检索结果-南通市图书馆

基于pdx1路径探讨左归丸对妊娠糖尿病模型子鼠胰腺β细胞超微结构及氧化应激的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中草药 2024年第19期 6599-6606页

作者：冯忆孙凯男任晓怡吴玉洁杨敏王永辉山西中医药大学

目的采用链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的妊娠糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）模型，观察GDM模型大鼠孕期进行左归丸干预后其子代胰腺发育情况，并进一步探讨胰腺十二指肠同源框蛋白1(pancreatic and duodenal ho... 详细信息

目的采用链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的妊娠糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）模型，观察GDM模型大鼠孕期进行左归丸干预后其子代胰腺发育情况，并进一步探讨胰腺十二指肠同源框蛋白1(pancreatic and duodenal homeobox 1,pdx1)路径对GDM模型子鼠胰腺β细胞超微结构及氧化应激的影响。方法将孕鼠分为对照组、模型组、地特胰岛素（15 U/kg）组和左归丸低、中、高剂量（0.95、1.89、3.78 g/kg）组，每组6只。除对照组外，在大鼠妊娠第3天（E3d）时ip STZ构建GDM模型，对照组ip等体积柠檬酸钠缓冲液，通过测定空腹血糖判断孕鼠是否造模成功。除对照组和模型组外，其余各组孕鼠在E6d开始给药至分娩前，每日1次。待孕鼠自然分娩，子鼠由母鼠喂养至离乳第21天（B21d），从各组母鼠子代中随机选取1雌1雄子鼠作为对照组、模型组、地特胰岛素组、左归丸低、中、高剂量组，每组12只。在各组子鼠B22d时，采用血糖仪测定空腹血糖（fasting blood glucose,FBG），记录子鼠体质量、体长（测定尾根至鼻尖的距离），处死子鼠，分离血清。采用ELISA法检测空腹胰岛素水平（fasting plasma insulin,FINS）并计算胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR）；采用苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色法观察子鼠胰腺病理结构；在透射电子显微镜下观察子鼠胰腺β细胞超微结构；采用ELISA法检测子鼠血清及胰腺组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malonaldehyde,MDA）、过氧化氢酶（catalase,CAT）水平；采用Western blotting法检测子鼠胰腺组织pdx1、神经因子3(neurogenin 3,Ngn3)、肌筋膜性纤维肉瘤癌基因同源物A(v-maf avian musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene family protein A,Mafa)的蛋白表达。结果与对照组比较，模型组子鼠体质量增加、体长减少（P1）,FBG、FINS水平以及HOMA-IR升高（P1），胰腺组织病理结构及胰腺β细胞超微结构损伤明显，血清及胰腺组织氧化应激指标（SOD、MDA、CAT）水平降低（P1），胰腺组织中pdx1、Ngn3、Mafa蛋白表达量显著降低（P1）。与模型组比较，各给药组体质量减少、体长增加（P1）;FBG、FINS水平以及HOMAIR降低（P1），血清及胰腺组织氧化应激指标（SOD、MDA、CAT）水平升高（P1），胰腺组织病理结构及胰腺β细胞超微结构损伤减轻，胰腺发育关键蛋白（pdx1、Ngn3、Mafa）表达升高（P1）。结论左归丸能有效改善GDM模型子代胰腺发育，其作用机制可能与抑制氧化应激反应从而保护子鼠胰腺β细胞超微结构有关。

关键词：宫内高糖左归丸子代发育氧化应激超微结构 pdx1

Zebrafish hhex-null mutant develops an intrahepatic intestinal tube due to de-repression of cdx1b and pdx1

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

Journal of Molecular Cell Biology 2019年第6期11卷 448-462页

作者： Ce Gao Weidong Huang Yuqi Gao Li Jan Lo Lingfei Luo Honghui Huang Jun Chen Jinrong Peng MOE Key Laboratory for Molecular Animal Nutrition College of Animal Sciences Zhejiang University 866 Yu Hang Tang Road Hangzhou 310058 China College of Life Sciences Southwest University Chongqing 400715 China College of Life Sciences Zhejiang University 866 Yu Hang Tang Road Hangzhou 310058 China

The hepatopancreatic duct (HPD) system links the liver and pancreas to the intestinal tube and is composed of the extrahepatic biliary duct, gallbladder, and pancreatic duct. Haematopoietically expressed-homeobox (Hhex) protein plays an essential role in the establishment of HPD;however, the molecular mechanism remains elusive. Here, we show that zebrafish hhex-null mutants fail to develop the HPD system characterized by lacking the biliary marker Annexin A4 and the HPD marker sox9b. The hepatobiliary duct part of the mutant HPD system is replaced by an intrahepatic intestinal tube characterized by expressing the intestinal marker fatty acid-binding protein 2a (fabp2a). Cell lineage analysis showed that this intrahepatic intestinal tube is not originated from hepatocytes or cholangiocytes. Further analysis revealed that cdx1b and pdx1 are expressed ectopically in the intrahepatic intestinal tube and knockdown of cdx1b and pdx1 could restore the expression of sox9b in the mutant. Chromatin-immunoprecipitation analysis showed that Hhex binds to the promoters of pdx1 and cdx1b genes to repress their expression. We therefore propose that Hhex, Cdx1b, pdx1, and Sox9b form a genetic network governing the patterning and morphogenesis of the HPD and digestive tract systems in zebrafish.

关键词： liver development hepatopancreatic duct (HPD) hhex pdx1 cdxlb

完全性肺静脉异位引流潜在致病基因pdx1突变对其基因功能的影响

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

上海交通大学学报（医学版） 2023年第10期43卷 1219-1226页

作者：冯炜琦张琪吴逸卓鲁亚南于昱上海交通大学医学院附属新华医院心血管发育与再生医学研究所上海200092

目的·采用全外显子测序技术筛查完全性肺静脉异位引流(total anomalous pulmonary venous connection,TAPVC)的可能致病基因,并对其功能进行验证。方法·选择2014—2019年在上海交通大学医学院附属新华医院及上海儿童医学中心确诊的100... 详细信息

目的·采用全外显子测序技术筛查完全性肺静脉异位引流(total anomalous pulmonary venous connection,TAPVC)的可能致病基因,并对其功能进行验证。方法·选择2014—2019年在上海交通大学医学院附属新华医院及上海儿童医学中心确诊的100例TAPVC患儿(患儿组)以及120例健康儿童(对照组)为研究对象。收集2组儿童的血液样本,抽提全血基因组DNA并行外显子测序,以筛查TAPVC的潜在致病基因。通过Mutation Taster、SIFT、PolyPhen-2网站筛选致病基因的有害突变位点,并行Sanger测序。构建pdx1野生型(野生组)及突变型(突变组)质粒,转染入HUVEC细胞后,分别采用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法检测突变对pdx1的mRNA和蛋白水平的影响。采用STRING数据库进行蛋白与蛋白之间的相互作用分析,并采用qPCR研究pdx1调节的下游基因的表达。结果·在TAPVC患儿中发现致病基因为pdx1, Sanger测序显示该基因存在2个新发突变,即c.C237A(P33T)和c.C237G(P33A)。与野生组相比,2个突变组(CA组、CG组)的pdx1 mRNA水平没有显著变化,但蛋白相对表达量有明显增加,即分别是野生组的2.9倍和3.4倍(P=0.000,P=0.001)。蛋白质相互作用分析的结果显示,pdx1与SOX17相关联;且qPCR结果显示,pdx1过表达可下调HUVEC细胞中SOX17的表达。结论·pdx1的2个新发错义突变可影响其转录后翻译,且pdx1可能是通过调控SOX17来参与TAPVC的发生与发展。

关键词：完全性肺静脉异位引流 pdx1 错义突变 SOX17 人脐静脉内皮细胞

启动子DNA甲基化和组蛋白乙酰化对胃癌中pdx1表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中山大学学报（医学科学版） 2016年第2期37卷 175-182页

作者：马娟余莲英廖山婴王蓓蓓徐丽姝沙卫红王启仪刘庆华广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省老年医学研究所消化科广东广州510080 中山大学附属第一医院肾内科广东广州510080

【目的】已知胃癌中pdx1表达下调,本研究旨在探讨DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰对pdx1基因表达的调控。【方法】免疫组化法检测胃癌组织芯片中pdx1、Dnmt1和HDAC的表达,分析其相关性。5’-aza-d C和TSA处理胃癌细胞,RT-PCR检测pdx1 m RN... 详细信息

【目的】已知胃癌中pdx1表达下调,本研究旨在探讨DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰对pdx1基因表达的调控。【方法】免疫组化法检测胃癌组织芯片中pdx1、Dnmt1和HDAC的表达,分析其相关性。5’-aza-d C和TSA处理胃癌细胞,RT-PCR检测pdx1 m RNA水平,分析DNA去甲基化和组蛋白乙酰化对pdx1表达的影响;构建6个pdx1启动子片段至p GL3载体,检测转录活性,分析去甲基化和乙酰化对pdx1启动子转录活性的影响。MSP和BSP评估pdx1启动子DNA甲基化状态以及启动子活性受5’-aza-d C和Sss I的影响;Ch IP评估pdx1启动子组蛋白乙酰化状态以及启动子活性受TSA的影响。【结果】免疫组化结果显示与正常组织对比,胃癌组织中的pdx1表达下调,Dnmt1和HDAC表达上调,pdx1和Dnmt1及HDAC的表达负相关(Ppdx1在胃癌细胞中重获表达;F383是pdx1启动子核心,5’-aza-d C和TSA增强F383转录活性,Sss I抑制F383转录活性;MSP结果显示F383在胃癌细胞中呈完全甲基化;BSP结果显示与对照比较,位于F383区域内17个Cp G位点中80%以上呈现甲基化。Ch IP分析结果提示F383呈组蛋白H3和H4低乙酰化。【结论】pdx1基因在胃癌中表达沉默与启动子DNA高甲基化和组蛋白低乙酰化有关。

关键词：胃癌 pdx1 DNA甲基化组蛋白乙酰化

Identification and differentiation of pdx1 β-cell progenitors within the human pancreatic epithelium

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

World Journal of Diabetes 2014年第1期5卷 59-68页

作者： Karen L Seeberger Sarah J Anderson Cara E Ellis Telford Y Yeung Gregory S Korbutt Alberta Diabetes Institute University of Alberta Department of Surgery University of Alberta Alberta Diabetes Institute 5-002 Li Ka Shing CenterUniversity of Alberta

AIM:To minimize the expansion of pancreatic mesenchymal cells in vitro and confirm thatβ-cell progenitors reside within the pancreatic ***:Due to mesenchymal stem cell(MSC)expansion and overgrowth,progenitor cells within the pancreatic epithelium cannot be characterized in vitro,thoughβ-cell dedifferentiation and expansion of MSC intermediates via epithelial-mesenchymal transition(EMT)may generateβ-cell *** epithelial cells from endocrine and non-endocrine tissue were expanded and differentiated in a novel pancreatic epithelial expansion medium supplemented with growth factors known to support epithelial cell growth(dexamethasone,epidermal growth factor,3,5,3’-triiodo-l-thyronine,bovine brain extract).Cells were also infected with a single and dual lentiviral reporter prior to cell *** green fluorescent protein was controlled by the rat Insulin 1 promoter and the monomeric red fluorescent protein was controlled by the mouse pdx1 *** combination with lentiviral tracing,cells expanded and differentiated in the pancreatic medium were characterized by flow cytometry(BD fluorescence activated cell sorting),immunostaining and real-time polymerase chain reaction(PCR)(7900HT Fast Realtime PCR System).RESULTS:In the presence of 10%serum MSCs rapidly expand in vitro while the epithelial cell population *** percentage of vimentin+cells increased from 22%±5.83%to 80.43%±3.24%(14 d)and99.00%±0.0%(21 d),and the percentage of epithelial cells decreased from 74.71%±8.34%to 26.57%±9.75%(14 d)and 4.00%±1.53%(21 d),P1 for all time *** novel pancreatic epithelial expansion medium preserved the epithelial cell phenotype and minimized epithelial cell dedifferentiation and *** expanded in our epithelial medium contained significantly less mesenchymal cells(vimentin+)compared to controls(44.87%±4.93%vs 95.67%±1.36%;P1).During cell differentiation lentiviral reporting demonstrated that,pdx1+and insu

关键词： Differentiation Epithelial Epithelial-mes-enchymal transition Mesenchymal pdx1 Insulin Progenitor Vimentin

高效pdx1/insulin双报告基因载体的构建及其初步应用

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2017年第12期21卷 1903-1908页

作者：叶玲玲李世崇孙海燕蓝三春陈昭烈王启伟军事医学科学院生物工程研究所北京市100071 解放军307医院口腔科北京市100071 解放军307医院造血干细胞移植科北京市100071

背景:胰岛细胞移植是治疗1型糖尿病最有效的方法之一,然而移植细胞来源短缺限制了其临床应用。多能干细胞有望成为胰岛细胞移植的理想种子细胞,但其向胰岛β细胞分化是一个复杂的过程。目的:构建高效pdx1/insulin双报告基因载体,探讨其... 详细信息

背景:胰岛细胞移植是治疗1型糖尿病最有效的方法之一,然而移植细胞来源短缺限制了其临床应用。多能干细胞有望成为胰岛细胞移植的理想种子细胞,但其向胰岛β细胞分化是一个复杂的过程。目的:构建高效pdx1/insulin双报告基因载体,探讨其实时监测诱导多能干细胞向胰岛β细胞分化中关键性基因表达的可行性。方法:首先在pT iger载体上引入嘌呤霉素抗性,然后以646 bp的小鼠Ins1启动子替换了原来载体上410 bp的小鼠Ins1启动子,获得高效pdx1/insulin双报告基因载体。最后,将载体导入INS-1细胞和诱导多能干细胞,验证其功能。结果与结论:(1)实验成功构建了高效pdx1/insulin双报告基因载体;(2)在INS-1细胞中验证了载体获得嘌呤霉素抗性,提高了insulin表达效率,并在INS-1细胞中检测到pdx1和insulin的表达;(3)实验初步证明了pdx1/insulin双报告基因能够有效监测细胞分化过程中pdx1和insulin基因的表达。

关键词：组织构建组织工程诱导多能干细胞 pdx1 双报告基因胰岛β细胞诱导分化国家自然科学基金

天然产物调控pdx1抗糖尿病作用的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

沈阳药科大学学报 2023年第11期40卷 1540-1548页

作者：王瑞琪刘辰鹏赵目聪李国玉哈尔滨商业大学药学院药物工程技术研究中心黑龙江哈尔滨150076

胰腺-十二指肠同源盒1基因(pancreatic and duodenal homeobox 1,pdx1)是决定胰腺分化和发育,调控胰岛素的关键基因。pdx1的缺失及下调可诱发糖尿病的发生和发展,而对其上调则能够调节胰腺发育、促β细胞分化和胰岛素分泌,发挥治疗糖尿... 详细信息

胰腺-十二指肠同源盒1基因(pancreatic and duodenal homeobox 1,pdx1)是决定胰腺分化和发育,调控胰岛素的关键基因。pdx1的缺失及下调可诱发糖尿病的发生和发展,而对其上调则能够调节胰腺发育、促β细胞分化和胰岛素分泌,发挥治疗糖尿病作用。pdx1已然成为糖尿病治疗药物开发的新靶点。越来越多的天然产物被发现具有上调pdx1的作用且表现出抗糖尿病活性。然而,目前尚未有相关文献进行总结报道。本文通过检索CNKI、Pubmed等数据库,对调控pdx1的天然产物抗糖尿病作用的相关研究进行归纳和总结,以期为靶向调控pdx1的新型抗糖尿病药物开发提供思路和参考。

关键词：天然产物 pdx1 糖尿病

转录因子pdx1在胰腺发育及糖尿病中的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生命科学 2019年第11期31卷 1173-1178页

作者：闫承志西华师范大学生命科学学院西南野生动植物资源保护教育部重点实验室

pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1)是一种同源框转录因子,在胰腺发育及β细胞功能维持中起重要调控作用。研究发现,pdx1基因纯合缺失会导致胰腺发育不全;在β细胞成熟与分化过程中,pdx1通过协同其他因子或以顺式调控的方式参与... 详细信息

pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1)是一种同源框转录因子,在胰腺发育及β细胞功能维持中起重要调控作用。研究发现,pdx1基因纯合缺失会导致胰腺发育不全;在β细胞成熟与分化过程中,pdx1通过协同其他因子或以顺式调控的方式参与调节;此外,pdx1可以直接与胰岛素启动子结合,调节胰岛素合成与分泌。近来针对pdx1的研究表明,它在β细胞重塑、基因编辑及药物开发等方面具有重要作用。现就pdx1在胰腺发育中的作用机制及其在糖尿病治疗中的进展进行综述。

关键词： pdx1 胰腺发育糖尿病

pdx1在宣威女性肺腺癌组织中的表达及其对细胞生物学行为的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

PDX1在宣威女性肺腺癌组织中的表达及其对细胞生物学行为的影响

作者：曹润昆明医科大学

学位级别：硕士

[背景与目的]宣威地区非吸烟女性肺腺癌是严重危害人民健康的地方重大区域性疾病,其发生发展机制尚不明确。尽管大量的研究表明宣威肺癌的高发病率与室内燃煤使用密切相关,然而国家炉灶改进后,宣威肺癌的死亡率和发病率并没有明显下降... 详细信息

[背景与目的]宣威地区非吸烟女性肺腺癌是严重危害人民健康的地方重大区域性疾病,其发生发展机制尚不明确。尽管大量的研究表明宣威肺癌的高发病率与室内燃煤使用密切相关,然而国家炉灶改进后,宣威肺癌的死亡率和发病率并没有明显下降。有研究发现,宣威女性肺腺癌有明显的家族聚集性,且其基因突变图谱与普通肺腺癌存在差异。为了研究宣威女性肺腺癌独特的遗传学基础,我们前期对宣威女性肺腺癌组织进行转录组测序及差异表达分析,发现胰十二指肠同源盒-1(pdx1)在宣威非吸烟女性肺腺癌中表达明显升高,且与患者的无疾病生存期(DFS)呈负相关,提示pdx1可能在宣威非吸烟女性肺腺癌中发挥促癌作用,是这一具有独特遗传学基础的宣威区域性高发肺癌潜在的特异性靶点。但目前pdx1在恶性肿瘤的作用机制不明确,尤其有关pdx1在肺癌中的研究更少。该研究旨在探索pdx1在宣威非吸烟女性肺腺癌组织及同一病人癌旁正常组织中的表达,并分析比较pdx1表达变化对肺腺癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡能力及细胞生长周期的影响。[方法]1、收集35对宣威非吸烟女性患者的肺腺癌组织标本和正常肺组织,采用免疫组织化学技术分析比较这两种组织中pdx1蛋白的表达水平。2、以Beas-2b细胞为对照,采用Western Blot技术比较pdx1在不同人肺腺癌细胞A549、XWLC-05、H838的表达水平。3、选择pdx1表达最高的细胞株采用CRISPR-Cas9技术敲除pdx1基因。设计4个sgRNA,构建pdx1-sgRNA载体,通过U6测序对比检测敲除质粒是否构建成功。对构建成功的敲除质粒经质粒提取后,采用三质粒包装系统(lentiCRISPR v2、psPAX2、PMD2G)通过239T细胞进行慢病毒包装,收集病毒液后加入至肺腺癌细胞,嘌呤霉素(Puromycin)筛选,最后通过Western Blot实验验证敲除效率,从4个sgRNA所引导的CRISPR-Cas9敲除pdx1基因的肺腺癌细胞株中选择敲除效率最高的2个进行后续的表型研究。4、选择pdx1表达水平最低的肺腺癌细胞株用于pdx1过表达。将购买的pdx1过表达质粒psin-ef 1-puro-pdx1经过质粒转化、质粒提取、慢病毒包装后感染肺腺癌细胞,经Puromycin筛选Western Blot验证过表达,对过表达成功的细胞进行功能实验。5、通过CCK8实验观察pdx1敲除及过表达对肺腺癌细胞增殖能力的影响;利用Transwell实验和划痕实验评估pdx1基因水平变化对肺腺癌细胞侵袭/迁移能力的影响;采用流式细胞术(FCM)检测pdx1基因水平变化对肺腺癌细胞生长周期及凋亡能力的影响。[结果]1、pdx1在宣威非吸烟女性肺腺癌组织和配对正常肺组织中的阳性表达率分别为:31.42%(11/35)、2.86%(1/35),有统计学差异(Ppdx1蛋白的表达水平均高于Beas-2b,其中A549的表达最高,H838次之,XWLC-05最低,因此选择A549细胞株进行CRISPR-Cas9技术敲除pdx1基因,选择XWLC-05细胞用于过表达pdx1。3、4个pdx1-sgRNA敲除质粒均成功构建,慢病毒感染A549细胞后,与对照组 A549-NC 相比较,敲除组 A549-sg1、A549-sg2、A549-sg3、A549-sg4细胞中pdx1蛋白表达水平均明显降低,以A549-sg2、A549-sg4最低,将细胞A549-sg2、A549-sg4作为敲除细胞株用于后续细胞表型实验。4、相较XWLC-05-NC细胞,过表达组XWLC-05-pdx1细胞中pdx1蛋白水平显著升高。5、pdx1基因敲除组细胞A549-sg2和A549-sg4增殖速度较对照组明显减弱,差异有统计学意义(Ppdx1过表达细胞XWLC-05-pdx1的增殖能力较对照组XWLC-05-NC无明显变化(P>0.05)。pdx1基因敲除后,A549细胞穿过Transwell小室的细胞数减少,有统计学差异Ppdx1基因过表达后,XWLC-05细胞穿至Transwell小室外侧的细胞数以及划痕时细胞的迁移速度均无明显改变(P>0.05)。敲除A549细胞中pdx1基因后,G1期细胞比例下降,S期细胞比例增加,差异有统计学意义(Ppdx1基因可使A549细胞生长周期被阻滞于S期;同时pdx1基因敲除的A549细胞凋亡率明显上升(Ppdx1基因后,细胞各周期比例及凋亡率均无明显变

关键词：肺腺癌 pdx1 CRISPR-Cas9