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rab27a在4种不同人乳癌细胞株中的表达

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齐鲁医学杂志 2008年第6期23卷 492-493,495页

作者：徐鹏刘松岭孙国锋曹明智马学真王劲松李文凤青岛大学医学院附属医院乳腺病治疗中心山东青岛266021 青岛市肿瘤医院外一科青岛市肿瘤医院肿瘤内科复旦大学肿瘤医院乳腺外科

目的检测rab27a在4种人乳癌细胞中的定位、表达情况,初步研究rab27a表达对乳癌细胞生物学特性的影响。方法采用RT-PCR技术,检测rab27a mRNA在4种人乳癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435和MDA-MB-435HM中的表达并进行半定量分析。结果R... 详细信息

目的检测rab27a在4种人乳癌细胞中的定位、表达情况,初步研究rab27a表达对乳癌细胞生物学特性的影响。方法采用RT-PCR技术,检测rab27a mRNA在4种人乳癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435和MDA-MB-435HM中的表达并进行半定量分析。结果rab27a mRNA在人乳癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435及MDA-MB-435HM中的表达水平分别是MCF-7中的2.1、3.4和6.9倍,差异有显著意义（F=17.74～136.23,P〈0.05、0.01）;rab27a蛋白在人乳癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435及MDA-MB-435HM中的表达分别是MCF-7中的2.8、4.9和9.2倍,差异有显著性（F=37.74～154.29,P〈0.05、0.01）。rab27a蛋白弥散性分布于MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞浆中,MDA-MB-231和MDA-MB-435中又可见rab27a蛋白在核周凝聚。结论rab27a表达可能与乳癌细胞侵袭转移能力有关。

关键词：乳腺肿瘤 rab27a 肿瘤转移

异欧前胡素对人表皮黑素细胞酪氨酸酶和rab27a的调节作用

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癌变．畸变．突变 2018年第1期30卷 37-41页

作者：孙贝蕾郑宇琼林玲陈玮莹蔡尔慧陈玮芳汕头大学医学院基础医学实验教学中心广东汕头515041 汕头大学医学院第一附属医院广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院广东汕头515041

目的:探讨异欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞酪氨酸酶和rab27a的凋节作用。方法:体外分离人表皮黑素细胞并纯化培养,随机分为对照组和实验组。对照组加入M-254培养基,实验组加入含25μmol/L异欧前胡素的M-254培养基,培养48h后倒置... 详细信息

目的:探讨异欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞酪氨酸酶和rab27a的凋节作用。方法:体外分离人表皮黑素细胞并纯化培养,随机分为对照组和实验组。对照组加入M-254培养基,实验组加入含25μmol/L异欧前胡素的M-254培养基,培养48h后倒置显微镜下观察黑素细胞的形态;MTT法检测黑素细胞活力;Western blot法检测黑素细胞酪氨酸酶和转运相关蛋白rab27a的表达;L-多巴氧化法和NaOH法测定黑素细胞酪氨酸酶活性和黑素含量。结果:与对照组比较,实验组人表皮黑素细胞的树状突起变长,黑素细胞活力降低17.2%(Prab27a表达升高31.9%(Prab27a的表达,降低黑素细胞中黑素的含量。

关键词：黑素细胞异欧前胡素酪氨酸酶 rab27a 黑素

过表达rab27a基因对胃癌细胞BGC823生物学行为的影响

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生物技术通讯 2017年第2期28卷 77-83页

作者：王倩杨静文王飞飞王如良李光辉肖文华解放军总医院第一附属医院肿瘤内科北京100037

目的:研究rab27a与胃癌细胞恶性生物学行为的关系。方法:以rab27a低表达的胃癌细胞BGC823为出发细胞株,构建rab27a过表达稳定细胞株,通过MTT实验、软琼脂集落形成实验、Transwell迁移和侵袭实验,观察过表达rab27a后BGC823细胞增殖、迁... 详细信息

目的:研究rab27a与胃癌细胞恶性生物学行为的关系。方法:以rab27a低表达的胃癌细胞BGC823为出发细胞株,构建rab27a过表达稳定细胞株,通过MTT实验、软琼脂集落形成实验、Transwell迁移和侵袭实验,观察过表达rab27a后BGC823细胞增殖、迁移及侵袭等恶性生物学行为的改变。结果:过表达rab27a后,BGC823细胞的迁移(P0.05)。结论:rab27a在胃癌细胞发生发展过程中可能作为抑癌基因发挥作用,这一结果为胃癌的临床治疗提供了新的理论依据和潜在的治疗靶点。

关键词： rab27a 胃癌增殖迁移侵袭

欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞rab27a和酪氨酸酶的作用

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癌变．畸变．突变 2014年第4期26卷 279-284页

作者：谢佳均林玲刘少刚吴晓佳阮海东郭佩湘童鹏飞方斌陈玮莹佘绍逸汕头大学医学院汕头大学医学院基础医学实验教学中心广东汕头515041 汕头大学医学院第一附属医院广东汕头515041

目的:观察欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞转运相关蛋白rab27a和酪氨酸酶的作用。方法:体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞。随机分为空白对照组和欧前胡素处理组,以50或25μmol/L欧前胡素作用48 h后观察黑素细胞形态,免疫荧光法检测... 详细信息

目的:观察欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞转运相关蛋白rab27a和酪氨酸酶的作用。方法:体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞。随机分为空白对照组和欧前胡素处理组,以50或25μmol/L欧前胡素作用48 h后观察黑素细胞形态,免疫荧光法检测rab27a和酪氨酸酶在黑素细胞中的定位及变化,应用透射电镜观察黑素细胞黑素小体的超微结构。结果:欧前胡素作用48 h后,黑素细胞的树状突起缩短,免疫荧光检测显示,黑素细胞rab27a和酪氨酸酶蛋白在细胞内定位未见明显变化,但欧前胡素作用后rab27a蛋白的荧光强度轻度增强(Prab27a表达呈促进作用,对酪氨酸酶活性及黑素合成呈抑制作用。

关键词：黑素细胞欧前胡素酪氨酸酶 rab27a 黑素小体转移

非小细胞肺癌组织中miR-582-5p、rab27a的表达变化及与临床病理参数的关系

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中国医药导报 2020年第35期17卷 108-111页

作者：郭毅郭伟王艳红山西医科大学基础医学院山西太原030003 山西省肿瘤医院呼吸二科山西太原030003 山西医科大学微生物学与免疫学教研室山西太原030000

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中miR-582-5p及RAS癌基因家族rab27a的表达及与临床病理参数的关系。方法应用荧光实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测120例NSCLC癌组织和瘤旁组织中miR-582-5p、rab27a的表达,蛋白质免疫印迹法检测... 详细信息

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中miR-582-5p及RAS癌基因家族rab27a的表达及与临床病理参数的关系。方法应用荧光实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测120例NSCLC癌组织和瘤旁组织中miR-582-5p、rab27a的表达,蛋白质免疫印迹法检测组织中rab27a蛋白表达,统计学分析组间miR-582-5p与rab27a的表达差异及与临床病理特征之间的关系。结果与癌旁组织比较,NSCLC癌组织中miR-582-5p表达明显较低,而rab27a表达明显较高(均Prab27a表达较高(均Prab27a表达呈负相关(r=-0.633,P=0.000)。结论NSCLC癌组织中miR-582-5p表达降低,而rab27a表达升高,两者有可能成为NSCLC诊断、治疗方面新的分子标志物。

关键词：非小细胞肺癌 miR-582-5p rab27a TNM分期

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结直肠癌组织rab27a的表达及意义

中国临床医学 2021年第5期28卷 885-889页

作者：俞士勇彭欢王化恺骆洋项洪刚上海市浦东新区人民医院普通外科上海201299 上海交通大学医学院附属仁济医院胃肠外科上海200127

目的:在基因和蛋白水平检测结直肠癌组织及相应的癌旁组织中rab27a表达情况,并探讨其与结直肠癌患者临床特点的相关性及临床意义。方法:回顾性分析2005年1月至2019年1月在上海市浦东新区人民医院普通外科和上海交通大学医学院附属仁济... 详细信息

目的:在基因和蛋白水平检测结直肠癌组织及相应的癌旁组织中rab27a表达情况,并探讨其与结直肠癌患者临床特点的相关性及临床意义。方法:回顾性分析2005年1月至2019年1月在上海市浦东新区人民医院普通外科和上海交通大学医学院附属仁济医院胃肠外科接受手术治疗的125例结直肠癌患者的结直肠癌病理标本及其临床病理资料。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹法分别检测其中32对和8对结直肠癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁组织(距癌组织边缘>5 cm)中rab27a mRNA和蛋白表达情况。免疫组织化学检测125例结直肠癌组织中rab27a表达情况,计算rab27a染色强度,并分析其与临床特点之间的关系。结果:在32对结直肠癌肿瘤组织和癌旁组织中,肿瘤组织中rab27a mRNA表达水平明显高于癌旁正常临床组织(P=0.001)。在8对结直肠癌肿瘤组织和癌旁组织中,肿瘤组织中蛋白表达水平明显高于癌旁正常组织。肿瘤大小和临床分期在rab27a蛋白高表达组和低表达组差异有统计学意义(P=0.037、0.017)。生存分析结果显示,rab27a表达水平越高,结直肠癌患者预后越差。同时,多因素分析表明,rab27a在结直肠癌患者中可作为独立的预后分子标志物。结论:rab27a在结直肠癌的发生发展中起重要作用,可作为反映结直肠癌生物学行为的潜在有效指标。

关键词：结直肠癌 rab27a 预后

Interplay between rab27a effectors in pancreatic β-cells

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World Journal of Diabetes 2015年第3期6卷 508-516页

作者： Mami Yamaoka Toshimasa Ishizaki Toshihide Kimura Department of Pharmacology Oita University Faculty of Medicine

The small GTPase rab27 a is a member of the rab family that is involved in membrane trafficking in various kinds of ***27 a has GTP-and GDP-bound forms,and their interconversion regulates intracellular signaling ***,only a GTP-bound GTPase binds its specific effectors with the resulting downstream signals controlling specific cellular *** previously identified novel rab27a-interacting ***,some of these proteins interacted with GDP-bound rab27 *** present study reviews recent progress in our understanding of the roles of rab27 a and its effectors in the secretory *** pancreatic β-cells,GTP-bound rab27 a regulates insulin secretion at the preexocytotic stages via its GTP-specific effectors such as Exophilin8/Slac2-c/My RIP and Slp4/*** stimulation causes insulin *** stimulation also converts rab27 a from its GTP-to its GDP-bound ***-bound rab27 a interacts with GDP-specific effectors and controls endocytosis of the secretory ***,rab27 a cycling between GTP-and GDP-bound forms synchronizes with the recycling of secretory membrane to re-use the membrane and keep the β-cell volume constant.

关键词： Insulin Exocytosis Endocytosis rab27a IQGAP1 Coronin 3 Glucose Small GTPase

rab27amRNA与人乳腺癌细胞侵袭转移能力相关性的体内外研究

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Rab27AmRNA与人乳腺癌细胞侵袭转移能力相关性的体内外研究

作者：徐鹏青岛大学

学位级别：硕士

目的检测人乳腺癌细胞中rab27a的定位、表达情况,在体内外研究rab27a与乳腺癌细胞侵袭转移能力相关性。方法1、采用SYBR GREEN法实时半定量RT-PCR技术,检测rab27a在四种人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435和MDA-MB-435HM中的mR... 详细信息

目的检测人乳腺癌细胞中rab27a的定位、表达情况,在体内外研究rab27a与乳腺癌细胞侵袭转移能力相关性。方法1、采用SYBR GREEN法实时半定量RT-PCR技术,检测rab27a在四种人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435和MDA-MB-435HM中的mRNA,应用Western-blot检测rab27amRNA在四种人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435和MDA-MB-435HM中的蛋白表达。2、应用免疫荧光(immunofluorescence)及激光共聚焦(confocal)扫描成像技术显示rab27a蛋白在乳腺癌细胞中的定位。3、裸鼠乳房脂肪垫(mammary fat pad,MFP)接种人乳腺癌细胞,探讨rab27a过表达对裸鼠原位肿瘤生长及肺转移的影响。结果1、rab27a mRNA及蛋白在人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435及MDA-MB-435HM中的表达水平随细胞侵袭转移能力的增强而升高。2、在人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-435中,rab27a弥散性分布于细胞浆中,而在后两者中又可见rab27a蛋白在核周凝聚。3、rab27a高表达细胞克隆组裸鼠肺转移率增高,MDA-MB-231组由10%增加到50%(P(0.01),MDA-MB-435组由60%增加到90%(P＜0.05),平均每个肺内的转移灶数目亦明显增多,在MDA-MB-231组和MDA-MB-435组分别达到对照组的5倍和2.5倍(P＜0.01),肺转移灶体积增大,且可见多个转移灶融合现象。结论rab27a的表达水平随乳腺癌细胞侵袭转移能力的增强而升高,在体内影响裸鼠原位移植瘤生长和肺转移灶的形成,说明rab27a表达可能与乳腺癌细胞侵袭转移能力有关。

关键词：乳腺癌 rab27a 侵袭转移

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无脉络膜症家系致病变异的鉴定及机制研究

无脉络膜症家系致病变异的鉴定及机制研究

作者：冯贝中南大学

学位级别：硕士

研究背景:无脉络膜症(Choroideremia,CHM)又称全脉络膜血管萎缩、进行性脉络膜萎缩、进行性毯层脉络膜萎缩。CHM是一种罕见的伴X连锁的隐性遗传疾病。人群中发病率约为1/100000-1/50000,男性患者在青少年时期就表现出严重的视力损害,会... 详细信息

研究背景:无脉络膜症(Choroideremia,CHM)又称全脉络膜血管萎缩、进行性脉络膜萎缩、进行性毯层脉络膜萎缩。CHM是一种罕见的伴X连锁的隐性遗传疾病。人群中发病率约为1/100000-1/50000,男性患者在青少年时期就表现出严重的视力损害,会出现夜盲现象,随着年龄的增加周边视野逐渐丢失,视网膜色素上皮、光感受器和脉络膜进行性萎缩,晚期可能会失明。女性携带者一般不会表现出严重的视力损害,晚期可能视网膜、脉络膜出现斑片状萎缩。无脉络膜症发病的主要原因是CHM基因突变导致编码的rab escort protein-1(REP-1)蛋白功能缺失。REP-1参与rab GTPase翻译后修饰(脂质修饰:异戊二烯化),rab small GTPases(rabs)是细胞内囊泡运输的关键调节因子,若缺失这种修饰,rabs将无法参与细胞内的囊泡转运,会导致未异戊烯化的rab蛋白聚集。已有研究表明,在无脉络膜症患者的淋巴细胞中发现rab27a被低异戊烯化。多项研究表明RPE在CHM发病机制中起着重要的作用,RPE细胞分泌的趋化因子IL-8、MCP-1增加,可能是CHM患者眼部脉络膜内出现炎症细胞的原因,同时可能是少数CHM患者视网膜和脉络膜新生血管发生的基础。研究目的:鉴定无脉络膜症家系的致病变异,并探究其致病机制。研究方法:本研究通过全外显子组测序、基因芯片及断裂点PCR,发现了无脉络膜患者CHM基因上的突变c.314+216＿1167-14984delins TACCAAAGTC,该突变导致CHM缺失852个核苷酸。随后构建了CHM基因野生型和突变体质粒,并在HEK293细胞中进行过表达。免疫荧光检测REP-1蛋白的亚细胞定位以及与rab27a的共定位情况;免疫印迹检测了野生型和突变体蛋白表达量、半衰期及降解途径;在ARPE19细胞中干扰CHM基因的表达,ELISA检测ARPE19细胞分泌的趋化因子IL-8和MCP-1的量。研究结果:免疫荧光发现野生型和突变体在细胞膜上和细胞质中均有定位,在Hela细胞中重复与HEK293细胞中结果一致。免疫印迹结果显示突变体蛋白表达量明显低于野生型蛋白,发现突变体蛋白降解速率明显快于野生型,同时我们发现REP-1蛋白是通过蛋白溶酶体降解途径降解。本研究在HEK293细胞中共转了CHM野生型和rab27a以及突变体和rab27a,并没有检测到突变会使rab27a的定位发生改变。干扰ARPE19细胞中CHM基因的表达,ELISA检测ARPE19细胞分泌的趋化因子IL-8和MCP-1的量没有明显变化。结论:CHM基因的c.314+216＿1167-14984delins TACCAAAGTC为无脉络膜症家系的致病变异。该研究并未检测到突变对rab27a定位的影响。沉默CHM,ARPE19细胞分泌的IL-8和MCP-1的量没有明显改变。图21幅,表15个,参考文献43篇

关键词：无脉络膜症 CHM 异戊烯化 rab27a IL-8 MCP-1