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pax2在肾脏发育和肾疾病中的调控作用

遗传 2011年第9期33卷 931-938页

作者：侯晓明陈星王玉林山东大学附属省立医院儿科济南250021

配对盒基因2(Paired box2,pax2)是肾脏发育中重要的转录因子,在前、中、后肾发育的全过程表达,集中分布在发育的各级小管和间充质成分,具有特定的时空特性。研究表明pax2与多种调节肾脏发育的因子Gdnf、Ret、SHH、Wnt4及Fgf等相互作用,... 详细信息

配对盒基因2(Paired box2,pax2)是肾脏发育中重要的转录因子,在前、中、后肾发育的全过程表达,集中分布在发育的各级小管和间充质成分,具有特定的时空特性。研究表明pax2与多种调节肾脏发育的因子Gdnf、Ret、SHH、Wnt4及Fgf等相互作用,共同精准诱导生肾索形成,前/中肾管的形成及分化,输尿管芽的发生及分支,肾单位的诱导分化。pax2的变异导致多种先天性肾脏及输尿管发育畸形,最易发生在肾-视神经盘缺损综合征。在肾细胞癌、Wilms瘤和多种肾小球及肾小管获得性疾病中存在pax2的异常表达,其诊断和治疗价值将是今后研究的重点。文章主要对pax2的分子结构、在肾脏发育和肾疾病的表达及调控进行了综述。

关键词： pax2 肾脏发育基因调控肾疾病

土槿皮乙酸通过调控pax2对宫颈癌细胞的影响

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中成药 2020年第9期42卷 2291-2298页

作者：关德凤秦天生杨永秀兰州大学第一临床医学院甘肃兰州730000 甘肃省人民医院妇科甘肃兰州730000 兰州大学第一医院妇科甘肃省妇科肿瘤重点实验室甘肃兰州730000

目的探讨土槿皮乙酸通过调控pax2对宫颈癌细胞的影响及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖情况;shRNA干扰技术构建pax2低表达Hela细胞株,分为空白组、阴性对照组、sh-pax2组、土槿皮乙酸组、土槿皮乙酸+sh-pax2组;流式细胞术检测各组细... 详细信息

目的探讨土槿皮乙酸通过调控pax2对宫颈癌细胞的影响及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖情况;shRNA干扰技术构建pax2低表达Hela细胞株,分为空白组、阴性对照组、sh-pax2组、土槿皮乙酸组、土槿皮乙酸+sh-pax2组;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Transwell小室迁移实验检测各组细胞迁移能力;String预测pax2潜在作用蛋白;Western blot检测蛋白表达;免疫荧光实验观察各组细胞中β-catenin的定位。结果土槿皮乙酸可时间-浓度依赖地抑制宫颈癌细胞增殖。各宫颈癌细胞中pax2蛋白表达与土槿皮乙酸对各细胞的IC50均呈负相关(Ppax2蛋白表达;土槿皮乙酸和低表达pax2均可诱导Hela细胞凋亡并抑制其迁移,可降低Bcl-2、Cyclin D1、Survivin、MMP2、MMP9、β-catenin和p-β-catenin蛋白和升高BAX蛋白表达(Ppax2表达和Wnt/β-catenin信号通路进而诱导细胞凋亡并抑制其转移。

关键词：土槿皮乙酸 pax2 宫颈癌凋亡迁移 Wnt/β-catenin信号通路

L-精氨酸对宫内发育迟缓大鼠肾脏pax2表达的影响

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中国当代儿科杂志 2011年第2期13卷 145-148页

作者：盖建芳谢宗德李雯李素萍胡劲涛中南大学湘雅二医院新生儿科湖南长沙410011

目的研究L-精氨酸(L-Arg)对宫内发育迟缓(IUGR)大鼠肾脏pax2表达的影响。方法孕鼠随机分为3组:正常对照组、IUGR组和干预组。正常对照组母鼠全程以普通饲料(含21%蛋白)喂养。IUGR组和干预组大鼠孕期均采用低蛋白饲料(含10%蛋白)喂养。... 详细信息

目的研究L-精氨酸(L-Arg)对宫内发育迟缓(IUGR)大鼠肾脏pax2表达的影响。方法孕鼠随机分为3组:正常对照组、IUGR组和干预组。正常对照组母鼠全程以普通饲料(含21%蛋白)喂养。IUGR组和干预组大鼠孕期均采用低蛋白饲料(含10%蛋白)喂养。仔鼠出生后,IUGR组母鼠常规饲料喂养;干预组母鼠在常规饲料喂养的基础上,于部分饮水中每日添加L-Arg 200 mg/kg。取7 d、21 d、2月和3月龄仔鼠肾脏组织,用免疫组化和Western blot法检测pax2表达。结果免疫组化显示正常对照组仔鼠在各时间点均未见明显pax2表达。IUGR组、干预组仔鼠2月龄和3月龄时,两组大鼠在肾小球和肾小管区可见pax2阳性细胞,且3月龄鼠的pax2表达比2月龄的更显著(Ppax2表达低于同龄IUGR组(P21 d均未见pax2蛋白明显表达。到2月龄和3月龄时,干预组和IUGR组仔鼠肾组织pax2蛋白表达均较正常对照组显著增多,但干预组的表达低于IUGR组(Ppax2基因有再表达现象;用L-Arg干预后pax2表达明显减少。

关键词：宫内发育迟缓 pax2 肾脏 L-精氨酸大鼠

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pax2在肾小管上皮细胞转分化中的作用

临床儿科杂志 2007年第4期25卷 284-287页

作者：耿文茂易文何小解何庆南党西强曹艳莫双红中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室湖南省小儿肾脏病临床中心湖南长沙410011

目的揭示核转录因子(pax2)在肾小管上皮细胞转分化过程中的可能作用。方法38例病例组肾组织按间质病变程度分为轻、中、重3组,其中轻度病变15例,中度病变11例,重度病变12例;对照组为5例外伤后肾切除组织。采用免疫组化法评定肾组织pax2... 详细信息

目的揭示核转录因子(pax2)在肾小管上皮细胞转分化过程中的可能作用。方法38例病例组肾组织按间质病变程度分为轻、中、重3组,其中轻度病变15例,中度病变11例,重度病变12例;对照组为5例外伤后肾切除组织。采用免疫组化法评定肾组织pax2的表达率和肾小管上皮细胞转分化率。对肾间质病变轻、中、重3组组内肾小管上皮细胞转分化率、pax2表达率作方差分析,对pax2表达量与肾小管上皮细胞转分化率作相关分析。结果正常对照组肾小管上皮细胞只表达角蛋白(CK),不表达平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及pax2。病例组肾间质病变轻、中、重3组肾小管上皮细胞均不同程度表达α-SMA及pax2;不同肾间质病变组,肾小管上皮细胞转分化率及pax2表达量差异均有统计学意义。相关分析表明,pax2表达量和肾小管上皮细胞转分化率呈正相关(r=0.886,Ppax2回归表达可能导致肾小管上皮细胞转分化。

关键词：肾小管上皮细胞转分化角蛋白平滑肌肌动蛋白 pax2

pax2和增殖细胞核抗原在肾细胞癌组织中的表达及意义

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江苏医药 2003年第6期29卷 411-413,F002页

作者：朱清毅吴宏飞钱立新张炜郑肇巽南京医科大学第一附属医院泌尿外科 210029 南京医科大学第一附属医院病理科 210029

目的　探讨pax2和增殖细胞核抗原 (PCNA)在肾细胞癌组织中的表达及意义。方法　应用免疫组化SP法检测 4 4例肾细胞癌患者组织样本及 11例癌旁正常肾组织标本中pax2和PCNA的表达。结果　在肾细胞癌患者组织样本及癌旁正常肾组织标本中pax... 详细信息

目的　探讨pax2和增殖细胞核抗原 (PCNA)在肾细胞癌组织中的表达及意义。方法　应用免疫组化SP法检测 4 4例肾细胞癌患者组织样本及 11例癌旁正常肾组织标本中pax2和PCNA的表达。结果　在肾细胞癌患者组织样本及癌旁正常肾组织标本中pax2的阳性表达率分别为 6 3 6 %和 18 2 % ,两者间有显著差异 (P pax2的阳性表达随肾细胞癌临床分期的升高而增加 ,与组织类型及病理分级无明显相关。PCNA在肾细胞癌患者组织中的阳性表达明显高于癌旁正常肾组织 (P pax2和PCNA阳性表达间无明显的相关关系。结论　pax2和PCNA可能参与了肾细胞癌发生和发展的过程。

关键词：肾细胞癌 pax2 增殖细胞核抗原免疫组织化学

pax2小干扰RNA在UUO大鼠体内的筛选与鉴定

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医学研究生学报 2012年第7期25卷 678-684页

作者：李丽王长山吴玉斌佳木斯大学附属第一医院儿科佳木斯医学博士154002 佳木斯大学基础医学院生物教研室佳木斯154007 中国医科大学附属盛京医院肾内科沈阳110004

目的梗阻性肾病是由于泌尿道机构和(或)功能改变,阻碍尿液的排出,导致肾实质病理和功能损害的临床综合征。病理学特征主要表现为肾小管萎缩和间质纤维化。文中通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,筛选及鉴定有效抑制肾间质纤维化... 详细信息

目的梗阻性肾病是由于泌尿道机构和(或)功能改变,阻碍尿液的排出,导致肾实质病理和功能损害的临床综合征。病理学特征主要表现为肾小管萎缩和间质纤维化。文中通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,筛选及鉴定有效抑制肾间质纤维化大鼠肾组织pax2基因表达的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列。方法制作单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型,光镜下观察肾组织病理形态学变化;针对大鼠pax2 mRNA序列全长(mRNA:NM_001106361),设计合成4对siRNA干扰序列和阴性对照序列,为了观察体内转染同时合成FAM标记的阴性对照,以invivo jetPEI体内转染试剂为载体转染至UUO大鼠肾被膜下,利用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测肾组织pax2 mRNA及蛋白表达。结果通过HE和Masson染色观察到UUO模型3 d后肾纤维化表现;UUO模型转染3 d后,荧光显微镜观察到肾小管周围存在绿色荧光,4对干扰序列均有不同程度的抑制肾皮质pax2 mRNA及蛋白的表达,其中siRNA3位点对pax2干扰效果最强,mRNA及蛋白抑制分别达到55%和81%。结论成功筛选出1对有效抑制肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞pax2表达siRNA,为深入研究肾纤维化的发病机制提供新的手段。

关键词：小干扰RNA 单侧输尿管结扎 pax2 肾间质纤维化

pax2在子宫内膜癌中的表达及其DNA甲基化调控

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PAX2在子宫内膜癌中的表达及其DNA甲基化调控

作者：贾楠复旦大学

学位级别：硕士

目的：探讨pax2在子宫内膜癌中的表达、功能及其启动子区DNA甲基化的调控机制。方法：免疫组织化学方法检测pax2蛋白在人子宫内膜癌组织、各类增生过长组织和正常对照内膜组织中的表达并分析其与临床病理特征之间的关系;小RNA干扰方法... 详细信息

目的：探讨pax2在子宫内膜癌中的表达、功能及其启动子区DNA甲基化的调控机制。方法：免疫组织化学方法检测pax2蛋白在人子宫内膜癌组织、各类增生过长组织和正常对照内膜组织中的表达并分析其与临床病理特征之间的关系;小RNA干扰方法敲除子宫内膜癌细胞株中pax2的表达,CCK-8法、transwell及细胞划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭及迁移能力的改变;亚硫酸盐测序法检测细胞株pax2启动子区甲基化水平,MassARRAY平台检测组织中pax2启动子区甲基化水平并分析其与表达的关系：甲基化酶抑制剂处理内膜癌细胞探讨pax2甲基化对表达的影响：TF search数据库预测与pax2差异化甲基化片段结合的转录因子。结果：pax2在子宫内膜癌组织上皮中的表达高于各类增生过长及正常内膜,在肿瘤组织间质中的表达低于正常内膜间质,pax2表达与p53蛋白阳性相关：敲除pax2后肿瘤细胞的增殖和侵袭能力受到抑制,但不影响细胞迁移能力;pax2启动子区甲基化水平在子宫内膜癌组织和细胞株中均高于正常内膜组织和正常内膜腺上皮,并与pax2表达水平相一致;甲基化酶抑制剂下调pax2启动子区甲基化水平可以抑制pax2蛋白的表达;肿瘤中pax2启动子区高甲基化可能通过Egr家族或c-Ets-1转录因子调控pax2基因的表达。结论：pax2参与子宫内膜癌细胞增殖与侵袭,可能通过启动子区高甲基化激活方式在子宫内膜癌中高表达。

关键词： pax2 子宫内膜癌 MassARRAY 启动子区高甲基化激活

pax2、AIB-1在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床特性关系的研究

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PAX2、AIB-1在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床特性关系的研究

作者：李赛男河北医科大学

学位级别：硕士

目的：目前,全球乳腺癌的发病率已居女性恶性肿瘤首位并呈逐年上升趋势,严重威胁妇女的生命和健康。随着乳腺癌发病率的不断增加,对乳腺癌相关基因的研究已成为乳腺癌研究的热点问题。有研究显示,配对盒基因pax2 (Paired box gene 2)和... 详细信息

目的：目前,全球乳腺癌的发病率已居女性恶性肿瘤首位并呈逐年上升趋势,严重威胁妇女的生命和健康。随着乳腺癌发病率的不断增加,对乳腺癌相关基因的研究已成为乳腺癌研究的热点问题。有研究显示,配对盒基因pax2 (Paired box gene 2)和乳腺癌扩增因子AIB-1 (Amplified in breast cancer-1)在雌激素受体(Estrogen Receptor, ER)阳性的乳腺癌患者中参与了调控人表皮生长因子C-erbB-2 (human epidermal growth factor receptor, HER-2/C-erbB-2)的转录机制,从而进一步调控C-erbB-2的表达,目前国内外对pax2、AIB-1与乳腺癌临床病理特性及C-erbB-2关系的研究并不多见。本研究采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)技术和免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(streptavidin peroxdase conjugated method, S-P)分别从转录水平和蛋白水平检测配对盒基因pax2和乳腺癌扩增因子AIB-1在ER阳性乳腺癌患者乳腺正常组织和乳腺癌组织中的表达情况,分析乳腺癌组织中pax2和AIB-1的表达与其临床生物学行为及雌激素受体ER、孕激素受体(progestogen receptor, PR)、C-erbB-2的关系,为乳腺癌的判定预后和基因治疗提供新的实验依据。方法：采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)技术和免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法(streptavidin peroxdase conjugated method, S-P)分别从转录水平和蛋白水平检测配对盒基因pax2和乳腺癌扩增因子AIB-1在乳腺正常组织和癌组织中的表达情况,分析乳腺癌组织中pax2和AIB-1的表达与乳腺癌患者年龄、月经状况、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、病理类型、腋淋巴结转移状况、ER、PR、C-erbB-2的临床生物学行为的关系,以及两个基因之间的表达关系。结果：1 pax2基因的mRNA水平表达乳腺癌组织和正常组织中pax2基因的矫正值(pax2/GAPDH)分别为1.1837±0.4931、1.1778±0.5216,经过统计学处理,二组之间无统计学差异(Z=-0.182,p=0.826)。1.1 pax2 mRNA水平表达与临床病理特征的分层分析1.1.1按患者年龄进行分层分析发现,32例年龄小于50岁乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.2148±0.5376,36例年龄大于或等于50岁乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.1742±0.5012。经过统计学处理,pax2的表达在年龄分布中无统计学差异(Z=-1.032 p=0.314),pax2基因表达的高低与乳腺癌患者的年龄无关。1.1.2按患者月经状况进行分层分析发现,34例未绝经乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.3163±0.5149,34例已绝经乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.1691±0.4988。经过统计学处理,pax2的表达在月经状况分布中无统计学差异(Z=-1.325;p=0.125),pax2表达的高低与乳腺癌患者的月经状况无关。1.1.3按肿瘤大小进行分层分析发现,41例T≤2cm乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.1952±0.4218,27例T>2cm乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.1736±0.3994。经过统计学处理,pax2的表达在肿瘤大小的分布中无统计学差异(Z=-1.830;p=0.061),pax2表达的高低与乳腺癌患者的肿瘤大小无关。1.1.4按临床分期进行分层分析发现,19例Ⅰ期乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.1559±0.4638,33例Ⅱ期乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.2483±0.4739,16例Ⅲ期乳腺癌患者中pax2基因表达矫正值(pax2/GAPDH)为1.2375±0.4214。经过统计学处理,pax2的表达在临床分期的分布中无统计学差异(p=0.593),pax2表达的高低与乳腺癌患者的临床分期无关。1.1.5按组织学分级进行分层分析发现,58例组织学分级Ⅰ-Ⅱ级乳腺癌患

关键词： RT-PCR 免疫组化 pax2 AIB-1 乳腺癌

卵巢上皮性癌组织中pax2基因的表达及临床意义

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中国医科大学学报 2010年第10期39卷 861-864页

作者：夏志军付丽中国医科大学附属盛京医院妇产科沈阳110004 东港市中心医院妇产科辽宁东港118300

目的探讨pax2mRNA和蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应和免疫组化方法检测pax2mRNA和蛋白在31例卵巢上皮性癌、11例卵巢上皮性交界性肿瘤、10例卵巢上皮性良性肿瘤和11例正常卵巢组织中的表达,并分析... 详细信息

目的探讨pax2mRNA和蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应和免疫组化方法检测pax2mRNA和蛋白在31例卵巢上皮性癌、11例卵巢上皮性交界性肿瘤、10例卵巢上皮性良性肿瘤和11例正常卵巢组织中的表达,并分析其表达与卵巢上皮性癌临床病理学指标的关系。结果正常卵巢表面上皮无pax2的表达,pax2mRNA和蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达显著高于卵巢交界性肿瘤组织、卵巢良性肿瘤组织及正常卵巢组织,差异均有统计学意义(Ppax2mRNA和蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。在晚期(Ⅲ～Ⅳ)及低分化的卵巢上皮性癌中pax2mRNA和蛋白的表达高于早期(Ⅰ～Ⅱ)及高中分化者,差异均有统计学意义(Ppax2在卵巢癌的发生发展中起一定作用,可能对卵巢癌恶性程度的评估有指导意义。

关键词：卵巢癌 pax2 逆转录聚合酶链反应免疫组织化学