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piwiL2蛋白在肝门部胆管癌组织和细胞株中的表达及临床意义

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中华肝胆外科杂志 2014年第4期20卷 280-283页

作者：温松奇熊小凡杨光耀杨康俞亚红丁志强游建陈勇军华中科技大学同济医学院附属普爱医院肝胆胰疝外科武汉430000

目的研究piwiL2在肝门部胆管癌组织和细胞株中的表达及其与临床病理特征和根治性切除术预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测41例肝门部胆管癌和10例正常胆管组织中piwiL2的表达；蛋白印迹和细胞免疫荧光技术检测人胆管癌细胞系QBC... 详细信息

目的研究piwiL2在肝门部胆管癌组织和细胞株中的表达及其与临床病理特征和根治性切除术预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测41例肝门部胆管癌和10例正常胆管组织中piwiL2的表达；蛋白印迹和细胞免疫荧光技术检测人胆管癌细胞系QBC939和人正常胆管上皮细胞HIBEpic株中piwiL2的表达。采用Kaplan—Meier法对胆管癌根治术后患者进行生存期的单因素及多因素分析。结果piwiL2在肝门部胆管癌和QBC939细胞中的表达明显高于对照组织和HIBEpie细胞（P〈0．05）；piwiL2在低、中分化胆管腺癌的表达明显高于高分化腺癌（P〈0．05）。单因素生存分析显示根治术后piwiL2高表达的生存期较短（P〈0．05）。多因素分析显示piwiL2的表达水平是影响胆管癌根治术预后的独立危险因素（P〈0．05）。结论piwiL2在肝门部胆管癌组织和细胞系中表达上调，其表达水平与肿瘤分期及分化程度相关，是影响肝门部胆管癌根治切除预后的独立危险因素。

关键词： piwi蛋白 piwiL2 肝门部胆管癌预后危险因素

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piRNA对生殖系统调控作用的研究进展

黑龙江畜牧兽医 2017年第12期 76-82页

作者：道楞白东义赵一萍乌尼尔夫彩丽干佳木泰纳日嘎李蓓芒来内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018

随着小RNA研究的不断深入,科学家们发现了新型内源性小RNA——piRNA,与生殖细胞发育密切相关。piRNA是大约为32 nt长度的非编码小RNA,主要分布于哺乳动物卵巢卵母细胞和睾丸精原细胞中,在果蝇的卵巢卵泡(性腺体细胞)中也存在少量的piRNA... 详细信息

随着小RNA研究的不断深入,科学家们发现了新型内源性小RNA——piRNA,与生殖细胞发育密切相关。piRNA是大约为32 nt长度的非编码小RNA,主要分布于哺乳动物卵巢卵母细胞和睾丸精原细胞中,在果蝇的卵巢卵泡(性腺体细胞)中也存在少量的piRNA。piRNA的生成及生物功能的发挥均依赖Argonaute家族piwi蛋白,piRNA与piwi亚家族蛋白特异性相结合并相互作用。研究发现,在体细胞和生殖细胞中piRNA的生成途径不同。piRNA主要在生殖干细胞分化、胚胎发育、DNA完整性的保持、表观遗传调控和性别决定等方面发挥作用。文章简单综述了piRNA在哺乳动物生殖系统发育过程中的调控机制。

关键词： piRNA piwi蛋白生殖细胞生殖干细胞繁殖性能

HiWi蛋白在卵巢癌中的表达及临床意义研究

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HiWi蛋白在卵巢癌中的表达及临床意义研究

作者：杜静青岛大学

学位级别：硕士

目的:通过检测Hiwi蛋白在不同病理类型卵巢癌及正常卵巢组织中阳性表达例数,计算阳性表达率情况,分析Hiwi蛋白阳性表达与卵巢癌患者临床病理特征之间的相关性,探讨Hiwi蛋白对卵巢癌发生发展过程的影响;通过检测Hiwi mRNA在卵巢癌组织中... 详细信息

目的:通过检测Hiwi蛋白在不同病理类型卵巢癌及正常卵巢组织中阳性表达例数,计算阳性表达率情况,分析Hiwi蛋白阳性表达与卵巢癌患者临床病理特征之间的相关性,探讨Hiwi蛋白对卵巢癌发生发展过程的影响;通过检测Hiwi mRNA在卵巢癌组织中的表达水平,在分子水平上进一步验证卵巢癌发病机制中Hiwi蛋白可能发挥的作用;通过跟踪随访入组患者的生存时间,绘制生存曲线,评估预后,探讨Hiwi蛋白在评估患者预后,病情监测中的可能的作用及临床意义。方法:搜集解放军第401医院2012.01--2018.01手术切除的卵巢癌组织49例(浆液性癌26例,黏液性17例,其他类型6例;Ⅰ期19例,Ⅲ期30例)进行SP染色。根据课题设计,设立对照组。对照组为同期因其他疾病行卵巢切除的20例正常卵巢组织,所有患者术前均未经任何治疗,均行卵巢癌肿瘤细胞减灭术。1.应用免疫组化技术SP法来检测Hiwi蛋白在不同病理类型、不同分期的卵巢癌患者组织及正常卵巢组织中的阳性表达情况,同时进行染色评分,计算阳性表达率。2.根据第一步筛选出来的免疫组化阳性表达患者,对比其临床资料,分析Hiwi蛋白异常表达与患者临床病理特征之间的相关性,尤其是与年龄、临床分期、组织类型以及分化程度、淋巴结、大网膜转移之间的关系,结果进行统计学分析。3.应用实时荧光定量PCR法检测不同类型卵巢癌组织中Hiwi mRNA相对表达量,对mRNA的表达量进行统计学分析,在mRNA水平上分析Hiwi基因在卵巢癌发生、发展过程中作用及可能的分子机制。4.根据临床记录资料,跟踪随访卵巢癌患者生存时间,计算患者生存率,然后绘制患者生存曲线,Log-rank检验分析Hiwi蛋白在预估患者预后中的作用及临床意义。结果:1.免疫组化结果显示:Hiwi蛋白主要分布在癌细胞膜和细胞质中,未见核染色,呈棕黄色或棕褐色不同强度的染色。49例卵巢癌患者中Hiwi蛋白阳性表达者37例,阴性表达者12例,Hiwi蛋白在卵巢癌组织中阳性表达率为75.5%,而在正常卵巢组织中的阳性表达率为35%,差异有统计学意义(P蛋白高表达与患者临床分期、淋巴结及大网膜转移、分化程度等密切相关(P0.05)。Hiwi蛋白高表达患者临床分期越晚,分化程度越低,淋巴结、大网膜越容易发生转移。3.实时荧光定量PCR法检测卵巢癌组织中Hiwi mRNA相对表达量,其结果显示卵巢癌组织中Hiwi mRNA表达明显高于正常卵巢组织,差异有统计学意义(P蛋白阳性患者死亡者23例,死亡率达62.16%,12例Hiwi蛋白阴性患者死亡者4例,死亡率为33.33%。对数据进行Log-rank检验,结果提示Hiwi蛋白高表达与患者术后生存率呈负相关(Log-rank=3.89,P=0.048)。结论:Hiwi蛋白在卵巢癌组织中高表达,Hiwi蛋白高表达患者临床分期越晚,分化程度越低,大网膜、淋巴结转移率越高。Hiwi蛋白可作为评估卵巢癌患者预后的一个重要指标。Hiwi蛋白有望成为卵巢癌基因治疗的靶标。Hiwi蛋白过表达,为卵巢癌发病机制、临床治疗及评估预后的研究提供新思路。

关键词： Hiwi蛋白 piwi蛋白肿瘤干细胞卵巢癌基因治疗

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piRNA通路在生精过程中的作用

生殖医学杂志 2018年第1期27卷 95-99页

作者：李雪瑶杨菁李洁徐玲武汉大学人民医院生殖医学中心武汉430060

piRNA是一类特异性与Argonuat蛋白家族中的piwi蛋白相互结合形成piRNA沉默复合体(piRNA-induced silencing complex,piRISC)而在生物体内发挥重要作用的非编码小RNA,主要作用于生殖系统。piRNA通路不仅通过抑制转座子,还通过泛素化降解... 详细信息

piRNA是一类特异性与Argonuat蛋白家族中的piwi蛋白相互结合形成piRNA沉默复合体(piRNA-induced silencing complex,piRISC)而在生物体内发挥重要作用的非编码小RNA,主要作用于生殖系统。piRNA通路不仅通过抑制转座子,还通过泛素化降解、调控mRNA表达、基因甲基化修饰等方式来发挥在生精过程中的特定作用。本文拟对piRNA通路在生精过程中的作用进行综述。

关键词： piRNA 生精过程 piwi蛋白 piRNA沉默复合体不育