检索结果-南通市图书馆

作者：李炽湖南师范大学

学位级别：硕士

蛋白质的磷酸化与去磷酸化过程是生物体内一种普遍存在的调节方式,几乎涉及所有的生理及病理过程,并且在细胞信号的传递过程中占有极其重要的位置。蛋白质的磷酸化和去磷酸化反应分别由蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化。蛋白激酶由一个庞大的... 详细信息

蛋白质的磷酸化与去磷酸化过程是生物体内一种普遍存在的调节方式,几乎涉及所有的生理及病理过程,并且在细胞信号的传递过程中占有极其重要的位置。蛋白质的磷酸化和去磷酸化反应分别由蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化。蛋白激酶由一个庞大的并且功能极其多样的基因家族所构成,相比之下,蛋白磷酸酶则有着较少的数量和种类。蛋白磷酸酶1(pp1)的催化亚基能与大于150种的调节亚基形成复合物,这种复合物的构造使得pp1c转变成很多不同的形态,从而具有底物特异性、独特的亚细胞定位和特异性的调节功能。这使得大量的依靠ppl的细胞功能通过独立的机制得到控制。我们以H1299为实验材料,通过运用脂质体转染的方法,建立了H1299-pCI-neo、H1299-pCI-pp1α、H1299-pLKO.1和H1299-pLKO.1-pp1α等稳定表达细胞株,通过Western Blot的方法鉴定和检测了pp1α和pp1γ的相对表达情况,我们发现：当过表达pp1α时,H1299细胞中的pp1γ的表达量出现了明显的下调,而当靶向沉默pp1α时,H1299细胞中的pp1γ表达水平则出现了明显的上调,并且,pp1β和pp1γ的表达似乎维持着总量的平衡,二者呈现出拮抗表达的关系。通过RT-PCR,我们验证了在mRNA水平也同样存在着这种关系,这说明pp1α和pp1γ拮抗表达的关系在mRNA水平就受到了严格地调控。我们还通过细胞增殖实验和裸鼠荷瘤实验,对H1299、H1299-pCI-neo、H1299-pCI-pp1α三种稳定细胞株进行了鉴定,发现过表达pp1α能明显的延缓细胞周期并抑制肿瘤细胞的生长,同时,我们也通过Western Blot检测了几种基本的周期蛋白的表达,发现CyclinA/B/E与pp1α的表达具有协同效应,而其具体的作用机制有待进一步研究验证。综上,我们可以得出以下结论：在H1299细胞中,过表达pp1α后pp1γ的表达明显下调,相反靶向沉默pp1α则pp1γ的表达明显上调,二者的表达具有拮抗关系,并维持着总量的稳定。同时过表达pp1α能够阻抑H1299细胞的生长周期的进行,具有良好的抑瘤作用效果。

关键词： pp1α pp1γ H1299 表达水平细胞周期

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Angiotensin IV upregulates the activity of protein phosphatase 1α in Neura-2A cells

引用

Protein & Cell 2013年第7期4卷 520-528页

作者： Dan Wang Peng Xue Xiu Lan Chen Zhen Sheng Xie Fu Quan Yang Li Zheng Tao Xu National Key Laboratory of Biomacromolecules Institute of BiophysicsChinese Academy of SciencesBeijing 100101China University of Chinese Academy of Science Beijing 100049China

The peptide angiotensin IV(Ang IV)is a derivative of angiotensin *** insulin regulated amino peptidase(IRAP)has been proposed as a potential receptor for Ang IV,the signalling pathways of Ang IV through IRAP remain *** applied high-resolution mass spectrometry to perform a systemic quantitative phosphoproteome of Neura-2A(N2A)cells treated with and without Ang IV us-ing sta ble-isotope labeling by amino acids in cell culture(SILAC),and identifi ed a reduction in the phosphorylation of a major Ser/Thr protein phosphorylase 1(pp1)upon Ang IV *** addition,spinophilin(spn),a pp1 reg-ulatory protein that plays important functions in the neural system,was expressed at higher *** revealed decreased phosphorylation of p70S6 kinase(p70S6K)and the major cell cycle modulator retinoblas-toma protein(pRB).These changes are consistent with an observed decrease in cell *** together,our study suggests that Ang IV functions via regulating the activity of pp1.

关键词： angiotensin IV pp1α cell proliferation p70S6 kinase spinophilin

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：