称性的建成。

关键词：水稻内稃花对称性 rep1 repEN1 OsMADS6

OsMADS6、OsMADS32和rep1基因相互作用调控水稻内稃发育机理的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

OsMADS6、OsMADS32和REP1基因相互作用调控水稻内稃发育机理的研究

作者：张亮四川农业大学

学位级别：硕士

水稻是全球上最重要的粮食作物之一,其花器官(生殖器官)的发育直接影响水稻的产量,花器官发育时期也是农业生产中提高产量的关键时期。在单个水稻花器官中,其外轮器官(内外稃)可以保护内轮生殖器官免受病虫害以及为其提供糖类等营养。因... 详细信息

水稻是全球上最重要的粮食作物之一,其花器官(生殖器官)的发育直接影响水稻的产量,花器官发育时期也是农业生产中提高产量的关键时期。在单个水稻花器官中,其外轮器官(内外稃)可以保护内轮生殖器官免受病虫害以及为其提供糖类等营养。因此,对水稻花器官发育,特别是单子叶植物特有的外轮器官(内外稃)发育分子调控机理的研究具有重要的理论和实际应用意义。通过正反向遗传学的方法,近年来有不少水稻花器官发育分子调控机理的研究被报道,但关于水稻内外稃的属性决定和后期形态形成的分子机理的研究仍然较少。我们实验室前期通过正向遗传学的方法获得了三个参与调控水稻内稃发育的关键调控基因,分别是TGP类转录因子RETARDED PALEA1 (rep1),以及MADS-box类基因OsMADS6和OsMADS32。前期的研究结果表明OsMADS6、OsMADS32、rep1在内稃属性决定上起重要作用。。但这些基因是否有遗传或分子水平的相互作用,在内稃原基发育和后期形态建成过程中如何协议,共同调控正常的发育过程等生物学问题仍不清楚。本论文主要以0smads6、osmads32和 repl三个突变体为研究材料,通过遗传学和分子生物学的方法研究OsMADS6、OsMADS32、和 repl基因在调控水稻内稃发育中的具体作用机制,得到以下主要研究结果：1.观察osmads6/Osmads32、osmads6/repl双突变和osmads 6/osmads3-2/repl三突变体内稃发育的过程。结果显示无论在单突变体及双突变体中或者三突变体中,内稃属性均发生转化,内稃维管束,边缘mtp结构等内稃属性均像osmads6单突变体,表明在内稃属性建成中,OsMADS6位于OsMADS32和RE pl基因的遗传学上游。在内稃形态建成,即后期细胞分裂分化发育过程中,内稃表皮细胞形态均像osmads6单突变体表型。这些结果暗示OsMADS6在决定内稃发育上具有更具重要的作用。2.通过QRT-PCR及mRNA原位杂交实验,进一步分析了三者基因水平的调控关系。结果表明：OsMADS6、 OsMADS32和rep1在调控内稃早期属性决定及后期形态建成上的调控机理不同。在水稻小花发育早期(内稃起始),OsMADS32基因可能抑制OsMADS6基因转录来调控内稃属性决定;OsMADS6可能通过促进rep1的表达来调控内稃属性决定;OsMADS32可促进rep1的表达来调控内稃属性决定。在内稃后期发育中,OsMADS6可通过抑制OsMADS32的表达,同时促进rep1表达来调控内稃后期的形态建成;OsMADS32可促进OsMADS6及rep1表达调控内稃后期形态建成;rep1可抑制OsMADS6表达来调控内稃后期形态建成。3.通过双酵母杂交实验,研究了这三个基因在蛋白水平上互作关系,结果表明：在酵母双杂交实验体系中,OsMADS6可以与OsMADS32蛋白互作,OsMADS6可以与rep1互作,但OsMADS32与rep1并没有检测到蛋白互作。暗示OsMADS6可能与OsMADS32和rep1可形成蛋白复合体来调控内稃发育。

关键词：水稻内稃 OsMASD6 OsMADS32 rep1 基因互作

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

一无脉络膜症家系基因突变位点筛查

一无脉络膜症家系基因突变位点筛查

作者：李爽爽郑州大学

学位级别：硕士

背景与目的无脉络膜症(choroideremia,CHM)是一种进行性脉络膜视网膜营养不良性疾病,发病率约为1/50000～1/100000,遗传方式为X染色体连锁隐性遗传。男性患者在青少年时期开始出现夜盲,随年龄增长周边视野逐渐丧失,视网膜色素上皮、光... 详细信息

背景与目的无脉络膜症(choroideremia,CHM)是一种进行性脉络膜视网膜营养不良性疾病,发病率约为1/50000～1/100000,遗传方式为X染色体连锁隐性遗传。男性患者在青少年时期开始出现夜盲,随年龄增长周边视野逐渐丧失,视网膜色素上皮、光感受器及脉络膜进行性萎缩,晚期可失明。女性携带者一般不表现严重的视力损害,可仅有斑片状色素沉着或视网膜色素上皮变性。无脉络膜症的发病是由于CHM基因突变引起的rep1蛋白功能丧失,目前无有效的药物治疗,随着技术的发展,国外已开展1/2期基因治疗临床实验,初步治疗数据乐观,仍面临着挑战。因疾病早期与视网膜色素变性等难以鉴别,常通过基因测序技术来辅助临床诊断。本研究旨在利用全外显子测序技术对一临床拟诊无脉络膜症家系进行辅助诊断及基因突变位点筛查,并分析突变位点与疾病表型的关系。资料与方法1.本家系先证者于外院诊断视网膜色素变性,基因检测未检测到相关致病突变位点,临床检查符合无脉络膜症,为明确诊断,对3代共9名家系成员进行详细的全身及眼科检查,并行进一步基因筛查。随机收集100名无眼部及全身系统性基础疾病的志愿者作为正常对照。2.抽取家系成员的外周静脉血提取DNA,对先证者进行全外显子基因测序,比对数据库基因筛选出候选基因,对候选基因进行高通量测序,采用聚合酶链反应(PCR)扩增突变基因的蛋白质编码区域,对精制后的PCR产物进行基因组测序和突变分析。发现可疑突变后对家系其他成员及100名正常对照者进行Sanger测序验证,并采用CADD等分析突变位点致病性。结果1.本家系先证者(III2)为男性,主诉夜盲,双眼中心视力正常,视野缩窄呈管形,眼底可见散在骨细胞样色素沉着及后极部视网膜色素上皮和脉络膜萎缩。先证者母亲(II2)自诉无自觉症状,但查体结果示左眼视力下降,双眼眼底可见黄白色椒盐状眼底改变、视网膜色素上皮及脉络膜的萎缩。余家系成员未发现类似临床表现及眼部疾病。2.通过全外显子测序发现先证者X染色体CHM基因存在一个半合子突变位点,其12号外显子第1441号核苷酸由鸟嘌呤变异为胸腺嘧啶(c.1441G>T),引起编码的氨基酸改变p.E481X,为无义突变,导致肽链合成提前终止,CADD等预测为有害突变,与CHM高度相关。Sanger测序验证显示先证者母亲(II2)存在此突变,余家系成员及100名正常对照者中均不存在此突变。遗传方式为X染色体隐性遗传。基因库数据显示该突变为国内外文献均未报道过的新发突变位点。结论1.本研究通过全外显子测序对一临床拟诊的无脉络膜症家系进行辅助诊断,筛查出X染色体CHM基因12号外显子上一个新发突变位点(c.1441G>T,p.E481X),该突变为无义突变,导致其编码的蛋白质功能丧失。***测序验证余家系成员及正常对照均无此突变,CADD、MutationTaster等软件预测该突变为致病突变,该家系遗传方式为X染色体隐性遗传。

关键词：无脉络膜症基因突变 CHM基因 rep1

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻花器官发育分子调控机制的研究

水稻花器官发育分子调控机制的研究

作者：顾伟航上海交通大学

学位级别：硕士

水稻花器官是水稻生殖发育的基本单位。水稻花器官的形态建成是水稻发育的重要组成部分。水稻花器官形态建成是否能够正常完成将会直接影响水稻产量和稻米品质。因此,研究水稻花器官形态建成的分子调控机制,不仅会促进我们对水稻的生殖... 详细信息

水稻花器官是水稻生殖发育的基本单位。水稻花器官的形态建成是水稻发育的重要组成部分。水稻花器官形态建成是否能够正常完成将会直接影响水稻产量和稻米品质。因此,研究水稻花器官形态建成的分子调控机制,不仅会促进我们对水稻的生殖发育机制进行深入探索,进一步完善水稻中的ABCDE模型,而且对于现代农业生产也同样具有及其重要的意义。研究表明:从双子叶植物-拟南芥和金鱼草中发现并提出的用于揭示花器官发育调控机制的ABCDE模型只部分适用于揭示水稻花器官形态建成;但是水稻外轮花器官（内外稃）的形态结构较为特殊,这也暗示在水稻外轮花器官（内外稃）的形态建成过程可能进化出新的分子调控机制。本论文一方面通过挖掘新的参与水稻内外稃形态建成调控因子,包括筛选新的水稻外轮花器官突变体,表型分析以及基因克隆。另一方面通过探索水稻内稃形态建成新的的分子机制来进一步解析水稻外轮花器官形态建成分子调控机制。基于前期的遗传学分析,本论文对水稻外轮花器官畸形发育突变体j26进行了初步的表型分析以及基因定位。与野生型花器官相比,突变体的外轮花器官出现了3种畸形转变（I型、II型、III型）。I型的畸型花器官的数量约占突变体花器官总量的55%;其花器官的内稃明显变大并且发生明显伸长,最终导致整个突变体小花都变大。II型的畸型花器官数量约占突变体花器官总量的25%;其花器官的内外稃不能紧密嵌合,且内外稃均转变成畸形形状,育性明显下降。III型花器官数量约占突变体花器官总量的20%;其花器官的外稃发生畸形变化并且明显变小,内稃明显伸长。随后对株高,分蘖数,千粒重等农艺性状观察和分析显示:与野生型相比,抽穗期j26株高降低20%;分蘖数是野生型的三倍;千粒重降低33%。这些结果暗示j26突变中的细胞分化和分裂发生了明显变化。通过图位克隆方法,首先我们通过粗定位将突变基因所在的区间缩小在两个分子标记chr01-04和chr01-05之间。然后在分子标记chr01-04和chr01-05之间,继续寻找9522基因组序列和广陆矮4号基因组序列之间的差异,并利用IGV（TheIntegrative Genomics Viewer）软件在这些差异位点的两端设计In Del引物,我们中设计了12对In Del引物（J1-J12）进行精细定位。我们随后以579株j26突变体植株为材料,通过精细定位将J26基因定位在第一条染色体In Del分子标记J5和J6之间,遗传距离0.5 CM,包含64个候选基因。目前已完成对12个可能的候选基因的定量检测,且对包括DFO（DEFORMED FLORAL ORGAN）,cyclin-A1,KH domain containing protein,VHS and GAT domain containing protein在内的这四个基因的完整的基因测序分析,但是并没有发现突变位点。q RT-PCR分析表明,与野生型相比,j26突变体中的与水稻内外稃发育相关基因Os MADS34和rep1基因的表达发生明显下调,这暗示J26基因很可能通过与花器官发育相关基因的相互作用来调控水稻花器官的发育。这些工作为我们对J26调控水稻花器官形态建成的分子机制的深入研究奠定了基础。RETARDED PALEA1（rep1）,Os MADS6和Os MADS32是实验室前期通过正向遗传学方法筛选所获得的三个参与水稻内稃形态建成调控的关键基因。但是这两个基因是否会在分子水平上发生相互作用以及通过何种方式在分子水平上发生相互作用来最终调控内稃细胞的分裂分化等生物学问题尚不得知。本论文在前期研究工作的基础上,通过Luciferase报告基因的实验验证RETARDED PALEA1（rep1）和Os MADS6是否对细胞分裂和分化相关基因如Cyc D3;1和Cyc D6;1等具有调控作用。然后,我们通过构建Ubipro::rep1再次确认rep1对内稃发育所起到的调控作用。此外,我们还通过构建启动子与基因片段互换的方法,即构建Os MADS6pro::rep1gdna-3’utr和rep1pro::Os MADS6g DNA-3’utr来研究Os MADS6和rep1的表达是否存在相互拮抗的调控机制;同时我们也通过构建Os MADS6pro::VENUS::Os MADS6g DNA为丰富Os MADS6的调控网络做充分的准备。同样通过构建Os MADS32pro::VENUS::Os MADS32g DNA为丰富Os MADS32的调控网络做充分的准备。我们还构建了rep1pro::VENUS::g DNA质粒及rep1pro::e GFP::g DNA质粒进行rep1-1突变体转化。综上这些实验将为我们进一步研究rep1,Os MADS6和Os MADS32的下游调控网络奠定基础

关键词：水稻花器官 J26 rep1 调控网络