检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

rae-1分子在中枢神经系统中表达的研究

RAE-1分子在中枢神经系统中表达的研究

作者：王红格吉林大学

学位级别：硕士

近年来的研究发现MHC-I（主要组织相容性复合体-I）分子及其受体在胚胎及一些成年中枢神经区域高度表达,对神经纤维的生长和再生、以及突触的可塑性起抑制作用。我们实验室在研究视黄酸诱导神经细胞分化的过程中,发现一个受视黄酸诱导... 详细信息

近年来的研究发现MHC-I（主要组织相容性复合体-I）分子及其受体在胚胎及一些成年中枢神经区域高度表达,对神经纤维的生长和再生、以及突触的可塑性起抑制作用。我们实验室在研究视黄酸诱导神经细胞分化的过程中,发现一个受视黄酸诱导的、与MHC-I蛋白有同源性的蛋白家族:rae-1。目前已经发现有5个rae-1家族成员（α,β,δ,γ,ε）,其序列相当于MHC-I分子的2个N端结构域（α-1和α-2结构域）,但缺少α-3和跨膜结构域,因此rae-1蛋白通过一个GPI磷脂尾巴与细胞膜相连,分布于细胞的表面。此后的很多研究发现,在免疫系统中,rae-1通过其受体NKG2D激活NK细胞,而MHC-I则通过其受体Pir B等抑制NK细胞的活性,表明rae-1与MHC-I在功能上相互拮抗。在神经系统中,初步的Northern blot实验结果表明rae-1 mRNA高度表达于小鼠胚胎发育中、后期（E11-E18）的前脑,在出生前表达水平显著降低,在成年脑中仅有微量表达。由于中枢神经系统的绝大多数神经元及其神经突起都在出生前的胚胎发育中、后期产生,而视黄酸在这个过程中起非常重要的作用,以上结果表明rae-1可能参与视黄酸对神经结构和功能发育的调控。rae-1与MHC-I在结构上的类似、在序列上的同源性、以及在免疫系统中功能上的拮抗性,提示rae-1与MHC-I在神经细胞中的功能也可能相互制约,共同维持神经结构和功能的动态平衡。但是,目前还缺乏rae-1在神经系统中的表达、分布和作用的详细信息。为此,我们利用RT-PCR,Western blot和免疫组织化学方法,初步分析了rae-1mRNA和rae-1蛋白在神经细胞中表达的水平和动态变化,以及rae-1蛋白在神经细胞中的定位。首先,利用RT-PCR技术我们分析了rae-1在体外培养的Neuro-2a细胞株、原代培养的胚胎神经干细胞以及不同发育时期的胚胎和成年脑中的表达水平。结果表明,rae-1 mRNA在未分化的Neuro-2a和原代培养的胚胎神经干细胞中未检测到表达;但是在诱导分化后的Neuro-2a和原代培养的神经干细胞、以及E11-E18小鼠胚胎的前脑中检测到高水平rae-1 mRNA的表达;在小鼠胚胎发育的后期（e18天后）表达水平明显降低,在成年脑中仅有微量表达。以上结果发现rae-1只在开始向神经细胞方向分化或正在分化为神经元的细胞中表达,而在已经发育成熟的神经细胞中表达下降,提示rae-1很可能在神经元的分化、成熟或神经纤维生长过程中起重要作用;在发育后期表达水平明显降低,在成年脑中维持微量表达,表明rae-1可能参与维持神经的可塑性调节。然而,无论是在神经系统发育的关键期还是在成年脑中都未检测到nkg2d的表达,说明在中枢神经系统中rae-1的受体可能不是nkg2d。其次,我们利用westernblot,细胞免疫荧光染色和免疫组织化学染色检测了rae-1蛋白的水平、动态分布和细胞内定位。与rt-pcr结果一致,westernblot结果表明rae-1蛋白在未分化的neuro-2a中没有检测到,但在诱导分化后的neuro-2a以及e11-e18的胚胎前脑组织中高度表达,在成年脑中有微量表达。氨基酸序列分析表明rae-1是高度糖基化的细胞表面蛋白。在westernblot上,我们检测到的rae-1蛋白呈现多个大于rae-1理论大小的条带,用特异性n-糖基化抑制剂tunicamycin处理分化的neuro-2a细胞后,westernblot上检测到的蛋白条带分子量明显减小,支持rae-1蛋白糖基化的理论预测。免疫细胞荧光染色结果表明,rae-1蛋白在未分化的neuro-2a细胞中为阴性,在分化的neuro-2a神经元样细胞胞体和长出的纤维上都呈阳性,尤其以纤维的最末端（生长锥）检测到的荧光信号最强。用磷脂酰肌醇特异性磷脂酶c（pi-plc）处理后,分化的neuro-2a神经元样细胞上的荧光信号明显减弱,与rae-1是一类由gpi连接到细胞膜的表面分子的预测相符合,同时也间接支持检测到的rae-1信号的可靠性。最后,免疫组织化学染色结果表明在体内,rae-1蛋白分布于发育过程中的胚胎前脑的室管膜区（vz）、室管膜下区（svz）和海马区,以及在成年脑的室管膜下区和浦肯野细胞层。通过以上实验,我们检测到rae-1mrna与rae-1蛋白的动态变化是一致的,提示rae-1mrna及时地翻译成了rae-1蛋白。rae-1分子在细胞向神经方向分化的过程中高度表达,并高度浓缩于生长中的神经纤维的最前端;在神经细胞成熟后,rae-1表达下调至检测不出的水平,提示rae-1蛋白可能在促进神经细胞分化成熟、或神经纤维的定向生长、或细胞-细胞间相互作用如神经突触形成过程中起重要作用。此外,在成年脑中的微量表

关键词： rae-1 神经发育 MHC-I 视黄酸神经干细胞免疫组织化学

NKG2D及其配体rae-1、H60在移植物抗肿瘤中的作用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2007年第1期15卷 160-164页

作者：李晓峰陈强叶韵斌范南峰陈明水李洁羽陈慧菁陈淑萍周智锋福建省泉州市中医院肿瘤科泉州362000 福建省肿瘤医院内科福州350014

为探讨NKG2D及其配体rae-1、H60在单倍体相合(haploidentical)造血干细胞移植介导的移植物抗肿瘤效应中的作用,以皮下接种H22细胞的BABL/c×C57BL/6杂交F1代(CB6F1)小鼠为受鼠,以C57BL/6小鼠的骨髓+脾细胞为供者细胞,分别用抗CD90.2、NK... 详细信息

为探讨NKG2D及其配体rae-1、H60在单倍体相合(haploidentical)造血干细胞移植介导的移植物抗肿瘤效应中的作用,以皮下接种H22细胞的BABL/c×C57BL/6杂交F1代(CB6F1)小鼠为受鼠,以C57BL/6小鼠的骨髓+脾细胞为供者细胞,分别用抗CD90.2、NK1.1和NKG2D单克隆抗体清除供者T细胞、NK细胞和封闭NKG2D受体,进行单倍体相合细胞移植,观察移植后的抗肿瘤效应,并以半定量RT-PCR法检测移植后小鼠肿瘤组织rae-1、H60的mRNA表达水平。结果发现:清除供者T细胞、NK细胞和封闭NKG2D的移植均导致移植物抗肿瘤效应的下降,MHC单倍体相合细胞移植后肿瘤细胞rae-1、H60的mRNA表达水平上升。结论:NKG2D及其配体rae-1、H60在移植物抗肿瘤效应中的起着重要的作用。

关键词： NKG2D rae-1 H60 移植物抗肿瘤效应

NKG2D/rae-1通路在介导NK/T细胞杀伤垂体瘤细胞中的作用及意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东医药 2016年第44期56卷 4-7,I0001页

作者：孙其凯马立新李珍珠陈正李泽福滨州医学院附属医院山东滨州256600

目的观察NKG2D/rae-1通路在介导自然杀伤(NK)细胞、CD8^+T细胞(两种细胞简称NK/T细胞)杀伤垂体瘤细胞中的作用,从细胞学水平探讨垂体瘤的免疫逃逸机制。方法以小鼠垂体瘤细胞系At T20为研究对象,采用免疫荧光标记法检测NKG2D配体rae-1... 详细信息

目的观察NKG2D/rae-1通路在介导自然杀伤(NK)细胞、CD8^+T细胞(两种细胞简称NK/T细胞)杀伤垂体瘤细胞中的作用,从细胞学水平探讨垂体瘤的免疫逃逸机制。方法以小鼠垂体瘤细胞系At T20为研究对象,采用免疫荧光标记法检测NKG2D配体rae-1在垂体瘤细胞的表达水平及定位分布情况。采用NK/T细胞分选试剂盒分离NK/T细胞,将NK/T细胞放入Transwell小室的上室,靶细胞At T20置入Transwell小室的下室,随机分为对照组、实验组。对照组在常规条件下共培养0、4、8、24 h,实验组在培养液中加入阻断rae-1的抗体(Antirae1抗体)共培养0、4、8、24 h;采用MTT法检测两组各时间点细胞增殖抑制率。结果 rae-1在At T20细胞膜明显表达,在细胞质内亦有弱表达。在At T20细胞中rae-1蛋白阳性表达率为100%,其中强表达率为30%、中表达率为60%、弱表达率为10%,无阴性表达。对照组培养4、8、24 h时细胞增殖抑制率明显高于0 h时(P均rae-1通路杀灭垂体瘤细胞,rae-1可负反馈作用于NK/T细胞,从而抑制免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。NKG2D/rae-1通路可能作为垂体瘤的免疫治疗靶点。

关键词：垂体瘤 NKG2D rae-1 自然杀伤细胞 CD8^+T细胞

NKG2D及其配体rae-1、H60在移植物抗肿瘤中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

NKG2D及其配体RAE-1、H60在移植物抗肿瘤中的作用

NKG2D配体rae-1在失血性休克和输血后表达的变化

第九届全国肿瘤生物治疗学术会议

作者：李晓峰陈强叶韵斌范南峰陈明水李洁羽陈慧菁陈淑萍周智锋福建省肿瘤医院福建省肿瘤医院福建省肿瘤医院福建省肿瘤医院福建省肿瘤医院福建省肿瘤医院福建省肿瘤医院福建省肿瘤医院福建省肿瘤医院

为探讨NKG2D及其配体rae-1、H60在单倍体相合（hapliodentical）细胞移植介导的移植物抗肿瘤效应中的作用,以皮下接种H22细胞的BABL/C×C57BL/6杂交F1代（CB6F1,H-2Kd/b）小鼠为受者,以C57BL/6（H-2Kb）小鼠的骨髓+脾细胞为供者细胞,供... 详细信息

为探讨NKG2D及其配体rae-1、H60在单倍体相合（hapliodentical）细胞移植介导的移植物抗肿瘤效应中的作用,以皮下接种H22细胞的BABL/C×C57BL/6杂交F1代（CB6F1,H-2Kd/b）小鼠为受者,以C57BL/6（H-2Kb）小鼠的骨髓+脾细胞为供者细胞,供者细胞分别用纯化的抗CD90.2、NK1.1和NKG2D单克隆抗体去除T细胞、NK细胞和封闭NKG2D受体后经7.5Gy60Co照射,进行不同成份单倍体相合细胞移植,观察移植后的抗肿瘤效应。以半定量RT-PCR法检测单倍体相合细胞移植后第3、7、14、18天小鼠肿瘤组织rae-1、H60的mRNA表达水平。结果发现:去除供者T细胞、NK细胞和封闭NKG2D的移植均导致GVT效应的下降,移植18天后,小鼠平均瘤重分别为1.08±0.82g、0.72±0.64g、1.39±0.65,与对照组（单纯预处理没有细胞移植组,1.30±0.54）比,差异均无统计学意义（P＞0.05）;去除供者T细胞和NK细胞移植的抑瘤率分别为16.9%、44.6%,封闭NKG2D受体的移植则失去抑瘤作用,提示供者T细胞、NK细胞和NKG2D受体在杀伤肿瘤的效应中起重要作用,其中T细胞是最主要的效应细胞,NKG2D受体可能是活化T细胞、NK细胞等效应细胞的重要因素。单倍体相合细胞移植后第3、7、14、18天小鼠肿瘤组织rae-1的mRNA相对表达水平（%）为24.30±4.32、32.78±3.98、60.40±6.25、80.45±7.78,呈现进行性增高的趋势;H60mRNA的相对表达水平（%）分别为7.03±9.55、26.34±5.76、32.71±7.9627.53±9.70。结论:NKG2D及其配体rae-1、H60在移植物抗肿瘤效应中的起着重要的作用。

关键词： NKG2D rae-1 H60 移植物抗肿瘤

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

中国输血杂志 2010年第S1期23卷 106-106页

作者：魏广智尤国兴罗丹汤永永赵敬湘王字玲军事医学科学院野战输血研究所 100850

NKG2D配体在小鼠异位气管移植模型中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2017年第9期34卷 1483-1485页

作者：唐强张宏伟薛飞刘传江付强贾鹏冲秦涛河南省人民医院肝胆胰腺外科郑州450003

目的观察小鼠异位气管移植后不同时间点NKG2D配体rae-1和H60表达水平的变化，探讨其在肺移植后闭塞性细支气管炎（BOS）中的重要作用。方法建立小鼠异位气管移植模型并于术后7、14、28 d取材。苏木素-伊红（HE）和Mallory染色形态学... 详细信息

目的观察小鼠异位气管移植后不同时间点NKG2D配体rae-1和H60表达水平的变化，探讨其在肺移植后闭塞性细支气管炎（BOS）中的重要作用。方法建立小鼠异位气管移植模型并于术后7、14、28 d取材。苏木素-伊红（HE）和Mallory染色形态学观察，并检测术后气管闭塞率，实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测不同时间点移植物rae-1和H60的mRNA表达；免疫组织化学检测不同时间点移植物的rae-1和H60蛋白表达。结果移植后随时间延长，HE染色提示BOS病理学不断进展，与对照组比较，气管移植物14 d和28 d管腔闭塞率不断增加[（30.82±7.61）%和（83.52±13.12）%比（3.75±1.78）%，P＝0.012、0.007]，Mallory染色和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达不断增强。RT-qPCR检测结果显示与对照组比较，移植后小鼠气管移植物14 d的H60（12.712 2±2.828 0比0.739 6±0.042 8，P＝0.014）和28 d的rae-1 mRNA（10.464 9±2.109 1比0.617 6±0.041 3，P＝0.022）表达强度均明显提高。免疫组织化学检测结果显示气管移植物H60和rae-1在蛋白水平表达分别在14 d（207.97±25.87比31.63±9.42，P＝0.023）和28 d（185.34±24.06比32.84±7.85，P＝0.026）明显高于对照组。结论 NKG2D配体可能参与了肺移植后BOS的发生发展，加强主要组织相容性Ⅰ类相关基因（MIC）配型或特意性阻断NKG2D通路有可能延缓并减少肺移植后BOS的产生。

关键词：肺移植闭塞性细支气管炎 NKG2D rae-1 H60

MHC-I类似分子在中枢神经系统中表达的初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

MHC-I类似分子在中枢神经系统中表达的初步研究

作者：于畅吉林大学

学位级别：硕士

主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)在免疫系统中的作用已经得到了广泛的研究。其中的MHC-I分子表达于全身所有有核细胞的表面，在免疫细胞的发育、抗原识别和T细胞免疫应答等方面起着重要的作用。此外，MHC-... 详细信息

主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)在免疫系统中的作用已经得到了广泛的研究。其中的MHC-I分子表达于全身所有有核细胞的表面，在免疫细胞的发育、抗原识别和T细胞免疫应答等方面起着重要的作用。此外，MHC-I还与NK细胞（natrural killer cell）的抑制性受体结合，抑制NK细胞对表达自身MHC-I分子的细胞的杀伤作用。另一方面，对于NK细胞而言，除了抑制性受体外，它们还表达一些激活性受体，其中的NKG2D可以被一些MHC-I类似分子激活，从而拮抗MHC-I对NK细胞的抑制作用。目前已发现的NKG2D的配体(NKG2D ligand, NKG2DL)都是MHC-I的类似分子，鼠类包括三个家族：rae-1（α, β, γ, δ和ε），Mult1和H60(a, b&c);人类包括两个家族：MIC (A、B)和ULBP (1-6)。借由NKG2D受体，这些MHC-I类似分子在NK细胞中起着与MHC-I相反的作用，即对NK细胞的激活作用。这些MHC-I类似分子通常只在有问题的细胞，如转化、病毒感染和有DNA损伤的细胞中表达。通过表达MHC-I类似分子(NKG2DL)，进而NKG2D受体激活NK细胞，使这些有问题的细胞得以清除。因此，MHC-I类似分子和NK细胞的NKG2D一起，形成一道防止有问题细胞在体内存活的天然屏障。 MHC-I及其类似分子是否只在免疫系统中发挥作用呢？对MHC-I的研究表明，它在神经系统中同样起着关键作用。MHC-I广泛表达在胚胎、新生及成年小鼠及人脑中，其在神经元中的表达具有时空特异性和可调节性。进一步的研究发现，MHC-I对神经功能的可塑性也起着重要作用。多种MHC-I的受体如Ly49等也在神经元中表达。那是否MHC-I类似分子的作用就只局限于免疫系统呢？实际上rae-1在体内的表达最初是在胚胎鼠的前脑中发现的，它的表达伴随着胚胎神经发育的关键时期（E13-E18），且rae-1家族成员的表达有时空和量的差别。这之后意外发现其作为NKG2D的配体在免疫系统中的作用，而使rae-1在神经系统和神经发育过程中可能作用的研究被忽略了，只有极少对于rae-1的研究涉及神经领域。鉴于已发现MHC-I分子在神经中的表达及重要作用，以及多种神经与免疫系统间的相似性，我们有理由相信MHC-I类似分子同样在神经系统中发挥作用。为了研究rae-1等MHC-I类似分子在小鼠中枢神经系统中的可能作用，本课题的主要目标是系统研究这些分子及其受体在胚胎发育及成年中枢神经系统的表达及其蛋白的定位，包括利用RT-PCR和原位分子杂交分析这些基因的表达，免疫组织化学分析这些蛋白在中枢神经的分布，以及免疫荧光标记确定rae-1蛋白在神经细胞亚细胞结构上的定位。首先通过对rae-1五种亚型的比对和引物设计方法，设计出能扩增全部rae-1成员和Mult1、H60的三个成员、以及NKG2D的引物，利用RT-PCR分析这些基因的表达。结果发现除H60外，这些基因全部在胚胎及成年中枢神经系统有较高表达;此外，定量RT-PCR实验的结果表明，胚胎10-18天小鼠的胚胎脑中这些基因的表达最高，出生前表达显著降低，但在成年脑中仍维持低水平表达。以上结果表明，与MHC-I分子一样，MHC-I类似分子也都在发育中及成年后的中枢神经系统表达;此外，以上结果首次发现NK细胞的NKG2D受体在神经系统有高度表达。为了对这些分子在中枢神经的表达进行定位，本研究还构建了原位分子杂交用的探针，并进行了初步的原位分子杂交实验，以及初步的Western blot和免疫组织化学染色实验。另外，为了确定rae-1蛋白在神经细胞的亚细胞结构上的分布，本研究在胚胎中提取了rae-1RNA，逆转录后构建全长的真核表达质粒，以及带FLAG标签的rae-1表达质粒，并在Neuro2a细胞中进行了表达。以上实验为进一步研究MHC-I类似分子及其受体在中枢神经发育及正常功能中的作用打下了基础。

关键词：主要组织相容性复合体 NKG2D配体 rae-1 Mult1 H60 基因表达

扶正化瘀方调控视黄酸信号通路增强NK细胞杀伤能力的抗纤维化机制

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

扶正化瘀方调控视黄酸信号通路增强NK细胞杀伤能力的抗纤维化机制

作者：平大冰上海中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过CCL模型动物实验验证,观察扶正化瘀方对小鼠肝脏星状细胞和淋巴细胞的免疫调控作用,进一步通过DMN模型动物实验,探讨扶正化瘀方发挥抗肝纤维化作用时,对肝脏NK细胞的功能的影响;体外实验进一步验证扶正化瘀方通过调节肝星状细... 详细信息

目的:通过CCL模型动物实验验证,观察扶正化瘀方对小鼠肝脏星状细胞和淋巴细胞的免疫调控作用,进一步通过DMN模型动物实验,探讨扶正化瘀方发挥抗肝纤维化作用时,对肝脏NK细胞的功能的影响;体外实验进一步验证扶正化瘀方通过调节肝星状细胞rae-1表达,增强NK细胞杀伤能力的免疫调控机制。本论文分为三部分。方法:1、采用CCL诱导肝纤维化小鼠模型,观察小鼠脏器大体观,计算脏器指数,检测小鼠血清生化指标ALT、AST、TBil、Alb,HE和天狼猩红观察小鼠肝脏炎症及纤维化病理改变,检测肝组织羟脯氨酸含量,免疫荧光和荧光定量PCR观察肝内视黄酸信号通路变化,通过流式细胞术对肝脏淋巴细胞亚群变化及NK细胞功能变化多参数定量分析。2、采用DMN诱导肝纤维化模型,观察小鼠脏器大体观,计算脏器指数,检测小鼠血清生化指标ALT、AST变化,HE和天狼猩红染色观察肝脏炎症及纤维化病理改变,免疫荧光和荧光定量PCR观察肝内视黄酸信号通路变化,流式细胞术观察肝脏淋巴细胞亚群变化及分析NK细胞功能变化。3、体外实验以小鼠肝星状细胞（HSC）为研究对象,使用CCK8试剂盒检测扶正化瘀方的最大无毒浓度,在安全范围内选取3个有效浓度对HSC进行药效评价,免疫荧光观察JS-1细胞rae-1和α-SMA表达,荧光定量PCR观察HSC视黄酸信号通路变化,体外分离小鼠原代肝NK细胞与HSC共培养,建立共培养体系,免疫荧光观察共培养体系HSC活化状态,流式细胞术观察共培养体系NK细胞激活型受体NKG2D表达变化,Annexin V-PI试剂盒检测HSC的凋亡变化,Cell Titer-Glo试剂盒评价NK细胞杀伤功能,si RNA转染JS-1细胞建立rae-1α低表达细胞系si-JS1,观察细胞生物功能以及NK细胞杀伤功能变化情况。结果:1、扶正化瘀方对CCL诱导肝纤维化小鼠肝脏免疫调控作用观察研究发现:与N组小鼠相比,M组小鼠肝脏表面粗糙,质地变硬,小鼠肝体比和脾体比均升高,与M组小鼠相比,F组和R组小鼠肝脏大体观有所改善,F组小鼠肝体比升高,R组小鼠肝体比下降,F组和R组脾体比均明显下降;与N组小鼠相比,M组小鼠血清ALT、AST、TBil升高,Alb下降,HE染色发现肝组织出现了明显的炎症和纤维胶原沉积,假小叶形成,羟脯氨酸含量增加,与M组小鼠相比,F组和R组均可以不同程度的改善小鼠血清肝功能,改善肝组织炎症,减少肝组织胶原沉积,降低肝组织羟脯氨酸含量;与N组相比,M组小鼠肝内α-SMA表达增加,rae-1表达降低,视黄酸信号通路酶系及核受体表达降低,与M组小鼠相比,F组和R组均可以不同程度的降低肝内α-SMA表达,促进rae-1阳性表达,不同程度的上调视黄酸信号通路酶系及核受体转录学水平表达;与N组相比,M组小鼠肝脏淋巴细胞亚群内NK、NKT和B细胞比例明显下降,T细胞增加,CD4T细胞减少,CD8T细胞增加,NK细胞表面激活型受体NKG2D平均荧光强度降低,与M组小鼠相比,F组和R组均可以不同程度的促进肝脏淋巴细胞亚群内NK细胞比例,增强NKG2D平均荧光强度,调节淋巴细胞亚群变化。2、DMN诱导肝纤维化小鼠模型验证,通过对肝脏和脾脏淋巴细胞亚群及NK细胞来源及功能变化观察研究发现:与N组小鼠相比,M组小鼠肝脏表面可见明显颗粒凸起,小鼠肝体比下降,脾体比升高,与M组小鼠相比,F组和R组小鼠肝脏外观明显改善,肝体比均明显升高,脾体比下降;与N组小鼠相比,M组小鼠血清ALT、AST升高,肝组织出现炎症及纤维胶原沉积,与M组小鼠相比,F组和R组均可以降低小鼠ALT、AST水平,改善肝组织炎症和胶原沉积;与N组小鼠相比,M组小鼠肝内rae-1分子表达下降,视黄酸信号通路酶系及核受体表达降低,与M组小鼠相比,F组和R组均可以上调rae-1分子阳性表达,上调视黄酸信号通路酶系及核受体转录学水平表达;与N组相比,M组小鼠肝脏淋巴细胞亚群内NK、NKT比例明显下降,B细胞比例上升,NK细胞表面激活型受体NKG2D平均荧光强度降低,CD69NK细胞比例增加,PD-1NK细胞比例减少,与M组小鼠相比,F组和R组均可以促进肝脏淋巴细胞亚群内NK细胞比例,调节淋巴细胞亚群变化。3、扶正化瘀方体外调节肝星状细胞恢复NK细胞杀伤能力机制研究发现:小鼠原代肝星状细胞随着体外培养时间延长,胞内脂滴逐渐减少,α-SMA表达增加,在药物最大无毒浓度范围内扶正化瘀方及全反式维甲酸均可以不同程度促进肝星状细胞rae-1分子表达,促进视黄酸信号通路酶ADH1/3、核受体RARα、RXRα/γ和rae-1α/γ/δ转录学水平表达,促进活化JS-1细胞凋亡;体外分离小鼠原代肝NK细胞,建立HSC-NK共培养体系,结果发现活化JS-1细胞组rae-1分子表达同时该组NK细胞NKG2D表达也下降,JS-1细

关键词：肝纤维化扶正化瘀方视黄酸信号 rae-1 自然杀伤细胞