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植物生理学报（0257-4829) 1992年第1期18卷 105-110页

作者：查静娟胡志元吴敏贤施教耐中国科学院上海植物生理研究所上海200032

Fructose-6-phosphate 2-kinase and fructose 2,6-bisphosphatase have been partially purified from maize leaves by PEG fractionadon and by chromatography on TSK-DEAE ion exchanger and Blue-Sepharose 4B. Fructose-6-phosphate 2-kinase was activated by phosphate and inhibited by 3-pnosphoglycerate. Furctose 2,6-bisphosphatase was inhibited by inorganic phosphate and *** observed pattern of reguladon suggests that systhesis and degradation of Fru-2,6-P2 respond to changes in the concentration of effectors. An increase in the level of glycerate-3-phosphate or dihydroxyacetonephosphate will result in a decrease in the level of Fru-2,6-P2. Conversely a rise in Fru-6-P concentration will lead to an increase in the Fru-2, 6-P2 concentration.

关键词：玉米 Pi PGA pfk-2 FBP酶

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鸡肝果糖-6-磷酸-2-激酶的巯基与碱性氨基酸残基的研究

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中国科学（B辑） 1991年第12期 1267-1272页

作者：李林许根俊中国科学院上海生物化学研究所上海200031

本文报道半胱氨酸、赖氨酸和精氨酸等残基在鸡肝果糖-6-磷酸-2-激酶的作用。DTNB修饰的结果表明鸡肝pfk-2每亚基具有9个巯基。其中,在中性pH下可滴定的巯基数目为6个;在Fru6P存在下的可滴定巯基数为4个;而在ATP存在下的可滴定巯基数为7... 详细信息

本文报道半胱氨酸、赖氨酸和精氨酸等残基在鸡肝果糖-6-磷酸-2-激酶的作用。DTNB修饰的结果表明鸡肝pfk-2每亚基具有9个巯基。其中,在中性pH下可滴定的巯基数目为6个;在Fru6P存在下的可滴定巯基数为4个;而在ATP存在下的可滴定巯基数为7个。在修饰的过程中酶的活力随着被滴定的巯基数目的增加先是提高后为下降,但最后的酶仍不低于初始活力。NEMI对该酶活力的影响与DTNB的相似,它的修饰首先使酶活力升高,当巯基完全被修饰后的活力仍不低于初始活力。但是PCMB和碘代乙酸对该酶的活力影响很小。pH动力学结果显示该酶有1个pK^a为9.0的必需基团,它很可能是赖氨酸残基。PLP和苯乙二醛修饰pfk-2皆可导致该酶的失活。Fru6P对PLP的作用有强烈的保护,Fru2,6P2和Pi也有一定的保护作用,而ATP则稍有增加PLP对该酶的失活作用;苯乙二醛修饰的结果和PLP不同,Fru2,6P2有较强的保护作用,ATP有部分保护作用,Fru6P则对失活完全无保护作用。以上结果表明赖氨酸残基是鸡肝pfk-2与底物Fru2,6P2结合有关的必需残基,而精氨酸可能是该酶与产物Fru2,6P2结合有关的残基。

关键词：肝脏酶 pfk-2 巯基氨基酸残基

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果糖-6-磷酸-2-激酶的色氨酸残基的研究

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中国科学（B辑） 1991年第11期22卷 1155-1159页

作者：李林许根俊中国科学院上海生物化学研究所上海200031

NBS滴定pfk-2的紫外光谱的结果表明,该酶可滴定Trp残基数为4个其中2个是活性必需的。用295nm的紫外光激发果糖-6-磷酸-2-激酶(pfk-2),在335nm附近有较强的发射荧光。该荧光能较专一反映pfk-2的Trp基团的状态。底物果糖-6-磷酸对该荧光... 详细信息

NBS滴定pfk-2的紫外光谱的结果表明,该酶可滴定Trp残基数为4个其中2个是活性必需的。用295nm的紫外光激发果糖-6-磷酸-2-激酶(pfk-2),在335nm附近有较强的发射荧光。该荧光能较专一反映pfk-2的Trp基团的状态。底物果糖-6-磷酸对该荧光不影响,ATP引起荧光吸灭。最大吸灭幅度为30％左右。采用荧光滴定方法测定ATP与酶的结合,得出解离常数(K_i)在低浓度ATP时为0.033mmol/L,高度时为0.23mmol/L。表明该结合具有负协同性。Mg^(2+)、无机磷均降低ATP与酶的K_i值而表现为激活因子;果糖-6-磷酸和果糖-2,6-二磷酸酸对K_i值不影响。ATP结合后引起了该酶构象上的较大的变化。在ATP保护下,pfk-2对NBS的失活速度稍有增加。丙烯酰胺荧光滴定的结果是,在有无ATP时的Stern-Volmer常数(K_(SV))皆为4.0。

关键词： pfk-2 色氨酸残基协同性内源荧光

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