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颗粒蛋白前体pgrn的生物学功能及其在肝癌中的作用研究进展

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2024年第1期 216-220页

作者：牟雪韦忠恒右江民族医学院研究生学院广西百色533000 右江民族医学院教务处广西百色533000

颗粒蛋白前体(pgrn)是一种具有多种生物学功能的新型生长因子,参与人体的生理病理过程,其与肝癌的发生及发展也有着密切的关系。pgrn是一种具有原始干细胞和癌细胞特性的肝癌胎蛋白,可以通过促进肝癌细胞的增殖、侵袭、转移、血管生成... 详细信息

颗粒蛋白前体(pgrn)是一种具有多种生物学功能的新型生长因子,参与人体的生理病理过程,其与肝癌的发生及发展也有着密切的关系。pgrn是一种具有原始干细胞和癌细胞特性的肝癌胎蛋白,可以通过促进肝癌细胞的增殖、侵袭、转移、血管生成及耐药性,从而促进肝癌进展。此外,它也可作为肝癌的诊断潜在生物标志物及预后指标。本文主要阐述了pgrn在肝癌中的相关研究,为肝癌的靶向治疗提供新思路。

关键词：颗粒蛋白前体 pgrn 肝癌治疗靶点

支气管哮喘急性发作期患儿血清pgrn、SFRP1、CCL26与肺功能和气道炎症的相关性研究

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现代生物医学进展 2024年第10期24卷 1860-1863页

作者：连其昌许晓丹庄娇容郑志宏卢蔚薇第九〇九医院/厦门大学附属东南医院儿科福建漳州363000

目的:分析支气管哮喘急性发作期患儿血清颗粒蛋白前体(pgrn)、分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)、趋化因子配体26(CCL26)与肺功能和气道炎症的相关性。方法:选择2019年7月~2022年12月期间我院收治的支气管哮喘急性发作期患儿129例(急性组),... 详细信息

目的:分析支气管哮喘急性发作期患儿血清颗粒蛋白前体(pgrn)、分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)、趋化因子配体26(CCL26)与肺功能和气道炎症的相关性。方法:选择2019年7月~2022年12月期间我院收治的支气管哮喘急性发作期患儿129例(急性组),根据肺功能检查并结合临床特点,将患儿分为轻度组(n=51)、中度组(n=42)和重度组(n=36)。另选取同期来我院治疗的支气管哮喘临床缓解期患儿60例(对照组),对比对照组和各急性组亚组的血清pgrn、SFRP1、CCL26、肺功能、气道炎症,采用Pearson相关性分析血清pgrn、SFRP1、CCL26与肺功能指标和气道炎症指标的相关性。结果:重度组、中度组、轻度组的pgrn低于对照组,SFRP1、CCL26则高于对照组(Ppgrn不断下降,SFRP1、CCL26不断升高(Ppgrn与肺功能指标呈正相关,与气道炎症指标呈负相关(Ppgrn异常降低,SFRP1、CCL26异常升高,参与病情程度加重,且与肺功能和气道炎症相关。

关键词：支气管哮喘急性发作期 pgrn SFRP1 CCL26 肺功能气道炎症相关性

pgrn exacerbates the progression of non-small cell lung cancer via PI3K/AKT/Bcl-2 antiapoptotic signaling

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Genes & Diseases 2022年第6期9卷 1650-1661页

作者： Sicheng Chen Mengjun Bie Xiaowen Wang Mengtian Fan Bin Chen Qiong Shi Yingjiu Jiang Department of Cardiothoracic Surgery The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityChongqing 400016PR China Ministry of Education Key Laboratory of Diagnostic Medicine School of Laboratory MedicineChongqing Medical UniversityChongqing 400016PR China

Progranulin(pgrn)is a growth factor that is involved in the progression of multiple tumors.However,the effects and molecular mechanisms by which pgrn induces lung cancer remain unclear.The expression level of pgrn was analyzed by conducting immunohistochemistry of the histological sections of lung tissues from non-small-cell lung carcinoma(NSCLC)patients.The proliferation,apoptosis,migration,and invasion of NSCLC cells were assessed by the MTT assay,Western blot,degree of wound healing,and Transwell assays.A nude mouse xenograft model was used to validate the role of pgrn in vivo.The expression level of pgrn was higher in male patients with lung adenocarcinoma than in those with lung squamous cell carcinoma;by contrast,no difference was observed in female patients.The overexpression of pgrn promoted the proliferation and anti-apoptosis of H520(derived from lung squamous cell carcinoma)cells,whereas knockdown of pgrn inhibited the proliferation and anti-apoptosis of A549(derived from lung adenocarcinoma)cells.Copanlisib(targeting PI3K)inhibited the increase in the expression of cell anti-apoptosis marker Bcl-2 induced by rhpgrn protein;the PI3K agonist 740 YeP partially reversed the decrease in Bcl-2 expression induced by pgrn deficiency in both A549 and H520 cells.pgrn increased the expression of Ki-67,PCNA,and Bcl-2 in vivo.pgrn inhibited cell apoptosis depending on the PI3K/Akt/Bcl-2 signaling axis;pgrn positivity correlated with lung adenocarcinoma.pgrn is a potential biomarker for the treatment and diagnosis of NSCLC,especially in lung adenocarcinoma.

关键词： Bcl-2 Cell apoptosis NSCLC pgrn PI3K/Akt

Progranulin regulation of autophagy contributes to its chondroprotective effect in osteoarthritis

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Genes & Diseases 2023年第4期10卷 1582-1595页

作者： Yiming Pan Yuyou Yang Mengtian Fan Cheng Chen Rong Jiang Li Liang Menglin Xian Biao Kuang Nana Geng Naibo Feng Lin Deng Wei Zheng Fengmei Zhang Xiaoli Li Fengjin Guo Department of Cell Biology and Genetics Core Facility of Development BiologyChongqing Medical UniversityChongqing 400016China Department of Orthopaedics The 1st Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityChongqing 400016China Laboratory of Stem Cells and Tissue Engineering Chongqing Medical UniversityChongqing 400016China Department of Orthopaedics The 2nd Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityChongqing 400016China Chongqing Medical University Laboratory Animal Center Chongqing Medical UniversityChongqing 400016China

Progranulin(pgrn)is a multifunctional growth factor involved in many physiolog-ical processes and disease states.The apparent protective role of pgrn and the importance of chondrocyte autophagic function in the progression of osteoarthritis(OA)led us to investi-gate the role of pgrn in the regulation of chondrocyte autophagy.pgrn knockout chondro-cytes exhibited a deficient autophagic response with limited induction following rapamycin,serum starvation,and IL-1b-induced autophagy.pgrn-mediated anabolism and suppression of IL-1b-induced catabolism were largely abrogated in the presence of the BafA1 autophagy inhibitor.Mechanistically,during the process of OA,pgrn and the ATG5eATG12 conjugate form a protein complex;pgrn regulates autophagy in chondrocytes and OA through,at least partially,the interactions between pgrn and the ATG5eATG12 conjugate.Furthermore,the ATG5eATG12 conjugate is critical for cell proliferation and apoptosis.Knockdown or knockout of ATG5 reduces the expression of ATG5eATG12 conjugate and inhibits the chondroprotective effect of pgrn on anabolism and catabolism.Overexpression of pgrn partially reversed this effect.In brief,the pgrn-mediated regulation of chondrocyte autophagy plays a key role in the chondroprotective role of pgrn in OA.Such studies provide new insights into the pathogen-esis of OA and pgrn-associated autophagy in chondrocyte homeostasis.

关键词： Anabolism ATG12 ATG5 Autophagy Catabolism Osteoarthritis pgrn

Macamide B促进缺氧缺血性脑损伤新生小鼠神经元的pgrn表达

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中国临床解剖学杂志 2023年第3期41卷 304-309页

作者：周倩李莉霞杨晓夏杨俊华文锦坤李朋飞罗利李国营广东药科大学生命科学与生物制药学院人体解剖学与组织胚胎学系广州510006 南方医科大学南方医院妇产科广州510515

目的研究玛咖酰胺B(Macamide B)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的新生小鼠神经元中颗粒蛋白前体(Progranulin,pgrn)及糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)后的小鼠海马神经元细胞系(HT22)中pgrn表达的影响,探究Macamide B在新生小鼠HIBD后发挥神经保护作用的机制。方法建立HIBD小鼠模型,将出生后7 d的C57小鼠随机分为Sham组、HIBD组和Macamide B组;HT22细胞培养并制备OGD细胞模型,分为Control组、OGD组和Macamide B组。通过免疫荧光、Western blot检测小鼠神经元或HT22细胞中pgrn的表达。结果体内实验显示,与Sham组相比,HIBD组小鼠神经元中pgrn表达降低;与HIBD组相比,Macamide B组小鼠神经元中pgrn表达升高。在体外,与Control组相比,OGD组HT22细胞中pgrn表达降低;与OGD组相比,Macamide B组HT22细胞中pgrn表达显著升高。结论Macamide B可能通过促进pgrn表达对HIBD新生小鼠发挥神经保护作用。

关键词：缺氧缺血性脑损伤 Macamide B 神经保护 pgrn

沉默pgrn基因对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

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中国免疫学杂志 2023年第5期39卷 951-955页

作者：宋立先刘春红高蓉刘思言徐学振滨州医学院烟台附属医院烟台264100

目的:探讨沉默颗粒蛋白前体(pgrn)基因对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其相关机制。方法:按照脂质体法将siRNA pgrn、siRNA NC转染至RA滑膜成纤维细胞MH7A,记为siRNA NC组、siRNA pgrn组,对照组(Control)未进行转... 详细信息

目的:探讨沉默颗粒蛋白前体(pgrn)基因对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其相关机制。方法:按照脂质体法将siRNA pgrn、siRNA NC转染至RA滑膜成纤维细胞MH7A,记为siRNA NC组、siRNA pgrn组,对照组(Control)未进行转染处理;将siRNA pgrn转染RA滑膜成纤维细胞MH7A后,加入丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路激活剂Anisomycin,记为siRNA pgrn+Anisomycin组。采用qRT-PCR检测各组细胞pgrn mRNA表达水平;噻唑蓝(MTT)、克隆形成实验检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡变化;Western blot检测各组细胞pgrn、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白、MAPK通路蛋白表达。结果:与Control组、siRNA NC组相比,siRNA pgrn组内pgrn mRNA及蛋白表达、克隆形成率、存活率明显降低,凋亡率明显升高,Cyclin D1、PCNA、Bcl-2、p-p38 MAPK蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加。与siRNA pgrn组相比,siRNA pgrn+Anisomycin组内p-p38 MAPK、Cyclin D1、PCNA、Bcl-2蛋白表达增加,克隆形成率、存活率明显增加,Bax蛋白表达、凋亡率明显降低。结论:沉默pgrn能抑制RA滑膜成纤维细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与MAPK信号通路有关。

关键词： pgrn 类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖凋亡

肺胀清喘方对痰热壅肺证慢性阻塞性肺疾病急性发作期肺功能及炎性因子、pgrn的改善作用

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中药材 2022年第11期45卷 2764-2767页

作者：李献超黄约诺林雪娇温州市中医院浙江温州325000

目的:探究肺胀清喘方对痰热壅肺证慢性阻塞性肺疾病急性发作期(AECOPD)肺功能、血清炎性因子和pgrn的影响。方法:选择2020年1月-2022年1月在温州市中医院住院部治疗的94例AECOPD患者。随机分为对照组和观察组各47例。所有患者均依据病... 详细信息

目的:探究肺胀清喘方对痰热壅肺证慢性阻塞性肺疾病急性发作期(AECOPD)肺功能、血清炎性因子和pgrn的影响。方法:选择2020年1月-2022年1月在温州市中医院住院部治疗的94例AECOPD患者。随机分为对照组和观察组各47例。所有患者均依据病情和治疗指南采取营养支持、糖皮质激素和支气管扩张剂雾化吸入和吸氧等治疗,并给予抗感染治疗,观察组加用肺胀清喘方。对两组患者临床疗效进行评估,比较治疗前后血气指标(PaCO_(2)、PaO_(2))、肺功能(FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC)及血清pgrn、hs-CRP、IL-6、TNF-α水平,评估患者的中医症状积分。结果:观察组患者的临床疗效显著高于对照组(Ppgrn、hs-CRP、IL-6、TNF-α水平显著降低,PaO_(2)、FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC水平显著升高,自汗、乏力、胸闷、气短评分显著降低(Ppgrn水平。

关键词：肺胀清喘方痰热壅肺证慢性阻塞性肺疾病 pgrn

pgrn对羊传染性脓疱病毒诱导OFTu细胞自噬的调控机制

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PGRN对羊传染性脓疱病毒诱导OFTu细胞自噬的调控机制

作者：甄瑞雪吉林大学

学位级别：硕士

颗粒前体蛋白(pgrn)是具有多种生物学功能的多功能分泌型蛋白,在许多生命活动的关键过程中都发挥着重要作用,包括炎症反应、损伤修复、溶酶体功能和神经发育。在前期研究中,本课题组已经证实羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)能诱导OFT... 详细信息

颗粒前体蛋白(pgrn)是具有多种生物学功能的多功能分泌型蛋白,在许多生命活动的关键过程中都发挥着重要作用,包括炎症反应、损伤修复、溶酶体功能和神经发育。在前期研究中,本课题组已经证实羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)能诱导OFTu细胞发生自噬,作为细胞自噬的重要调控分子,pgrn是否参与对ORFV诱导OFTu细胞自噬的调控尚不清楚。为探究pgrn与ORFV诱导的OFTu细胞自噬之间的关系,本研究首先从转录和蛋白水平上分析了pgrn在ORFV感染OFTu细胞中的表达变化规律,收集ORFV感染后不同时间点(0,12,24,36,48,60 h)的OFTu细胞样品,分别提取感染细胞总蛋白及总RNA进行Western-blotting和q RT-PCR分析,结果显示,pgrn发生显著上调的时间与ORFV诱导自噬发生的时间一致。进一步研究显示,干扰pgrn能够抑制LC3的型别转换,并使P62表达上调;而体外添加pgrn重组蛋白则促进LC3Ⅰ向LC3Ⅱ的转换,P62表达下调。以上结果表明,pgrn参与对ORFV诱导细胞自噬的调控。由于自噬是一个动态调节过程,为进一步证实pgrn调控OFTu细胞自噬,应用自噬抑制剂/激活剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)、巴佛洛霉素A1(Bafilomycin A1,Baf A1)以及雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)分别处理OFTu细胞,通过Western-blotting检测LC3以及P62蛋白表达情况,结果显示,干扰pgrn能够减弱ORFV对自噬的激活作用,而添加pgrn重组蛋白则能够通过促进自噬小体形成正向调控ORFV诱导的OFTu细胞自噬。得出结论,pgrn能够调控ORFV诱导的OFTu细胞自噬。AKT/mTOR信号通路是自噬调节的一个重要通路,有研究表明pgrn能够调控该通路进而调节自噬,但pgrn是否能够通过AKT/mTOR信号通路调控ORFV诱导的OFTu细胞自噬尚不清楚,因此,为探究pgrn是否能够通过AKT/mTOR调控ORFV诱导的OFTu细胞自噬,收集经siRNA#1632以及pgrn重组蛋白处理的感染ORFV的OFTu细胞,利用Western-blotting对AKT/mTOR信号通路激活情况进行检测,结果显示,体外添加pgrn重组蛋白能够进一步抑制磷酸化AKT、mTOR蛋白表达,而干扰pgrn则会影响ORFV对AKT/mTOR信号通路的抑制作用。此外,在ORFV感染后,分别应用pgrn重组蛋白与自噬抑制剂Baf A1对OFTu细胞进行不同处理,对AKT/mTOR信号通路的激活情况进行检测,结果显示,在Baf A1处理组中,p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平明显升高,而与单独添加pgrn重组蛋白组比较,加入Baf A1能够降低pgrn以及ORFV对AKT/mTOR信号通路的抑制效果。因此得出pgrn能够通过抑制AKT/mTOR通路正向调控ORFV诱导的OFTu细胞自噬。此外,本研究进一步探究了pgrn对自噬的调节是否能够影响ORFV本身的复制,病毒噬斑实验结果显示,干扰pgrn能够抑制ORFV复制,并且还能够减弱自噬激活剂对ORFV复制的促进作用;体外添加pgrn重组蛋白则能够促进ORFV复制,回转自噬抑制剂以及AKT激动剂对病毒复制的抑制作用,该结果表明,pgrn能够通过调节ORFV激活的自噬影响病毒的复制。综上,pgrn能够通过促进自噬小体生成、抑制AKT/mTOR信号通路调控ORFV诱导的OFTu细胞自噬进而促进ORFV复制。本研究结果将为明确pgrn对ORFV诱导自噬的调控作用以及进一步揭示ORFV致病机制奠定基础。

关键词：羊传染性脓疱病毒 pgrn 信号通路自噬复制增殖

pgrn对口腔鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

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PGRN对口腔鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

作者：徐文惠山东大学

学位级别：硕士

研究目的:口腔癌为原发于舌、颊、腭、口底、牙龈等部位的恶性肿瘤,病理类型以口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）为主,约占口腔癌的九成以上。近三十年来,口腔癌的发病率逐年上升。据统计,2020年口腔癌为全球恶性肿... 详细信息

研究目的:口腔癌为原发于舌、颊、腭、口底、牙龈等部位的恶性肿瘤,病理类型以口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）为主,约占口腔癌的九成以上。近三十年来,口腔癌的发病率逐年上升。据统计,2020年口腔癌为全球恶性肿瘤发病第16位,其中新发病例约37.7万人,死亡病例约17.7万人,而我国新发病例人数占7.97%,居全球第二。目前口腔癌的治疗多采取手术为主的综合治疗,但5年生存率仍在半数左右。由于口腔鳞癌的发生是一个由正常黏膜上皮受到体内或体外环境变化刺激后出现异常增生、再发展为原位癌、再到癌变的复杂过程,受多种因素的调控,目前其确切发生发展机制尚未完全清楚,因此寻找可能的生物标志物是口腔鳞癌预防、治疗及预后预测的重要研究方向。颗粒蛋白前体（progranulin,pgrn）由GRN基因编码,在上皮细胞、神经元等细胞中均有大量表达,参与胚胎发育、骨和软骨发育、炎症反应、损伤修复、胰岛素抵抗等多种生理学过程。近期在pgrn对肿瘤的作用研究方面,大量实验表明pgrn在乳腺癌、肺癌、肝癌、结直肠癌等多种上皮性肿瘤中表达上调,且其表达水平与肿瘤的预后密切相关,可作为患者预后情况预测的指标之一;可能通过PI3K/Akt、ERK等信号通路影响肿瘤细胞的生长增殖、迁移侵袭、免疫逃逸及耐药等进展过程。而目前尚未有关于颗粒蛋白前体在口腔鳞状细胞癌中作用的研究。因此,本实验旨在通过增强或抑制颗粒蛋白前体的表达来阐明其对人口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响,以从体外探究pgrn在口腔鳞状细胞癌发生发展中的作用。研究方法:1、敲减及过表达pgrn稳定转染细胞系的构建:构建包含pgrn干扰序列及包含pgrn全长序列慢病毒载体,分别对口腔鳞癌细胞CAL27、SCC15进行转染,分组为:敲减组（shpgrn）、敲减对照组（shNC）、过表达组（oepgrn）、过表达对照组（oeNC）;real-time PCR验证敲低pgrn及过表达pgrn的效果。2、敲减及过表达pgrn对细胞增殖、迁移、侵袭的影响:通过CCK-8法及平板克隆形成实验检测敲减及过表达pgrn对细胞生长及增殖的影响;通过Transwell迁移实验及划痕实验确定敲减及过表达pgrn对细胞迁移的影响;通过Transwell基底膜侵袭实验确定敲减及过表达pgrn对细胞侵袭的影响。3、利用免疫组化方法检测12例口腔鳞癌患者癌及癌旁组织中pgrn的表达情况是否存在差异。结果:1、免疫组织化学结果显示pgrn在口腔鳞癌中较癌旁表达上调。2、通过real-time PCR从基因水平验证构建成功敲减及过表达pgrn的口腔鳞癌细胞系,并筛选出干扰序列LV-GRN-RNAi21856-1、LV-GRN-RNAi21857-1效果更佳,慢病毒转染时最佳感染复数（MOI）为5。3、在口腔鳞癌细胞系CAL27、SCC15中敲低pgrn后,与对照组相比生长明显减慢,克隆形成实验显示集落形成减少。迁移实验表明细胞迁移能力明显下降。Transwell实验表明能穿过小室及基质胶的细胞数明显减少。4、在口腔鳞癌细胞系CAL27、SCC15中过表达pgrn后,与对照组相比生长明显增快,克隆形成实验显示集落形成增多。迁移实验表明细胞迁移能力明显上升。Transwell实验表明能穿过小室及基质胶的细胞数明显增多。结论:pgrn可增强口腔鳞癌细胞（CAL27、SCC15）的生长增殖、迁移和侵袭能力,对口腔鳞癌的发生发展起促进作用。

关键词：颗粒蛋白前体 pgrn 口腔鳞状细胞癌