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植入前胚胎遗传学检测中不同测序平台的应用分析和嵌合体胚胎妊娠结局研究

植入前胚胎遗传学检测中不同测序平台的应用分析和嵌合体胚胎妊娠...

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作者：解洪强山东大学

学位级别：硕士

第一章两种测序平台在植入前胚胎遗传学检测中的应用分析研究目的对比使用Ion Torrent测序平台和Miseq测序平台行植入前胚胎遗传学检测pgt(preimplantation genetic testing)助孕患者的胚胎检测结果和临床妊娠结局,探讨使用不同的测序... 详细信息

第一章两种测序平台在植入前胚胎遗传学检测中的应用分析研究目的对比使用Ion Torrent测序平台和Miseq测序平台行植入前胚胎遗传学检测pgt(preimplantation genetic testing)助孕患者的胚胎检测结果和临床妊娠结局,探讨使用不同的测序平台对胚胎检测结果和妊娠结局的影响。研究方法本研究为回顾性队列研究,纳入了2017年12月至2019年11月期间就诊于山东大学附属生殖医院行pgt助孕夫妇。1.为探究不同检测平台对患者的妊娠结局的影响,根据参与临床试验使用的检测平台不同分为Ion Torrent组和Miseq组。2.为分析不同测序平台对不同指征患者的妊娠结局的影响,根据患者行pgt指征是否有染色体异常将患者分成:夫妻双方有一方具有染色体异常组(pgt-sr组)和夫妻双方均无染色体异常组(pgt-A组)。3.为分析平台检测结果的妊娠结局,根据移植的胚胎的检测结果分为整倍体胚胎组和嵌合体胚胎组。4.为比较不同平台对嵌合体胚胎检测真实性,将两种测序平台移植的嵌合体胚胎扩增产物交换平台进行重新检测,对重新检测的结果一致性和妊娠结局进行分析。研究指标:主要指标为移植周期活产率,次要指标为胚胎非整倍体率、临床妊娠率、持续妊娠率和流产率。研究结果1.本研究一共纳入了 865对患者夫妇、886个取卵周期的3471枚胚胎。根据其使用测序平台不同分为两组,Ion Torrent组445对夫妇、452个取卵周期的1836枚胚胎;Miseq组420对夫妇、434个取卵周期的1635枚胚胎。2.两组患者基础资料无显著性差异:患者基础资料分析:两组患者在女方年龄、女方体重指数(body mass index,BMI)、怀孕次数、生育次数、女方基础雌二醇(estradiol,E2)、卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)和抗苗勒氏管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)无显著差异;男方精子浓度和精子活力以及本周期取卵个数、最终囊胚个数均无显著性差异。*** Torrent组的活产率为53.91%,Miseq组的活产率为58.67%,两组间的活产率无显著性差异(P=0.163)。在pgt-A组中,Ion Torrent组的活产率为48.43%,Miseq组的活产率为53.37%,在pgt-A患者中,两组的活产率无显著性差异(P=0.291);pgt-sr组中,Ion Torrent组的活产率为60.68%,Miseq组的活产率为64.67%,在pgt-sr患者中,两组的活产率无显著性差异(P=0.416)。在移植整倍体胚胎的患者中,Ion Torrent组的活产率为54.48%,Miseq组的活产率为58.20%,两组移植整倍体胚胎的患者的活产率无显著性差异(P=0.291);在移植嵌合体胚胎的患者中,Ion Torrent组的活产率为43.48%,Miseq组的活产率为68.00%,两组移植嵌合体胚胎患者的活产率无显著性差异(P=0.087)。4.入组患者移植整倍体胚胎整体活产率为56.18%,移植嵌合体胚胎整体活产率为56.25%,两者无显著性差异(P=0.992)。在移植嵌合体胚胎的患者中,移植低比例嵌合体胚胎的患者活产率显著高于移植高比例嵌合体胚胎的患者活产率(72.00%vs.39.13%,P=0.022)。*** Torrent组胚胎的非整倍体率为56.46%,Miseq组胚胎的非整倍体率为46.03%,两者无显著性差异(P=0.392)。Ion Torrent组移植的23枚嵌合体胚胎在Miseq测序平台检测后有30.44%的胚胎与原检测结果不一致,Miseq组移植的25枚嵌合体胚胎经Ion Torrent测序平台检测后有24.00%的胚胎与原测序结果不一致,两者无显著性差异(P=0.445)。研究结论1.植入前胚胎遗传学检测过程中,患者的妊娠结局与使用的测序平台无关。*** Torrent测序平台和Miseq测序平台胚胎的检测能力相同,但对嵌合体的检测都存在假阳性。3.在没有整倍体胚胎移植的情况下,可以考虑嵌合体移植,但高比例嵌合体胚胎移植后活产率较低。第二章植入前胚胎遗传学检测中嵌合体胚胎评级和妊娠结局相关性分析研究目的通过植入前胚胎非整倍体检测周期中嵌合体胚胎相关临床资料进行回顾性分析,探讨嵌合体胚胎的嵌合比例以及嵌合体胚胎的评级与嵌合体胚胎移植的妊娠结局是否相关,以期为临床嵌合体胚胎的移植选择优先级提供理论依据。研究方法采用回顾性队列研究对2017年10月至2020年5月期间在我院进行pgt-A治疗的患者的病历资料进行分析。根据胚胎pgt检测结果分为整倍体组和嵌合体组。为分析不同嵌合比例和胚胎评级对嵌合体胚胎移植后妊娠结局的影响,根

关键词：植入前胚胎遗传学检测二代测序妊娠结局 pgt-A pgt-sr 嵌合体整倍体

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