检索结果-南通市图书馆

检索条件"主题词=PTPRR基因"

共 3 条记录，以下是1-10 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

慢病毒介导的ptprr基因过表达和沉默小鼠模型与抑郁发生的关系研究

慢病毒介导的PTPRR基因过表达和沉默小鼠模型与抑郁发生的关系研究

引用

作者：李伟山西医科大学

学位级别：硕士

目的:通过体外包装高滴度ptprr基因过表达和ptprrsh RNA慢病毒颗粒,将病毒颗粒经小鼠脑立体定位术注入小鼠海马区,构造ptprr基因过表达和沉默小鼠模型,比较基因过表达及基因沉默小鼠在悬尾实验、糖水实验、强迫游泳实验中抑郁相关的行... 详细信息

目的:通过体外包装高滴度ptprr基因过表达和ptprrsh RNA慢病毒颗粒,将病毒颗粒经小鼠脑立体定位术注入小鼠海马区,构造ptprr基因过表达和沉默小鼠模型,比较基因过表达及基因沉默小鼠在悬尾实验、糖水实验、强迫游泳实验中抑郁相关的行为变化,进一步联合慢性不可预知刺激(CMS)方法观察小鼠抑郁行为的改变,初步探讨动物模型中ptprr基因与抑郁发生的关系。方法:1.首先将已构建成功的ptprr基因过表达载体及空白对照载体GFP、ptprrsh RNA载体及空白对照载体sh GFP,转染至293T细胞进行包装,浓缩产生适用于体外实验的高滴度病毒颗粒。2.采用脑立体定位技术在小鼠海马区微量注射慢病毒颗粒,从而引起小鼠海马区ptprr基因过表达及基因沉默,实验28天后取新鲜海马组织,采用Western-blot、RT-PCR的方法分别检测小鼠海马区ptprr蛋白及ptprrm RNA表达改变。3.80只C57BL/6J小鼠随机分为10组,每组8只,分别为:①Lenti-sh ptprr(ptprr基因沉默)组;②lenti-sh GFP(低表达空载体)组;③Lenti-ptprr(ptprr基因过表达)组;④lenti-GFP(高表达空载体)组;⑤control(正常对照)组;⑥Lenti-sh ptprr+CMS(ptprr基因沉默干预)组;⑦lenti-sh GFP+CMS(空载体干预)组;⑧Lenti-ptprr+CMS(ptprr基因过表达干预)组;⑨lenti-GFP+CMS(高表达空载体干预)组;⑩control+CMS(正常对照干预)组。小鼠术后1周,第⑥-⑩组进行CMS干预21天后,观察比较各组小鼠抑郁行为的变化。结果:1.成功建立具有特异性的ptprr高表达及ptprrsh RNA病毒包装颗粒,病毒滴度达到1x109TU。2.注射病毒28天后发现,Lenti-ptprr组小鼠海马组织ptprrm RNA及蛋白水平与control组和Lenti-GFP组明显增高(Pptprrsh RNA组小鼠海马组织ptprrm RNA及蛋白水平较control组和Lenti-sh GFP组明显降低(Pptprrm RNA及蛋白水平无显著性差异(P>0.05)。3.在强迫游泳实中,各组间不动时间具有显著差异(F=28.823),Lenti-GFP组和control组两组间T检验无显著性差异;Lenti-sh GFP组和control组两组间T检验无显著性差异(P>0.05);Lenti-ptprr组分别与Lenti-GFP组进行T检验,小鼠不动时间明显延长(pptprr组与Lenti-sh GFP进行T检验,强迫游泳不动时间无显著性改变(P>0.05);Lenti-ptprr+CMS组与control+CMS组小鼠进行T检验,强迫游泳时间明显延长(Pptprr+CMS组与control+CMS组小鼠进行T检验,强迫游泳时间明显减少(P0.05);Lenti-ptprr组分别与Lenti-GFP组进行T检验,小鼠不动时间无明显差异(p>0.05);Lenti-sh ptprr组与Lenti-sh GFP进行T检验,不动时间明显减少(Pptprr+CMS组与control+CMS组小鼠进行T检验,不动时间无明显改变(p>0.05);Lenti-sh ptprr+CMS组与control+CMS组小鼠进行T检验,强迫游泳时间明显减少(P0.05);Lenti-ptprr组分别与Lenti-GFP组进行T检验,小鼠糖水消耗率存在明显降低,存在统计学差异(pptprr组与Lenti-sh GFP进行T检验,糖水消耗率未有明显改变,无统计差异(P>0.05);Lenti-ptprr+CMS组与control+CMS组小鼠进行T检验,糖水消耗明显降低,存在统计差异(pptprr+CMS组与control+CMS组小鼠进行T检验,糖水消耗明显降低,统计具有差异(Pptprr过表达

关键词：慢病毒载体抑郁症 ptprr基因神经可塑性

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

去甲斑蝥素的抗狂犬病毒活性及作用机制研究

去甲斑蝥素的抗狂犬病毒活性及作用机制研究

引用

作者：徐瑞贤昆明理工大学

学位级别：硕士

狂犬病毒(RABV)是引起狂犬病的主要原因,一旦发病致死率几乎100%。目前预防狂犬病最有效的方法是注射疫苗,深入研究RABV发病机制,探寻有效治疗方法及新型特效药物分子仍是亟待解决的重要课题。去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)是一种从... 详细信息

狂犬病毒(RABV)是引起狂犬病的主要原因,一旦发病致死率几乎100%。目前预防狂犬病最有效的方法是注射疫苗,深入研究RABV发病机制,探寻有效治疗方法及新型特效药物分子仍是亟待解决的重要课题。去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)是一种从传统中药斑蝥体内分离出的多功能衍化物,它含有多种抗肿瘤活性,能够诱发癌细胞凋亡,抑制细胞迁移和肿瘤血管形成,可用于各种癌症治疗,还能够通过改善脑组织中的炎性损伤,有效地保护脑组织功能。本课题通过现代生物学手段(动物实验和细胞实验),系统验证古典名方中药材斑蝥的主要作用成份斑蝥素衍生物NCTD的抗狂犬病有效性。通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法对NCTD进行细胞毒性检测,并利用450 nm处吸光度值来评估其毒性浓度,以期获得更准确的结果。将NCTD以不同浓度梯度加入Vero细胞中,通过TCID测定、Western blot分析等技术对细胞上清中感染性RABV粒子的含量变化,细胞内病毒核蛋白、磷蛋白的表达情况进行分析。用滴鼻法建立小鼠狂犬病模型;而后开展NCTD对RABV攻毒小鼠模型的保护实验,每天观察小鼠的生存状态及体重变化,评价NCTD对RABV感染小鼠的保护情况;本课题进一步对NCTD处理的RABV感染细胞开展转录组学研究,使用DEseq2方法进行差异分析,以上调或下调2倍作为差异显著的评估标准,利用MA plot、Volcano plot和Scatter plot等技术,对每组DEG进行表达量热图绘制,并结合Gene Ontology(GO)功能分类和富集分析,以深入了解差异表达的基因;提取NCTD处理组与对照组的细胞RNA,并反转录为c DNA,以GAPDH作为内参,选择差异基因中较为典型的基因进行qPCR验证;对qPCR验证效果较好的差异基因ptprr开展功能研究,设计构建其慢病毒介导的RNA干扰载体,并包装慢病毒,通过嘌呤霉素筛选ptprr基因敲低的Vero细胞系,检测病毒在感染24 h、48 h和72 h后的增殖情况。检测指标包括TCID法测定培养上清中的病毒滴度、绝对定量RT-qPCR测定培养上清中的病毒基因组拷贝数、相对定量RT-qPCR法测定细胞中病毒基因的转录本以及Western blot鉴定ptprr蛋白及病毒蛋白的表达情况。通过以上实验的开展,本课题成功得出以下结论:(1)NCTD的体外抗RABV活性实验发现,它在病毒感染细胞后可以明显抑制RABV,病毒蛋白表达抑制程度与药物呈浓度梯度依赖效应;体内抗RABV活性实验发现,0.35 mg/kg剂量的NCTD具有一定抑制RABV功能,给药小鼠生存期有所延长,相比之下,体重下降速度也较为缓慢。(2)通过筛选NCTD处理Vero细胞的差异表达基因,发现39个显著上调表达的差异基因和61个显著下调的差异基因,并进行实时荧光定量PCR验证,结果表明qPCR验证差异基因的变化与转录组学结果存在较好的一致性,转录组学数据有较高的可信度。(3)利用慢病毒介导的RNA干扰技术构建了ptprr基因的低表达细胞系,通过免疫荧光实验、Western blot检测、RT-qPCR等方法进行RABV的相对定量检测,结果显示,NCTD的作用能够促进宿主因子ptprr蛋白表达,ptprr的表达水平与NCTD浓度呈梯度依赖关系,且ptprr在RABV增殖过程中发挥着一定作用。(4)该研究结果揭示NCTD具有一定的抗RABV效果,且宿主因子ptprr在RABV感染中扮演着一定的角色,为RABV发病机制研究和新药开发提供有益参考。

关键词：狂犬病毒去甲斑蝥素抗病毒转录组 ptprr基因

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

重性抑郁障碍全基因组关联研究相关基因的再分析及其联合作用模式研究

重性抑郁障碍全基因组关联研究相关基因的再分析及其联合作用模式...

引用

作者：石翠娟北京协和医学院

学位级别：硕士

重性抑郁障碍(Major depressive disorder, MDD)是一种常见的慢性复发性精神疾病,具有终生高患病率、高复发率、高自杀率和高疾病负担等特点。尽管大量的家系研究、双生子和寄养子研究表明MDD是一种遗传性疾病,但是基于以往多种假说的... 详细信息

重性抑郁障碍(Major depressive disorder, MDD)是一种常见的慢性复发性精神疾病,具有终生高患病率、高复发率、高自杀率和高疾病负担等特点。尽管大量的家系研究、双生子和寄养子研究表明MDD是一种遗传性疾病,但是基于以往多种假说的研究均难以完企阐明具体发病机制。近年来兴起的全基因组关联研究(Genome-wide association study, GWAS)方法,由于是从全基因组水平来探寻复杂疾病的发病机理而不需基于任何的疾病发生假说,已成功新发现了一些与人类复杂性疾病或性状相关联的遗传变异,为进一步探索人类复杂性疾病发生机制提供了线索。自2008年以来有关MDD的GWAS研究也相继见报。由于日前对于MDD的GWAS研究主要集中于欧洲人群,而不同人群可能具有不同的等位基因频率及不同的连锁不平衡区域,因此,MDD的GWAS的研究结果有必要在中国人群中进行再分析。另外,由于MDD是一种多基因复杂疾病,其发病可能涉及基因-基因相互作用、基因内部位点间的相互作用、基因-环境相互作用等因素,因此在结果分析时应对多因素相互作用的现象予以关注。本课题组前期工作已系统地对GWAS研究提示的阳性基因在中国汉族人群中进行验证。在543例MDD患者和524例正常对照中分析了16个GWAS研究提示的阳性基因,发现EHD3、FREM3和ptprr三个基因与MDD相关。基于前期的工作基础,本研究在519例MDD患者和468例对照中,对EHD3、FREM3和ptprr基因进行全基因覆盖的系统筛查,分析这些基因以及基因间或位点间的相互作用与疾病发生的关系。同时,对517例患者进行了汉密顿抑郁量表和汉密顿焦虑量表的评定,然后对47例患者进行了认知功能的评定,研究基因与MDD临床症状和内表型的关系。结果显示,ptprr基因的rs1513105与MDD显著相关,其C等位基因(p=0.0027)和C/C基因型(p=0.01)可以提高MDD的易感性。以性别分层后,rs1513105在女性样本中也显示出与MDD相关,其C等位基因(p=0.00044)和C/C基因型(p=0.0036)可以显著提高MDD的易感性,而在男性样本中却不存在这种相关性;EHD3基因的rs619002和rs644926也显示出这种性别特异性效应,其仅在女性样本中与MDD相关。基因-基因相互作用分析显示,EHD3基因的两个阳性SNPs位点rs619002和rs644926分别与FREM3基因的5个SNPS位点的组合均与疾病显著相关,其中,以rs619002(EHD3)-rs1112714(FREM3)(p=0.0059)组合和rs644926(EHD3)-rs13130123(FREM3)(P=0.007)组合最为显著,其rs619002(G)-rs1112714(T)（p=4.02×10-6)组合和rs644926(A)-rs11938298(G)(p=3.85×10-6)组合显著降低疾病发生的风险。进一步分析发现,在携带rs619002-G等位基因和携带rs644926-A等位基因的样本中,FREM3基因的5个SNPs位点的基因型频率在患者和对照间均有显著性差异,其中以rs11938298最为显著(rs619002-rs11938298：p=0.00049;rs644926-rs11938298：p=0.0001);而在携带rs619002-A/A基因型和rs644926-G/G基因型的样本中,FREM3基因的5个SNPs位点的基因型频率在患者和对照间不存在显著差异。同样,在分析MDD的临床表型时也发现相同的效应.这些结果提示EHD3基因的rs619002和rs644926与FREM3基因的5个SNPs位点在疾病与入睡困难表型的发生过程中存在上位效应。 MDD内表型分析显示,EHD3基因的rs3769621与MDD患者操作能力和记忆功能障碍显著相关;FREM3基因的rs1553067与MDD患者言语能力障碍显著相关：ptprr基因的rs2203231与MDD患者记忆功能障碍显著相关。本研究在遗传学层面发现,EHD3对FREM3基因的上位效应可能在MDD及其入睡困难症状临床表型的发生过程中具有重要作用;ptprr基因可能在MDD的发生过程中具有性别特异的作用：这三个基因可能也与MDD的操作能力、言语能力以及记忆功能障碍相关联。

关键词：全基因组关联研究重性抑郁障碍单核苷酸多态性 EHD3基因 FREM3基因 ptprr基因上位效应性别特异性效应

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共1页 << < 1 > >>

回到顶部

执行限定条件

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：