检索结果-南通市图书馆

中华实验外科杂志 2023年第4期40卷 639-641页

作者：马德寿蒋树云张英王宁马志军青海大学附属医院肿瘤外科西宁8810001 青海大学研究生院西宁810016

目的体外观察低氧微环境对乳腺癌细胞增殖能力的影响,并探讨其分子机制。方法细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)用于人乳腺导管癌细胞株(BT-474,购于中国科学院上海细胞库)经低氧处理后的增殖能力;应用基因芯片对低/常氧处理后的细胞进行差异... 详细信息

目的体外观察低氧微环境对乳腺癌细胞增殖能力的影响,并探讨其分子机制。方法细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)用于人乳腺导管癌细胞株(BT-474,购于中国科学院上海细胞库)经低氧处理后的增殖能力;应用基因芯片对低/常氧处理后的细胞进行差异基因的表达检测,并在体外行实时定量聚合酶链反应(rT-PCr)验证;运用癌症基因组图谱(TCGA)及人类蛋白质表达图谱(HPA)数据库分析筛选的差异基因在乳癌及正常乳腺组织中的表达特征,并分析其水平与患者临床病理学特征及预后的相关性;基因组百科全书(KEGG)通路分析、基因过表达实验、蛋白质印迹法(Western blot)等方法探讨其发挥功能的分子机制,组间比较采用t检验。结果BT-474细胞分别经常氧、低氧干预24、36、48 h后,常氧组中的吸光度值显著低于低氧组(0.32±0.03比0.40±0.02,t=6.351;0.45±0.01比0.52±0.02,t=4.196;0.57±0.04比0.68±0.03,t=3.257;Pr-脊椎蛋白3(r-spondin3,rSPO3)是细胞经低氧处理后显著抑制表达的基因之一;进一步的rT-PCr结果示,低氧组中rSPO3的相对表达量显著低于常氧组(0.56±0.03比0.82±0.04,t=12.583,PrSPO3在乳腺癌组织中的表达量较乳腺正常组织显著降低(1.41±0.37比3.54±0.19,t=14.648,Pr=-0.693,PrSPO3低表达组中患者的总生存期(OS)显著低于高表达组[(46.52±0.28)个月比(53.79±0.47)个月,t=21.357,Prn blot结果示低氧组细胞核内β-catenin的表达量较常氧组显著升高(0.89±0.06比0.42±0.02,t=6.241,PrSPO3后24、36、48 h后细胞的吸光度值显著降低(0.43±0.03比0.32±0.02,t=4.458;0.51±0.01比0.39±0.02,t=3.267;0.66±0.03比0.49±0.04,t=4.103;PrSPO3表达后核内β-catenin的水平却明显降低(0.93±0.05比0.38±0.07,t=8.164,PrSPO3的表达,继而活化β-catenin通路促进乳腺癌细胞的增殖能力。

关键词：乳腺癌低氧 r-脊椎蛋白3 增殖

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rSPO3抑制体内结直肠癌移植瘤生长和增加NK细胞浸润的作用研究

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中国癌症杂志 2023年第7期33卷 664-672页

作者：周聪何丽娜成小姣黄廷磊涂水平上海交通大学医学院附属仁济医院肿瘤科上海200127 复旦大学附属华山医院普外科上海200040

背景与目的:结直肠癌的发生、发展涉及多个癌基因的激活和抑癌基因的失活,野生型r-脊椎蛋白3(r-spondin 3,rSPO3)在结直肠癌生长中的作用目前尚不清楚,本研究旨在探讨rSPO3对结直肠癌生长的影响并探索其潜在机制。方法:采用生物信息学分... 详细信息

背景与目的:结直肠癌的发生、发展涉及多个癌基因的激活和抑癌基因的失活,野生型r-脊椎蛋白3(r-spondin 3,rSPO3)在结直肠癌生长中的作用目前尚不清楚,本研究旨在探讨rSPO3对结直肠癌生长的影响并探索其潜在机制。方法:采用生物信息学分析rSPO3在结直肠癌及泛癌组织中的表达,分析结直肠癌中rSPO3表达与自然杀伤(natural killer,NK)细胞浸润、NK细胞激活分子表达的相关性。利用短发夹rNA(short hairpin rNA,shrNA)和慢病毒感染建立rSPO3敲减的SW480-rSPO3-KD细胞株、rSPO3过表达的HCT116-rSPO3-OE细胞株及相应的对照细胞株。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测体外各稳定转染细胞株的细胞增殖。采用流式细胞术分析各稳定转染细胞株的细胞周期、裸小鼠脾脏和移植瘤组织中NK细胞的比例。通过裸小鼠皮下移植瘤模型观察rSPO3敲减或过表达的结肠癌细胞在裸小鼠体内的生长。利用双荧光素酶报告基因系统检测rSPO3敲减或过表达对结肠癌Wnt基因转录活性的影响。结果:生物信息学分析显示,rSPO3在多种实体瘤肿瘤组织包括结直肠癌组织中的表达显著低于相应的癌旁组织。rSPO3敲减或过表达不影响体外SW480和HCT116结肠癌细胞的增殖(P>0.05)和细胞周期(P>0.05)。但在裸小鼠体内,与对照细胞相比,rSPO3敲减显著促进SW480细胞移植瘤的生长(260.2±162.4 vs 1311.7±570.1,PrSPO3过表达则显著抑制HCT116细胞移植瘤的生长(1549.0±241.2 vs 512.1±250.0,PrSPO3敲减显著减少了脾脏和移植瘤组织中NK细胞的比例(脾脏:6.42±0.94 vs 5.25±0.59,P=0.04;移植瘤:8.27±0.29 vs 6.48±1.48,P=0.04);而rSPO3过表达显著增加了脾脏和移植瘤组织中NK细胞的比例(脾脏:5.29±0.16 vs 7.02±0.49,P=0.01;移植瘤:6.39±0.39 vs 8.14±0.34,Pr Genome Atlas,TCGA)数据相关性分析显示,rSPO3表达与NK细胞表面标志物CD56(r=0.58,Pr=0.64,Pr=0.51,PrB1(r=0.37,PrSPO3敲减后Wnt荧光素酶活性下调(1.0±0.0 vs 0.45±0.09,PrSPO3过表达后Wnt荧光素酶活性上调(1.0±0.0 vs 1.75±0.14,PrSPO3能在体内显著抑制结直肠癌移植瘤的生长,并能增加移植瘤组织中NK细胞浸润,rSPO3是一个潜在的结直肠癌的抑制基因。

关键词： r-脊椎蛋白3 自然杀伤细胞结直肠癌肿瘤生长

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