检索结果-南通市图书馆

检索条件"主题词=R敲除"

共 1 条记录，以下是1-10 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

MEK通路抑制剂及Ar敲除对山羊附睾头细胞gBD104a表达的影响

MEK通路抑制剂及AR敲除对山羊附睾头细胞gBD104a表达的影响

引用

作者：郭永娟山西农业大学

学位级别：硕士

山羊β-防御素104a(gBD104a)被定位于山羊附睾头上皮细胞、山羊精子头部前端顶体及精子中部的线粒体上,其可能在精子的成熟及获能等生理过程发挥重要作用。但是,目前关于gBD104a的表达调控机制尚不清楚,因此,本试验旨在研究MEK抑制剂及A... 详细信息

山羊β-防御素104a(gBD104a)被定位于山羊附睾头上皮细胞、山羊精子头部前端顶体及精子中部的线粒体上,其可能在精子的成熟及获能等生理过程发挥重要作用。但是,目前关于gBD104a的表达调控机制尚不清楚,因此,本试验旨在研究MEK抑制剂及Ar基因敲除对山羊附睾头细胞中gBD104a表达的影响。取15日龄羔羊附睾头组织剪成小块,用胰蛋白酶消化后进行培养,建立附睾头细胞系。通过对体外培养的山羊附睾头细胞培养液中分别添加不同浓度的17β-雌二醇(E2,0.001 ng/mL、0.01 ng/mL、0.1 ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL)、二氢睾酮(DHT,10ng/mL、20ng/mL、40 ng/mL、80 ng/mL、160 ng/mL、320 ng/mL)及 MEK 信号通路抑制剂 PD0325901(1.0μM、2.5 μM、5.0 μM、10.0 μμM),处理48 h后用流式细胞仪检测附睾头细胞的活细胞数和凋亡细胞数。同时,收集各处理组的细胞,用荧光定量PCr和Western blotting技术检测gBD104a的mrNA和蛋白表达情况。应用CrISPr/Cas9系统构建了 3个Ar基因敲除载体。通过细胞转染,检测敲除Ar基因后gBD104a的表达情况。研究结果如下:(1)在附睾头细胞培养液中添加0.1 ng/mL E2处理48 h后,山羊附睾头细胞中gBD104a mrNA的表达量显著高于空白对照组和添加100 ng/mL E2组(PrNA的表达量显著高于空白对照组和添加10ng/mL、20ng/mL和40ng/mLDHT组(PrNA的表达量显著低于添加0.1 ng/mL E2组gBD104a的表达量;添加0.1 ng/mLE2和1.0 μM PD0325901时,gBD104amrNA和蛋白的表达量显著低于对照组(PrNA和蛋白的表达量均显著高于其它组(PrNA1 Ar基因敲除载体质粒转染山羊附睾头细胞,通过荧光定量PCr和Western blotting检测细胞中Ar的表达量,筛选出敲除效果最佳的载体—pCas9/grNA1-Ar-1452。用 pCas9/grNA1-Ar-1452 敲除山羊附睾头细胞Ar基因后,gBD104a mrNA和蛋白的表达量显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,E2和DHT都可以促进山羊附睾头细胞中gBD104a的表达。E2和DHT通过MEK信号通路调节gBD104a的表达,而且雄激素—雄激素受体途径参与调节gBD104a的表达。

关键词：山羊附睾头细胞 gBD104a E2 DHT PD0325901 r敲除

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共1页 << < 1 > >>

回到顶部

执行限定条件

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：