检索结果-南通市图书馆

pkcα/Ca_V1.2在有氧运动改善高血压肠系膜动脉功能中的作用

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

体育科学 2019年第11期39卷 57-66页

作者：单美玲陈渝张严焱周杨吴迎李丽石丽君北京体育大学运动生理教研室北京100084 北京体育大学运动与体质健康教育部重点实验室北京100084

目的:探究蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,pkcα)与L型电压门控钙离子通道(voltage-gated L-type Ca^2+channel,CaV1.2)之间的关系,以及pkcα/CaV1.2信号通路在有氧运动改善自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)肠系膜动脉功能中的作用。方法:12周龄雄性SHR和正常血压大鼠(Wistar-Kyoto,WKY)随机分为有氧运动组(SHR-EX、WKY-EX)和安静对照组(SHR-SED、WKY-SED),运动组进行12周中等强度的跑台运动。12周后,取各组肠系膜动脉,采用离体微血管环张力测定血管收缩特性变化及pkcα/CaV1.2信号通路在血管张力调节中的作用;酶消化急性分离肠系膜动脉平滑肌细胞,膜片钳全细胞模式记录CaV1.2通道电流及pkcα对CaV1.2通道电流的影响;免疫荧光观察平滑肌细胞pkcα、CaV1.2通道α1C亚基表达、分布及二者共定位分析。结果:1)有氧运动可显著降低高血压大鼠体重、心率和血压(Ppkcα抑制剂Gö6976可诱使血管舒张,SHR-SED组对Gö6976的敏感性显著高于WKY-SED组(P0.05);4)pkc激动剂PDBu可诱导血管张力呈浓度依赖性增加,而预先孵育Gö6976抑制pkcα作用后,PDBu诱发的各组肠系膜动脉收缩反应降低。同时,与其各自的安静对照组相比,WKY-EX组、SHR-EX组对PDBu诱发的收缩反应均无显著性差异(P>0.05),加入Nifedipine后各组血管舒张程度也变小,运动组与其安静组相比,其血管张力变化均无显著性差异(P>0.05);5)Gö6976可诱使各组CaV1.2通道电流幅值减小。其中,与WKY-SED组相比,SHR-SED组CaV1.2通道电流降低幅度显著增高(P0.05);6)免疫荧光结果显示,高血压时pkcα信号表达及其与CaV1.2通道α1C亚基共定位比率显著上调,而有氧运动有效地抑制了其上调(Ppkcα表达上调,从而调节CaV1.2通道功能,改善高血压,即有氧运动可通过抑制pkcα/CaV1.2信号通路表达上调来改善高血压大鼠肠系膜动脉舒缩功能。

关键词：有氧运动 CaV1.2通道 pkcα 肠系膜动脉高血压

pkcα反义RNA对乳腺癌细胞增殖及cyclinD1和CDK4表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

科学通报 1999年第7期44卷 739-742页

作者：桑建利王永潮北京师范大学生物系细胞增殖及调控生物学开放实验室北京100875

pkc ,cyclin和CDK基因直接参于调控细胞的增殖与分化 ,因此它们在细胞癌变中的作用已成为重要的研究课题 .利用反义RNA技术抑制pkcα基因的表达 ,然后观察分析了乳腺癌细胞增殖的变化以及对cyclinD1和CDK4基因表达的影响 .结果显示 ,PK... 详细信息

pkc ,cyclin和CDK基因直接参于调控细胞的增殖与分化 ,因此它们在细胞癌变中的作用已成为重要的研究课题 .利用反义RNA技术抑制pkcα基因的表达 ,然后观察分析了乳腺癌细胞增殖的变化以及对cyclinD1和CDK4基因表达的影响 .结果显示 ,pkcα的表达受到抑制后 ,细胞增殖速率明显减慢 ,cyclinD1与CDK4的表达水平下降 .由此表明 ,pkcα在细胞癌变中具有重要作用 ,同时还说明作为信号传导系统中的重要因子pkcα与cyclin/CDK细胞周期调控系统间在基因表达上有密切关系 .

关键词：乳腺癌 pkcα 细胞增殖 cyclinD1 CDK4 RNA

pkcα对人视网膜色素上皮细胞移行作用的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华眼视光学与视觉科学杂志 2017年第5期19卷 269-275页

作者：查屹冯旺强郑海华温州医科大学附属第二医院育英儿童医院眼科 325027

目的通过体外实验探讨蛋白激酶Cd（pkcα）对人视网膜色素上皮（RPE）细胞移行的影响。方法实验研究。培养正常人pkcα RPE细胞，将实验分为Control组、Thymeleatoxin（pkca激动剂）组、siRNA-pkcα（pkcα抑制剂）组和Nonsilencing si... 详细信息

目的通过体外实验探讨蛋白激酶Cd（pkcα）对人视网膜色素上皮（RPE）细胞移行的影响。方法实验研究。培养正常人pkcα RPE细胞，将实验分为Control组、Thymeleatoxin（pkca激动剂）组、siRNA-pkcα（pkcα抑制剂）组和Nonsilencing siRNA（Non-siRNA）组，应用RT—PCR检测RPE细胞内pkcα mRNA的表达。细胞划痕实验观察RPE细胞的移行速度，Transwell实验观察RPE细胞的跨膜细胞数，活细胞动态实验观察RPE细胞的细胞活力。组间数据比较采用独立样本t检验。结果通过光镜和免疫荧光方法计数成功培养获得RPE细胞。Thymeleatoxin组的RPE细胞内pkcα mRNA的含量明显高于Control组（t=3．712，P=-0．034），siRNA-pkcα组的pkcOtmRNA的含量明显低于Non—siRNA组（t=3．274，P=0．031）。Thymeleatoxin组RPE细胞的移行速度、跨膜细胞数、细胞活力等均明显优于Control组（t=9．743、5．616、2．300，均P〈0．05），siRNA—pkcα组的移行速度、跨膜细胞数、细胞活力等均明显弱于Non—siRNA组（t=3．643，P〈0．001；t=7．202，P=-0．002；t=2．418，P=-0．042）。结论pkcoL对人RPE细胞的移行有上调作用，提示pkcα可为增生性玻璃体视网膜病变的防治提供新的药物靶点。

关键词： pkcα 视网膜色素上皮细胞增生性玻璃体视网膜病变: 移行

Early time feed restriction inhibiting pulmonary vascular remodelling is associated with reduced pkcαexpression in broilers

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Early time feed restriction inhibiting pulmonary vascular re...

pkcα抑制剂Calphostin C抑制TNF-α诱导的骨髓间充质干细胞迁移

中国畜牧兽医学会家畜内科学分会2009年学术研讨会

作者：潘家强 Institute of Nutritional and Metabolic Disorder in Domestic Animals and Fowls Nanjing Agricultural University

Objective:The present study was conducted to investigate the effect of early feed restriction on protein kinase Cα(pkcα) expression in pulmonary arterioles,which has been revealed to promote pulmonary vascular remodelling in pulmonary hypertensive ***:A total of 270 day-old mixedsex commercial broilers were randomly distributed to a normal temperature control group(NT),a low temperature control group(LT) and low temperature plus feed restriction group(LR).The PHS incidence, the right/total ventricular weight ratio(RV/TV),the vessel wall area/vessel total area ratio(WA/TA),the mean media thickness in pulmonary arterioles(mMTPA) and the expression of pkcαin the pulmonary arterioles were measured ***:Low temperature significantly increased the PHS *** RV/TV,WA/TA and mMTPA values of group LT were significantly elevated compared to those of group NT on d 35 and *** LT chickens had increased pkcαexpression compared to their NT counterparts on d 28 and *** restriction reduced the PHS mortality,RV/TV,WA/TA and mMTPA in cold-exposed *** LR chickens had much lower pkcαexpression in pulmonary arterioles than the LT ***:Early time feed restriction inhibited pulmonary vascular remodelling in broilers, which might be partly attributed to reduced pkcαexpression in pulmonary arterioles.

关键词： Early feed restriction Pulmonary hypertension syndrome pkcα Pulmonary vascular remodelling

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

天津科技大学学报 2016年第4期31卷 15-19页

作者：宋铁峰王楠王会琴袁颖黄丽文庄春雨张同存工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院天津300457

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)可以诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的迁移,但其促进迁移机制尚不清楚.研究使用Calphostin C抑制剂来抑制pkcα的活性,从而研究TNF-α诱导MSCs迁移的作用是否通过激活... 详细信息

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)可以诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的迁移,但其促进迁移机制尚不清楚.研究使用Calphostin C抑制剂来抑制pkcα的活性,从而研究TNF-α诱导MSCs迁移的作用是否通过激活pkcα来完成.利用50,ng/m L的TNF-α处理MSCs,划痕实验和Transwell实验表明TNF-α可以诱导MSCs的迁移.加入pkcα的抑制剂Calphostin C后,可以抑制TNF-α对MSCs迁移或侵袭的诱导,并降低迁移标志基因MYL9(Myosin light chain 9,MYL9)、CYR61(Cysteine rich 61,CYR61)的表达.以上结果表明,pkcα抑制剂Calphostin C可以抑制TNF-α诱导的MSCs迁移.

关键词： MSCs 迁移 TNF-α pkcα

pkcα在TOCP抑制SK-N-SH细胞自噬中的作用及机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

PKCα在TOCP抑制SK-N-SH细胞自噬中的作用及机制研究

作者：邓强南华大学

学位级别：硕士

目的:探讨pkcα在TOCP影响SK-N-SH神经细胞自噬的作用及机制。方法:***-N-SH细胞经TOCP(0 mmol/L)染毒,通过MTT法测定该化合物对细胞增殖的影响,并利用SPSS软件算出SK-N-SH细胞暴露于TOCP(48 h)的半数抑制浓度(IC50),并确定后期实验的... 详细信息

目的:探讨pkcα在TOCP影响SK-N-SH神经细胞自噬的作用及机制。方法:***-N-SH细胞经TOCP(0 mmol/L)染毒,通过MTT法测定该化合物对细胞增殖的影响,并利用SPSS软件算出SK-N-SH细胞暴露于TOCP(48 h)的半数抑制浓度(IC50),并确定后期实验的染毒剂量。***-N-SH细胞经TOCP(0 mmol/L)染毒,通过荧光分光光度仪测定细胞内蛋白酶体活性,Western blot检测pkcα蛋白、ppkcα蛋白、自噬蛋白(P62、Beclin 1、LC3II/LC3I)、自噬受体蛋白(OPTN、NBR1)、细胞骨架蛋白(p-Tau、NF-H、MAP2)和泛素化蛋白(Ub)表达水平。使用了透射电子显微镜观察自噬体的生成情况。***-N-SH细胞经pkcα激活剂(PMA)和抑制剂(SP)预处理0.5 h后,0.75 mmol/L TOCP染毒48 h,过荧光分光光度仪测定细胞内蛋白酶体活性,Western blot检测pkcα蛋白、p-pkcα蛋白、自噬蛋白(P62、Beclin 1、LC3II/LC3I)、自噬受体蛋白(OPTN、NBR1)、细胞骨架蛋白(p-Tau、NF-H、MAP2)和泛素化蛋白(Ub)表达水平。免疫荧光法测定pkcα蛋白和自噬相关蛋白(LC3和P62)的蛋白表达水平来进一步验证WB的结果;结果:***数据表明,当SK-N-SH细胞暴露于TOCP(48 h)后,细胞生长形态发生改变以及增殖速度显著减慢。***-N-SH细胞暴露于TOCP(48 h)后,细胞内pkcα活性显著增加;用pkcα激活剂(PMA)和抑制剂(SP)预处理后再经TOCP染毒,发现激活剂能使TOCP所诱导的细胞内pkcα活性上升(Ppkcα活性下降(Ppkcα活性(p-pkcα/pkcα)、自噬蛋白(LC3Ⅱ/LC3I和P62)水平增加(Ppkcα活性(p-pkcα/pkcα)、自噬蛋白(LC3Ⅱ/LC3I和P62)水平(Ppkcα蛋白和自噬相关蛋白(LC3和P62)的蛋白表达水平进一步验证了WB的结果。***处理能使细胞中OPTN和NF-H水平下降(Ppkcα活性增加。***通过激活pkcα活性,增加自噬蛋白(LC3II/LC3I、P62)表达水平,降解OPTN,并累积了NBR1蛋白,从而抑制细胞自噬流。***通过激活pkcα活性降解骨架相关蛋白NF-H和p-Tau的累积。***通过激活pkcα使SK-N-SH细胞中蛋白酶体(Proteasome)活性降低,泛素化蛋白积聚,使泛素-蛋白酶体系统(UPS)受损,UPS功能障碍可以刺激自噬作为补偿途径。

关键词： SK-N-SH pkcα TOCP 蛋白酶体 UPS 自噬

pkcα/ERK/PPARγ/NF-κB信号通路参与冲击流作用下血管内皮损伤及其机制的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

PKCα/ERK/PPARγ/NF-κB信号通路参与冲击流作用下血管内皮损伤...

作者：幸泽龙南昌大学

学位级别：硕士

背景与目的:颅内动脉瘤的形成机制尚不明确。目前研究认为,颅内动脉瘤的形成和发展与血流动力学异常引起的血管内皮损伤及血管壁重构有关,而其中血管内皮损伤被认为是颅内动脉瘤形成的始动环节。因此深入研究血流动力学引发的血管内皮... 详细信息

背景与目的:颅内动脉瘤的形成机制尚不明确。目前研究认为,颅内动脉瘤的形成和发展与血流动力学异常引起的血管内皮损伤及血管壁重构有关,而其中血管内皮损伤被认为是颅内动脉瘤形成的始动环节。因此深入研究血流动力学引发的血管内皮损伤机制,对明确颅内动脉瘤病因极为重要。pkcα是细胞内重要的信号转导递质,与血管性疾病关系密切。研究表明,在血管内皮细胞中pkcα可以激活NF-κB引发炎症反应参与血管内皮损伤。pkcα还可以通过激活ERK来增强MMPs的表达,加速细胞外基质降解,损伤血管壁。PPARγ是一种血管保护性因子,可以通过降低血管壁炎症反应来减轻血管损伤,在抑制动脉瘤的形成和发展中起重要作用。本课题旨在探讨pkcα和PPARγ之间的相互关系,验证pkcα/ERK/PPARγ/NF-κB信号通路是否在冲击流场作用下参与血管内皮损伤。方法:本研究采用自行设计并改良的T型流室系统来模拟血管分叉处的血流动力学环境,构建血管内皮损伤模型。体外培养脐静脉内皮细胞(HUVEC)及运用RNAi pkcα重组慢病毒转染HUVEC。将上述细胞种植在载玻片上培养,在达到实验条件后置于T型流室系统内。在冲击流场下作用3h、6h后观察内皮细胞密度及形态变化,然后运用Westren Blot检测pkcα、p-pkcα、ERK、p-ERK、PPARγ、NF-κB和MMP2等蛋白的变化情况。结果:1.冲击流场作用下内皮细胞密度及形态变化情况:1区:细胞的密度及形态无明显变化,细胞仍维持融合状态;2区:在高壁面剪切力作用下,细胞的密度明显下降,细胞间间隙拉大,细胞形态多样伴拉长,随着作用时间延长(3h-6h)变化明显。3区:细胞的密度增加,连接紧密。2.冲击流场作用下内皮细胞中pkcα激活及PPARγ、NF-κB、MMP2的表达情况:冲击流场下作用6h后p-pkcα、NF-κB、MMP2表达显著增加(Ppkcα表达未见明显变化(P>0.05)。3.冲击流场作用下内皮细胞中ERK/NF-κB激活情况:冲击流场下作用6h后p-ERK、NF-κB、MMP2表达显著增加(P0.05)。4.冲击流场作用下内皮细胞中pkcα对ERK、NF-κB及MMP2的影响:在冲击流场下作用6h后,正常内皮细胞组中p-ERK、NF-κB、MMP2表达显著增加(Ppkcα敲除组内皮细胞中p-ERK、NF-κB、MMP2表达未见明显变化(P>0.05)。5.冲击流场作用下内皮细胞中PPARγ对NF-κB和MMP2的影响:在冲击流场下作用6h后,正常内皮细胞组中PPARγ表达显著减少(P0.05)。结论:在冲击流场作用下,pkcα在Ca作用下发生激活后进一步激活ERK,激活的ERK可以直接或以抑制PPARγ的间接的方式,使NF-κB和MMP2表达增加,促进血管内皮炎症和细胞外基质降解,参与血管内皮损伤。因此,我们认为pkcα/ERK/PPARγ/NF-κB信号通路激活参与冲击流作用下血管内皮损伤,该通路可能是颅内动脉瘤的形成机制之一。

关键词：血管内皮损伤 pkcα ERK PPARγ NF-κB

pkcα/HMGB1/NF-κB通路参与冲击流所致血管内皮细胞损伤的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

PKCα/HMGB1/NF-κB通路参与冲击流所致血管内皮细胞损伤的研究

作者：谈家聪南昌大学

学位级别：硕士

背景与目的:颅内动脉瘤(IA)是大脑动脉血管壁的瘤状膨出,其破裂造成的蛛网膜下腔出血往往给病人带来毁灭性的伤害。尽管在诊断及治疗方面有了很大的进步,但IA的形成机制仍然未知。近年来,研究发现血流动力学因素可以导致血管壁内炎症反... 详细信息

背景与目的:颅内动脉瘤(IA)是大脑动脉血管壁的瘤状膨出,其破裂造成的蛛网膜下腔出血往往给病人带来毁灭性的伤害。尽管在诊断及治疗方面有了很大的进步,但IA的形成机制仍然未知。近年来,研究发现血流动力学因素可以导致血管壁内炎症反应的发生、内皮受损以及管壁异常重构,这些可能与IA的形成发展密切相关。本研究通过体外实验,模拟血管内皮细胞在血管分叉处所受血流动力学应力变化,造成内皮细胞炎症及损伤的相关机制。方法:我们的研究采用课题组自行研发的改良T型流体力学系统,模拟颅内血管分叉处的血流动力学变化,筑建血管内皮细胞损伤模型。以500ml/min的流量在37℃和5%CO2的环境下冲击人脐静脉内皮细胞(HUVEC)不同时间(0.5h、1h、2h、3h、6h),观察细胞密度与形态变化,运用蛋白印迹检测p-pkcα、HMGB1和NF-κB等蛋白的表达及调控情况,q PCR检测IL-1β、IL-6、IL-8的表达变化。随后对HUVEC运用pkcα磷酸化抑制剂以及质粒敲除HMGB1,探究p-pkcα、HMGB1和NF-κB之间的调控联系。结果:冲击流作用下,区域I中的细胞在冲击作用不同时间下均保持汇合,其密度与形态未见明显变化;在区域II中,冲击流作用0.5h、1h后,细胞密度减少,间隙增大,并且随着冲击作用的时间增加(2h、3h、6h),细胞数量进行性减少,并且细胞形态呈现多样化;冲击流作用0.5h、1h后区域III中的细胞密度及形态变化不明显,而随着冲击作用时长的增加(2h、3h、6h),细胞汇集密度增加,连接紧密。蛋白印迹检测发现3个区域合集的内皮细胞在冲击流作用0.5h后激活p-pkcα、HMGB1和NF-κB的表达,并且随着冲击时间的延长(1h、2h、3h)表达量逐渐增加,在冲击3h后达最高水平(ppkcα激活后,可降低细胞内HMGB1和NF-κB的表达,抑制IL-1β、IL-6、IL-8的水平。敲低HMGB1后可使NF-κB表达下降,抑制IL-1β、IL-6、IL-8水平,但对p-pkcα影响作用有限。结论:冲击流诱导血管内皮细胞损伤模型中,随着冲击流时间的延长可见高壁剪切应力区域细胞密度的进行性下降,间隙增大,形态变化明显。冲击流以时间依赖性激活p-pkcα、HMGB1、NF-κB、IL-1β、IL-6和IL-8的表达,并通过pkcα/HMGB1/NF-κB信号通路促进血管内皮炎症的发生,参与血管内皮损伤。

关键词：血流动力学颅内动脉瘤炎症 pkcα HMGB1 NF-κB

pkcα，βⅡ，δ在大鼠视网膜发育过程中的差异表达

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

PKCα，βⅡ，δ在大鼠视网膜发育过程中的差异表达

作者：张姬慧福建医科大学

学位级别：硕士

目的:研究蛋白激酶C三种同工酶pkcα,βⅡ,δ在正常大鼠出生后视网膜发育过程中的差异表达情况。方法:采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real time RT-PCR)方法检测正常大鼠视网膜发育过程中pkcα,βⅡ,δmRNA水平的表达差异;通过... 详细信息

目的:研究蛋白激酶C三种同工酶pkcα,βⅡ,δ在正常大鼠出生后视网膜发育过程中的差异表达情况。方法:采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real time RT-PCR)方法检测正常大鼠视网膜发育过程中pkcα,βⅡ,δmRNA水平的表达差异;通过免疫组织化学的方法检测pkcα,βⅡ,δ蛋白水平的表达情况。结果:Real time RT-PCR结果显示,大鼠出生后14d(P14)之前,视网膜组织中pkcα,βⅡmRNA表达逐渐升高, P14之后有所下降;pkcδ在生后早期高表达;成年后3种同工酶mRNA表达稳定。视网膜切片免疫组织化学染色光密度测定结果与mRNA表达相符。染色阳性产物定位显示,出生后当天(P0)pkcα,βⅡ阳性产物染色不明显,pkcδ阳性产物在原始神经母细胞层和原始节细胞层均有表达。随着视网膜的发育,生后7d(P7)pkcα染色阳性产物在外丛状层和内核层染色明显;pkcβⅡ的阳性产物主要在内核层、内丛状层、外丛状层和神经节细胞层染色明显;pkcδ的阳性产物主要分布在外界膜和视锥、视杆层。随着视网膜的发育,到了出生后14d(P14)pkcα可以在外丛状层看到轮廓清晰的强染色细胞,βⅡ染色阳性产物在神经节细胞层染色加深,内核层、内丛状层、外丛状层染色变浅;pkcδ在外界膜染色加深;视网膜发育成熟后,3种同工酶的阳性染色部位不变。结论:pkcα,βⅡ,δ在大鼠出生后视网膜发育过程中均有表达,并有一定的发育规律性,提示这3种同工酶与大鼠生后视网膜的发育过程密切相关;pkcα,βⅡ,δ表达的差异性提示:每种同工酶在参与视网膜发育方面可能具有不同的功能。pkcα可能对视杆-双极细胞发育有重要意义;pkcβⅡ可能对视网膜神经节细胞的发育过程有重要作用。pkcδ可能与视网膜生后早期原始神经母细胞和原始神经节细胞的分化及细胞凋亡过程有关。

关键词： pkcα pkcβⅡ pkcδ 视网膜发育实时荧光定量PCR 免疫组织化学