检索结果-南通市图书馆

中国畜牧兽医 2024年第4期51卷 1339-1348页

作者：黄巧艳李伟王鑫昆邢凤塔里木大学动物科学学院阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300

【目的】克隆多浪羊促动力素受体2(prokineticin receptor 2,prokr2)基因,并检测初情期启动过程中prokr 2基因在多浪羊不同组织中的表达水平,为探究prokr 2基因在绵羊初情期启动过程中的作用提供依据。【方法】以初情期后多浪羊下丘脑c... 详细信息

【目的】克隆多浪羊促动力素受体2(prokineticin receptor 2,prokr2)基因,并检测初情期启动过程中prokr 2基因在多浪羊不同组织中的表达水平,为探究prokr 2基因在绵羊初情期启动过程中的作用提供依据。【方法】以初情期后多浪羊下丘脑cDNA为模板,PCR扩增prokr 2基因并克隆测序。利用DNAMAN软件对测序结果进行拼接,采用MegAlign软件进行物种间相似性比对并构建系统进化树,并利用生物信息学软件预测多浪羊prokr2蛋白理化性质和结构功能。使用实时荧光定量PCR技术检测prokr 2基因在多浪羊下丘脑、垂体、卵巢、输卵管及子宫中初情期前、初情期及初情期后的表达水平。【结果】克隆获得prokr 2基因序列大小为2641 bp,包括5′-UTR 143 bp、3′-UTR 1343 bp和CDS区1155 bp,编码384个氨基酸,与GenBank中绵羊预测mRNA序列(登录号:XM_004014342.5)相似性为99.83%。系统进化树表明,多浪羊prokr 2基因的遗传距离与山羊最近,与鸡最远。生物信息学分析表明,prokr2蛋白为疏水稳定碱性蛋白,有7个跨膜结构,属于跨膜蛋白,存在31个磷酸化位点,主要在质膜上发挥作用。多浪羊prokr2蛋白与GnRH1、PROK1、ANOS1等蛋白存在相互作用关系。实时荧光定量PCR结果显示,在多浪羊下丘脑各时期中prokr 2基因表达量均显著高于其他组织(Pprokr 2基因表达量无显著变化(P>0.05);子宫中prokr 2基因在初情期前的表达量显著高于初情期和初情期后(Pprokr 2基因在初情期的表达量显著高于初情期前和初情期后(Pprokr 2基因CDS区序列,prokr2蛋白属于疏水稳定碱性蛋白,含有7个跨膜结构,主要在下丘脑中表达,且在卵巢和输卵管中的总趋势为先升后降。研究结果可为进一步探究prokr 2基因在绵羊初情期启动过程中的调控作用提供参考。

关键词：多浪羊 prokr 2基因克隆初情期表达

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