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基因组学与应用生物学 2015年第9期34卷 2015-2023页

作者：庞新安白宝伟姜喜陈加利焦培培新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地阿拉尔843300 塔里木大学生命科学学院阿拉尔843300 塔里木大学植物科学学院阿拉尔843300

本研究以干旱荒漠盐生植物柽柳的幼嫩叶片为实验材料,探究摸索其总DNA的提取方法与rapd-PCR的反应体系及扩增条件。结果表明,改良CTAB-高盐沉淀法较好地提取出了柽柳植物的总DNA,其产量、质量均有明显提高,比较适合于多数柽柳属植物的DN... 详细信息

本研究以干旱荒漠盐生植物柽柳的幼嫩叶片为实验材料,探究摸索其总DNA的提取方法与rapd-PCR的反应体系及扩增条件。结果表明,改良CTAB-高盐沉淀法较好地提取出了柽柳植物的总DNA,其产量、质量均有明显提高,比较适合于多数柽柳属植物的DNA提取;同时,通过单因素试验比较优化筛选出了适合于柽柳植物rapd分析的最佳的PCR反应体系与扩增条件,其25μL的反应体系中包含有Mg2+=2.5 mmol/L、d NTPs=0.25 mmol/L、引物=0.30μmol/L、Taq DNA聚合酶=1.5 U、模板DNA=200 ng;其最适扩增条件为95℃预变性4 min,94℃变性30 s、36℃退火40 s、72℃延伸1 min、40个循环;最终在72℃下延伸10 min,4℃下保存;另外,通过6条多态性引物的扩增效果证实该优化体系比较稳定,扩增条件比较合适,能够满足多数柽柳植物分子多态性的检测要求。

关键词：塔里木盆地柽柳属 DNA提取 RAPD体系优化

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濒危物种胡杨和灰叶胡杨总DNA提取及RAPD体系优化

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植物研究 2012年第3期32卷 320-325页

作者：焦培培王彦芹庞新安李志军新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室阿拉尔843300 塔里木大学植物科学学院阿拉尔843300

以濒危物种胡杨和灰叶胡杨硅胶干燥的叶片为材料,研究其总DNA提取方法及rapd-PCR体系优化条件。结果表明,用改良CTAB法提取的DNA适用于胡杨和灰叶胡杨的rapd分析。优化的胡杨和灰叶胡杨rapd-PCR体系为:20μL的反应体系中含Mg2+2.5 mmol... 详细信息

以濒危物种胡杨和灰叶胡杨硅胶干燥的叶片为材料,研究其总DNA提取方法及rapd-PCR体系优化条件。结果表明,用改良CTAB法提取的DNA适用于胡杨和灰叶胡杨的rapd分析。优化的胡杨和灰叶胡杨rapd-PCR体系为:20μL的反应体系中含Mg2+2.5 mmol·L-1、dNTP 0.15 mmol·L-1、引物0.2μmol·L-1、模板DNA100 ng和1.5 U Taq DNA聚合酶。用6条多态性引物对优化体系的稳定性进行检测,结果显示扩增结果稳定,多态性丰富。该优化体系为在分子水平开展胡杨和灰叶胡杨的保护生物学研究提供了技术支持和参考。

关键词：胡杨灰叶胡杨 DNA提取 RAPD体系优化

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