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pvt1促进在胶质瘤C6细胞微环境中的BMSCs增殖和迁移

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四川大学学报（医学版） 2021年第3期52卷 438-444页

作者：刘东蓉刘艳吴培连郑雷蕾黄小亚孟雪欢胡赟重庆医科大学附属口腔医院重庆401145 口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆401145 重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室重庆401145 重庆医科大学附属第二医院重庆400010

目的探讨与胶质瘤C6细胞间接共培养后骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和迁移能力的变化以及长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤变异异位基因1(plasmacytoma variant translocation 1 gene,pvt1)在这种变化中的作用。方法分离、培养、鉴定BMSCs... 详细信息

目的探讨与胶质瘤C6细胞间接共培养后骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和迁移能力的变化以及长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤变异异位基因1(plasmacytoma variant translocation 1 gene,pvt1)在这种变化中的作用。方法分离、培养、鉴定BMSCs后,采用Transwell小室将生长状态良好的BMSCs与胶质瘤C6细胞间接共培养(共培养组),单独培养的正常BMSCs为对照组。CCK8及软琼脂克隆形成实验检测2组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,划痕实验及Transwell法检测细胞的迁移能力,实时定量PCR(qRT-PCR)检测pvt1基因的表达。在共培养组BMSCs中转染sipvt1(si-pvt1组)和si-NC(si-NC组),转染后重复上述检测,并增加qRT-PCR检测周期蛋白基因CyclinD1及迁移相关基因基质金属蛋白酶2、9(MMP2、MMP9)的表达。结果所用BMSCs具有成骨、成脂分化能力。与对照组相比,共培养组BMSCs体积变小,排列紊乱,细胞间接触抑制消失,增殖及迁移能力增强,S期及G2期细胞比例增加,pvt1表达增加(Ppvt1组抑制共培养BMSCs的增殖及迁移能力,G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,pvt1、CyclinD1及MMP2、MMP9 mRNA表达也降低(Ppvt1高表达有关。

关键词：长链非编码RNA pvt1 骨髓间充质干细胞间接共培养增殖迁移

lncRNA pvt1沉默对高糖诱导的血管内皮细胞增殖、凋亡及氧化应激的影响

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中国应用生理学杂志 2021年第5期37卷 561-565页

作者：刘波顾燕罗建华范元硕冯志宇贵州省人民医院内分泌科贵阳550002 贵州省人民医院肿瘤科贵阳550002

目的:探讨抑制lncRNA pvt1对高糖诱导的血管内皮细胞的增殖,凋亡和氧化应激的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为四组:对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖组(30 mmol/L葡萄糖),高糖+siNC组(30 mmol/L葡萄糖+siNC,细胞转染阴... 详细信息

目的:探讨抑制lncRNA pvt1对高糖诱导的血管内皮细胞的增殖,凋亡和氧化应激的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为四组:对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖组(30 mmol/L葡萄糖),高糖+siNC组(30 mmol/L葡萄糖+siNC,细胞转染阴性对照组),高糖+sipvt1组(30 mmol/L葡萄糖+sipvt1,抑制lncRNA pvt1组)。采用荧光定量PCR的方法检测转染后pvt1的表达水平。MTT检测sipvt1(短片段干扰RNA pvt1)对高糖诱导的HUVECs细胞增殖能力的影响。流式细胞术检测sipvt1对高糖诱导的HUVECs细胞ROS和凋亡水平。Western blot检测HUVECs细胞中凋亡相关蛋白如Bax,Bcl-2和cleaved-caspase-3的表达水平。结果:与对照组比较,转染sipvt1后,pvt1的表达水平显著降低(Ppvt1组中的HUVECs细胞增殖活力显著增加(Ppvt1组中HUVECs细胞中ROS和凋亡率均有减少(P1)。与高糖+siNC组比较,高糖+sipvt1组cleaved-caspase-3和Bax表达水平显著下调,Bcl-2的表达显著上调(P1)。结论:抑制lncRNA pvt1可以显著增加高糖诱导的HUVECs细胞增殖活力,减轻氧化应激,抑制细胞凋亡。

关键词：人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 增殖氧化应激凋亡 pvt1

pvt1表达与消化系统肿瘤相关性的系统评价

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中国循证医学杂志 2021年第10期21卷 1133-1140页

作者：杨康曹威李加乐陈博安徽医科大学第四附属医院普外科合肥230011 安徽医科大学第一附属医院普外科合肥230022 安徽医科大学第二附属医院急诊内科合肥230601

目的系统评价pvt1表达与消化系统肿瘤(DST)的相关性。方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、The Cochrane Library、CBM、CNKI数据库,搜集pvt1表达与DST相关性的病例-对照研究,检索时限均从建库至2021年6月21日。由2名研究者... 详细信息

目的系统评价pvt1表达与消化系统肿瘤(DST)的相关性。方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、The Cochrane Library、CBM、CNKI数据库,搜集pvt1表达与DST相关性的病例-对照研究,检索时限均从建库至2021年6月21日。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Stata 16.0软件进行Meta分析。结果共纳入34个病例-对照研究,包括3 882例DST患者。Meta分析结果显示,pvt1高表达与肿瘤大小(>5 cm)、分化程度(差)、T分期(T_(3)~T_(4))、淋巴结转移(N^(+))、远处转移(M^(+))及临床分期(Ⅲ~Ⅳ期)显著相关,与性别、年龄、血管侵袭无显著相关性。此外,pvt1高表达与DST患者1、3、5年总体生存率低,及预后差显著相关[HR=1.96,95%CI(1.70,2.26),P1]。亚组分析结果显示,pvt1高表达分别与胃癌、结直肠癌、胰腺癌和肝癌的预后差显著相关。结论当前证据表明,pvt1高表达与DST患者的部分临床特征(肿瘤>5 cm、分化差、T_(3)~T_(4)期、淋巴结转移、远处转移及临床Ⅲ~Ⅳ期),及大部分患者(胃癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌)预后不良显著相关。

关键词： pvt1 消化系统肿瘤预后系统评价 Meta分析病例-对照研究

胃癌组织中pvt1基因水平与胃癌细胞生物学行为及化疗药物对胃癌组织抑制率的关系

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实用癌症杂志 2023年第9期38卷 1433-1436页

作者：乔超锋靳磊宁涛杜信冈河南省焦作市第二人民医院 454000

目的研究胃癌肿瘤组织中pvt1基因水平与胃癌细胞生物学行为及化疗药物对胃癌组织抑制率的关系。方法采取前瞻性研究,以120例胃癌患者作为研究对象,分析癌症组织以及癌旁组织的pvt1水平,分析不同TNM分期、分化程度、抑癌率、生物学行为... 详细信息

目的研究胃癌肿瘤组织中pvt1基因水平与胃癌细胞生物学行为及化疗药物对胃癌组织抑制率的关系。方法采取前瞻性研究,以120例胃癌患者作为研究对象,分析癌症组织以及癌旁组织的pvt1水平,分析不同TNM分期、分化程度、抑癌率、生物学行为患者的癌症组织pvt1水平之间的差异。结果癌症组织的pvt1水平显著高于癌旁组织(t=126.112,P=0.000)。Ⅰ~Ⅱ期的pvt1水平显著低于Ⅲ~Ⅳ期患者(t=4.919,P=0.000);不同分化程度患者的癌症组织pvt1水平之间的差异存在统计学意义(F=11.023,P=0.000);不同深肌层浸润、脉管浸润、侵犯转移患者的pvt1水平差异显著(t=10.986,10.462,3.174,P=0.000)。不同抑癌率患者的pvt1水平之间的差异存在统计学意义(F=15.381,P=0.000)。结论胃癌肿瘤组织中pvt1基因水平与化疗药物对胃癌组织的抑制率及与胃癌细胞生物学行为均呈现显著的相关性,可作为日后治疗的重要靶点。

关键词：胃癌 pvt1 抑制率生物学行为

异常表达的pvt1作为诊断标志物预测重症肺炎合并呼吸衰竭患儿临床结局的研究

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东南大学学报（医学版） 2022年第1期41卷 63-69页

作者：张敏郑贵兰曹县人民医院普儿科山东菏泽274400

目的:探讨lncRNA pvt1在重症肺炎合并呼吸衰竭患儿中的表达情况,进一步评估pvt1对疾病的诊断及预后价值。方法:采用实时荧光定量PCR技术对82例受试者进行血清pvt1表达水平的检测;采用Pearson相关系数法评估pvt1水平与miR-16-5p水平以及... 详细信息

目的:探讨lncRNA pvt1在重症肺炎合并呼吸衰竭患儿中的表达情况,进一步评估pvt1对疾病的诊断及预后价值。方法:采用实时荧光定量PCR技术对82例受试者进行血清pvt1表达水平的检测;采用Pearson相关系数法评估pvt1水平与miR-16-5p水平以及患儿临床病理指标的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线用来评估pvt1、miR-16-5p以及二者联合对重症肺炎合并呼吸衰竭的诊断价值。利用Kaplan-Meier生存曲线和多因素Cox回归分析评估pvt1对重症肺炎合并呼吸衰竭的预后价值。荧光素酶报告基因实验用来确认pvt1与miR-16-5p的3′-非翻译区(3′-UTR)的相互作用。结果:与健康对照组相比,疾病组血清pvt1的表达水平出现显著上调趋势,而miR-16-5p的表达则明显降低;血清miR-16-5p的表达水平与pvt1的水平呈显著负相关性;ROC曲线表明pvt1、miR-16-5p及二者联合均显示出对疾病诊断的临床价值;生存分析表明pvt1高表达的患儿出现死亡事件的概率显著高于pvt1低表达患儿;荧光素酶报告基因实验显示pvt1直接靶向miR-16-5p。结论:高表达的pvt1是重症肺炎合并呼吸衰竭的良好的诊断标志物,并且与疾病最终的不良预后息息相关。

关键词：重症肺炎呼吸衰竭 pvt1 miR-16-5p 诊断预后

LncRNA pvt1对EIF4A1的表达调控作用及机制研究

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农垦医学 2023年第2期45卷 106-111页

作者：金迅郭婷婷孙建伟卢雨林王丹君肖冰琪杜诗尧李冬妹石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室/医学院生化教研室新疆石河子832002

目的:探讨长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(Plasmacytoma Variant Translocation 1,pvt1)对真核翻译起始因子4A1(Eukaryotic Translation Initiation Factor 4A1,EIF4A1)可能的表达调控作用及机制。方法:通过对MGC-803细胞pvt1基因的表达进行干扰,对其干扰效果进行了鉴定,然后利用real time-PCR和Western Blot技术对EIF4A1基因mRNA、蛋白水平进行了测定;利用LncBase Predicted v.2预测pvt1作为分子海绵在分子上吸附的miRNA;然后用TargetScan和miRTarBase对调控EIF4A1表达的miRNA进行预测,结合两者结果得出中介miRNA;进一步通过LncBase Predicted v.2寻找pvt1与候选miRNA结合位点,并通过GEO数据库说明候选miRNA在胃癌中的表达情况;最后从干扰pvt1表达的细胞中通过real time-PCR技术测定候选miRNA的水平。结果:在胃癌细胞MGC-803中成功抑制了pvt1表达。在pvt1表达下调的胃癌细胞中EIF4A1的mRNA和蛋白质的表达水平均下调(Ppvt1可能结合吸附的miRNA;TargetScan和miRTarBase数据库预测出12个可能调控EIF4A1的miRNA;两者结果取交集,发现miR-493-3p可能为pvt1吸附降低的miRNA,且miR-493-3p可能下调EIF4A1的水平;通过LncBase Predicted v.2预测出pvt1与miR-493-3p的结合位点位于染色体的8:128048475-128048492;通过GEO数据库发现miR-493-3p在胃癌组织中处于表达下调状态。Real-time PCR结果显示pvt1水平降低后miR-493-3p水平有所增加(Ppvt1可通过吸附降低miR-493-3p水平而正向调控EIF4A1的表达,miR-493-3p是pvt1调节EIF4A1表达的关键中间分子,为pvt1在胃癌中的作用机制提供线索。

关键词：胃癌 pvt1 EIF4A1 miR-493-3p

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宫颈癌组织pvt1表达及其作用

中华肿瘤防治杂志 2020年第14期27卷 1145-1150,1165页

作者：王速捷刘俊许波董玉金淄博市中心医院放疗科山东淄博255020

目的中晚期宫颈癌患者因缺乏有效的治疗靶点而疗效较差,需从更深入的研究宫颈癌发病机制中寻找治疗靶点。有研究发现长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,pvt1)在... 详细信息

目的中晚期宫颈癌患者因缺乏有效的治疗靶点而疗效较差,需从更深入的研究宫颈癌发病机制中寻找治疗靶点。有研究发现长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,pvt1)在胃癌、卵巢癌等多种恶性肿瘤中高表达并参与肿瘤进程,起着类似癌基因的作用。本研究拟检测LncRNA pvt1在宫颈癌组织及细胞系中的表达,并观察其对宫颈癌细胞增殖的影响。方法选取2015-08-30-2017-04-30在淄博市中心医院行手术切除的30例宫颈癌及相应癌旁新鲜组织(距癌组织>2cm)。采用RT-PCR检测癌及癌旁组织pvt1表达,并同时检测宫颈癌HeLa及SiHa细胞系中pvt1表达;参考pvt1基因序列设计2个pvt1 siRNA序列:si-pvt1-1、si-pvt1-2,及无关序列对照siRNA(NC-siRNA)。利用Lipofectamine 2000转染试剂盒将si-pvt1-1、si-pvt1-2、NC-siRNA序列分别转染宫颈癌HeLa及SiHa细胞株。分别采用CCK-8实验及集落形成实验检测下调pvt1表达后宫颈癌HeLa及SiHa细胞的增殖能力变化;Transwell小室检测迁移和侵袭能力。结果 pvt1在30例宫颈癌组织和HeLa及SiHa细胞系中表达上调。与癌旁组织(0.062±0.015)相比,宫颈癌组织中pvt1(0.115±0.031)的表达上调,差异有统计学意义,t=3.92,Ppvt1的相对表达量高于正常宫颈Ect1/E6E7细胞。转染pvt1siRNA后,宫颈癌HeLa及SiHa细胞的pvt1表达被抑制。CCK-8法显示与转染NC-siRNA序列组比较,宫颈癌细胞HeLa及SiHa转染pvt1 siRNA后增殖能力降低,F=112.608,P1。转染si-pvt1-1(44.23±0.52)和NC-siRNA序列(115.38±1.21)的宫颈癌HeLa细胞集落形成数差异有统计学意义,F=126.328,P1;转染si-pvt1-1(48.03±0.65)和NC-siRNA序列(121.15±1.51)的宫颈癌SiHa细胞集落形成数差异有统计学意义,F=118.245,P1。Transwell检测结果示,和NC-siRNA组相比较si-pvt1-1组HeLa细胞迁移能力降低为0.50±0.03,侵袭能力降低为0.55±0.08,F=29.412,P1;而si-pvt1-1组SiHa细胞迁移能力、侵袭能力分别降低至0.57±0.06和0.50±0.06,F=31.326,P1。提示siRNA下调pvt1表达后HeLa及SiHa细胞株增殖、迁移和侵袭能力均降低。结论 pvt1在宫颈癌发挥类似癌基因作用,这可能为宫颈癌提供新的治疗靶点。

关键词： LncRNA pvt1 siRNA RT-PCR 宫颈癌

Hsa_circ_pvt1在肝细胞癌中的表达及意义

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解放军医学杂志 2018年第3期43卷 211-216页

作者：朱元鑫付航玮林夏蓝翔马钰李光耀董睿王宇洲陈平陆军军医大学大坪医院野战外科研究所肝胆外科重庆400042

目的探讨人肝细胞癌(HCC)中circ-PV T1的表达及其对肝癌细胞增殖的影响,并探讨其临床意义。方法利用RT-qPCR技术检测46例人肝癌组织/癌旁组织中circ-pvt1的表达水平,并且分析病理指标与其表达水平的关系;体外培养人正常肝细胞系(L02)、... 详细信息

目的探讨人肝细胞癌(HCC)中circ-PV T1的表达及其对肝癌细胞增殖的影响,并探讨其临床意义。方法利用RT-qPCR技术检测46例人肝癌组织/癌旁组织中circ-pvt1的表达水平,并且分析病理指标与其表达水平的关系;体外培养人正常肝细胞系(L02)、人肝癌细胞系(HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L、HCC-LM3),利用RT-qPCR技术检测circ-pvt1的表达水平。利用脂质体转染技术体外转染si-circ pvt1,敲低circ-pvt1在HepG2、SMMC-7721细胞系中的表达量,同时设置阴性对照组,通过CCK-8实验、EdU实验检测干扰circ-pvt1表达对肝癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术观察干扰circ-pvt1表达对肝癌细胞周期的影响。结果 circ-pvt1在人肝癌组织中表达量明显高于癌旁组织(P1),且其表达水平与肿瘤大小、TNM分期及分化程度相关;同样,肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L、HCC-LM3中circ-PV T1表达水平也明显高于正常肝细胞系L02(Ppvt1干扰组HepG2及SMMC7721的增殖能力明显降低。结论在人HCC的诊断中,circ-pvt1可能作为一种潜在的生物标志物予以应用,并且可能成为一种新型的增殖因子。

关键词：肝细胞癌环状RNA pvt1 细胞增殖细胞周期

pvt1通过调节miR-486-3p/MAPK14轴降低食管癌细胞的化学敏感性

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中国免疫学杂志 2021年第24期37卷 2999-3004页

作者：卢万里金哲段东奎王铮裴书飞南阳市中心医院胸外科南阳473000 南阳市中心医院消化科南阳473000

目的:探讨长链非编码RNA pvt1通过调节miR-486-3p/MAPK14轴降低食管癌细胞化学敏感性的相关机制。方法:qRT-PCR检测永生化人食管上皮细胞系和食管癌细胞系中pvt1、miR-486-3p、MAPK14的相对表达水平;生物信息学预测pvt1、miR-486-3p的... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA pvt1通过调节miR-486-3p/MAPK14轴降低食管癌细胞化学敏感性的相关机制。方法:qRT-PCR检测永生化人食管上皮细胞系和食管癌细胞系中pvt1、miR-486-3p、MAPK14的相对表达水平;生物信息学预测pvt1、miR-486-3p的靶向关系,并以荧光素酶报告实验验证靶向关系;构建pvt1、miR-486-3p、MAPK14过表达和pvt1敲除耐顺铂食管癌细胞系Eca-109/DDP,DDP处理后,比较各组Eca-109/DDP中的半抑制浓度(IC50)、细胞存活率、细胞凋亡率,并检测细胞凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)、耐药蛋白(MRP1、P-gp)表达情况。结果:pvt1、MAPK14在食管癌细胞中高表达,miR-486-3p低表达(Ppvt1靶向抑制miR-486-3p表达,过表达pvt1后Eca-109/DDP细胞的IC50、细胞增殖率,MRP1、P-gp、Bcl-2表达水平显著升高(Ppvt1后Eca-109/DDP细胞的IC50、细胞增殖率、MAPK14表达水平显著降低(P14后能够恢复上述表型。结论:pvt1可能通过靶向抑制miR-486-3p表达,促进MAPK14表达诱导耐药蛋白上调表达,降低食管癌细胞的化学敏感性。

关键词：食管鳞状细胞癌 pvt1 miR-486-3p MAPK14 顺铂敏感性