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Chinese Science Bulletin 2001年第24期46卷 2037-2042页

作者： SHEN Xianrong JI Dongmei HU Youqing JIA Fuxing DENG Xinxian WANG Ling CHU Zhiyong JIANG Dingwen LEI Chengxiang HUANG Jiansheng HU Xinran REN Darning School of Life Science Institute of GeneticsState Key Lab of Genetic EngineeringFudan UniversityShanghai 200433China Naval Medical Research Institute Shanghai 200433.China

Sequences encoding pf4 (58-70) and TSP1 (429-459) were linked to yield a single gene TSF which encodes the fuse-protein of TSF. The gene was cloned into a pGEX-2T expression vector to generate a protein GST-TSF, which was strongly expressed in E. coli. The purified GST-TSF was degraded with thrombin to generate the protein TSF. With the methods of MTT and wound repair assay, the effects of TSF on the proliferation and migration of EC were detected, respectively. The results showed that TSF significantly suppressed BAEC proliferation and migration in a dose-dependent manner. The fuse protein GST-TSF, and the peptides pf4 (58-70) and TSP1 (429-459) also inhibited BAEC proliferation and migration, respectively, but their inhibition rates were not as high as TSF. Using the CAM assay, it was shown that TSF, GST-TSF, pf4 (58-70) and TSP1 (429-459) inhibited angiogenesis in chick CAM potentially, the effect of TSF was the highest. In vivo, the growth of Lewis lung carcinoma was potently inhibited by TSF

关键词： fusion protein angiogenesis tumor therapy pf4 thrombodspondin-1 anti-angiogenesis.

乳腺浸润性导管癌患者血中pf4和VEGF表达临床意义分析

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中华肿瘤防治杂志 2014年第11期21卷 827-830页

作者：张文进李云涛袁洋耿翠芝河北医科大学第四医院外一科河北石家庄050011

目的：通过分析乳腺浸润性导管癌患者外周血中血小板因子4（plateletfactor，pf4）和血管内皮生长因子（vas-cularendothelialgrowthfactor，VEGF）的表达与临床病理特征的相关性，探讨其临床意义。方法：选取2012-05-01-2012-07-31河... 详细信息

目的：通过分析乳腺浸润性导管癌患者外周血中血小板因子4（plateletfactor，pf4）和血管内皮生长因子（vas-cularendothelialgrowthfactor，VEGF）的表达与临床病理特征的相关性，探讨其临床意义。方法：选取2012-05-01-2012-07-31河北医科大学第四医院外一科就诊的乳腺浸润性导管癌患者60例作为研究对象，选取同期30名健康女性作为对照。用酶联免疫吸附实验方法检测乳腺浸润性导管癌患者术前及对照组血清pf4和VEGF浓度，分析其表达程度与乳腺浸润性导管癌患者临床病理特征及两者之间的相关性。结果：乳腺浸润性导管癌患者血清pf4表达水平为（0．354±0．198）ng／mL，显著高于对照组的（0．225±0．436）ng／mL，差异有统计学意义，P=0．006；乳腺浸润性导管癌患者VEGF浓度为（15．458±15．819）pg／mL，显著高于对照组的（7．724±8．307）pg／mL，差异有统计学意义，P=0．046。乳腺浸润性导管癌患者组中，血清pf4为0．102～1．117ng／mL，VEGF为0．065～80．85pg／mL，pf4浓度随VEGF浓度的增高而升高，呈显著正相关，r=0．693，P=0．001。在健康对照组中，血清pf4为0．195～0．325ng／mL，血清VEGF为6．768～37．226ng／mL，血清pf4随VEGF浓度的增高而升高，呈显著正相关，r=0．677，P=0．001。有脉管瘤栓患者的血清pf4（0．233±0．089）ng／mL低于无脉管瘤栓者（0．396±0．209）ng／mL，P=0．009。乳腺浸润性导管癌患者血清pf4和VEGF表达与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移、组织学分化及ER、PR和HER-2蛋白表达无关。结论：血管生成相关因子pf4和vEGF在乳腺浸润性导管癌患者血清中明显升高，可以作为新的判断乳腺癌生物学行为的血清学标志。

关键词： pf4 VEGF乳腺浸润性导管癌血清学标志

口服携带人pf4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠的促造血重建作用

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中国生物工程杂志 2005年第2期25卷 12-13,15-18页

作者：闫凤英卢士红许子亮刘斌赵丽华梁琳慧宋忻杨发金韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:探索口服携带人pf4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠造血重建作用.方法:通过在大剂量化疗前/后喂服携带PIRES2-EGFP/pf4减毒沙门氏菌,检测化疗后小鼠的生存率,小鼠在不同时间外周血血常规、骨髓细胞数、骨髓中Sca-1和C-kit细胞... 详细信息

目的:探索口服携带人pf4基因的减毒沙门氏菌对大剂量化疗小鼠造血重建作用.方法:通过在大剂量化疗前/后喂服携带PIRES2-EGFP/pf4减毒沙门氏菌,检测化疗后小鼠的生存率,小鼠在不同时间外周血血常规、骨髓细胞数、骨髓中Sca-1和C-kit细胞含量、不同时间骨髓生成各系细胞的集落数等.结果:在大剂量化疗前、后均口服携带PIRES2-EGFP/pf4减毒沙门氏菌组小鼠生存率高于只在化疗前口服携带PIRES2-EGFP/pf4减毒沙门氏菌组;两组口服携带PIRES2-EGFP/pf4减毒沙门氏菌组小鼠存活率明显高于PBS对照组及携带空载体的减毒沙门氏菌组;口服携带PIRES2-EGFP/pf4减毒沙门氏菌组小鼠在化疗后第9～12天的外周血血小板数、骨髓细胞中Sca-1和C-kit阳性细胞含量明显比对照组高,第5天、9天、12天的骨髓细胞总数、骨髓细胞形成Mix集落数明显增加.结论:口服减毒沙门氏菌SL3261为载体的pf4基因可以保护小鼠免受损伤,并促进化疗损伤小鼠的造血恢复.

关键词：小鼠 pf4 携带减毒口服大剂量化疗骨髓细胞 EGFP 基因进化

Thrombosis after SARS-CoV2 infection or COVID-19 vaccination:will a nonpathologic anti-pf4 antibody be a solution?—A narrative review

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Journal of Bio-X Research 2022年第3期5卷 97-103页

作者： Elizabeth Rao Payal Grover Hongtao Zhang Department of Pathology and Laboratory Medicine Perelman School of MedicineUniversity of PennsylvaniaPhiladelphiaPAUSA

The coronavirus disease 2019(COVID-19)pandemic was triggered by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2),a previously unknown strain of *** fully understand the consequences and complications of SARS-CoV-2 infections,we have reviewed current literature on coagulation dysfunctions that are related to the disease and *** COVID-19 is more commonly considered as a respiratory illness,studies indicate that,in addition to respiratory illness,a coagulation dysfunction may develop in individuals after the initial infection,placing them at the risk of developing thrombotic *** who died of COVID-19 had higher levels of D-dimer,a biomarker for blood clot formation and *** treatments for coagulation dysfunctions are critically needed to improve patient *** the other hand,antibodies against platelet factor 4(pf4)/heparin may be found in patients with rare instances of vaccine-induced immunological thrombotic thrombocytopenia(VITT)following vaccination with adenovirus-based *** is characterized by atypical thrombosis and thrombocytopenia,similar to immune-mediated heparin-induced thrombocytopenia(HIT),but with no need for heparin to trigger the immune *** both adenovirus-based and mRNA-based vaccines express the Spike protein of SARS-CoV-2,VITT is exclusively related to adenovirus-based *** to the resemblance with HIT,the use of heparin is highly discouraged against treating patients with thrombotic thrombocytopenia after SARS-CoV-2 infection or with VITT after *** immunoglobulin therapy coupled with anticoagulation is recommended *** well-studied anti-pf4 monoclonal antibody RTO,which does not induce pathologic immune complexes in the presence of heparin and has been humanized for a potential treatment modality for HIT,may provide a nonanticoagulant HIT-specific solution to the problem of increased blood coagulation after SARS-CoV-2 infecti

关键词： antibody coagulation dysfunctions COVID-19 pf4 vaccine-induced immunological thrombotic thrombocytopenia

酶联免疫吸附法测定血浆BTG和pf4在临床的应用

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中华血液学杂志 1990年第4期11卷 172-174页

作者：张启良安部英

抗磷脂抗体综合症患者的t－PA抗原和血小板释放产物βTG、pf4的检测

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中国病理生理杂志 1996年第4期12卷 432+439-432+439页

作者：邓宇斌陈顺乐江尧湖鲍春德中山医科大学病理生理教研室上海第二医科大学附属仁济医院免疫科

抗磷脂抗体综合症患者的ｔ－ＰＡ抗原和血小板释放产物βＴＧ、ＰＦ４的检测上海第二医科大学附属仁济医院免疫科（上海２０００２１）邓宇斌，陈顺乐，江尧湖，鲍春德抗磷脂抗体综合症（ＡＰＳ）患者的临床表现之一是血栓形成，本室曾... 详细信息

抗磷脂抗体综合症患者的ｔ－ＰＡ抗原和血小板释放产物βＴＧ、ＰＦ４的检测上海第二医科大学附属仁济医院免疫科（上海２０００２１）邓宇斌，陈顺乐，江尧湖，鲍春德抗磷脂抗体综合症（ＡＰＳ）患者的临床表现之一是血栓形成，本室曾发现２５％的ＡＰＳ患者有血栓形成。...

关键词：患者血浆血小板 pf4 TG PA 抗原抗磷脂抗体综合症产物

pf4通过TLR4/NF-κB信号途径上调巨噬细胞MMP-9的表达

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PF4通过TLR4/NF-κB信号途径上调巨噬细胞MMP-9的表达

作者：何钒南华大学

学位级别：硕士

研究背景: 动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性病理发展过程,血管壁的炎症在动脉粥样硬化发病机制中具有重要作用。已有研究证据显示,早在动脉粥样硬化病变的初期,血小板作为一种炎性细胞,就参与引起血管内皮活化损伤等反应过程。血小板... 详细信息

研究背景: 动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性病理发展过程,血管壁的炎症在动脉粥样硬化发病机制中具有重要作用。已有研究证据显示,早在动脉粥样硬化病变的初期,血小板作为一种炎性细胞,就参与引起血管内皮活化损伤等反应过程。血小板因子4(pf4)是血小板活化后释放出的含量最多的蛋白之一,越来越多的研究证据表明,pf4参与动脉粥样硬化的进程。但由于至今未能确定pf4的特异性细胞表面受体,pf4在动脉粥样硬化中的具体作用机制还不十分清楚。TLR4是TOLL样受体家族成员之一,它在动脉粥样硬化斑块形成中发挥重要作用。研究发现,在人粥样斑块病变处TLR4存在高表达,并且证实,正是由于TLR4的识别功能,导致一系列与AS有关的细胞因子被合成释放,其中包括基质金属蛋白酶9(MMP-9)等。MMP-9在粥样硬化斑块处的血管重构、斑块的不稳定性及其破裂诱发的血管疾病中都起着很重要的作用,提示TLR4信号通路不仅激活动脉粥样硬化过程中的固有免疫反应,还参与血管重塑过程。本研究以THP-1源性巨噬细胞为观察对象,探讨pf4是否通过TLR4介导的信号途径来调节巨噬细胞MMP-9的表达,为血小板活化在动脉粥样硬化发生发展中的作用提供实验依据。目的: 通过观察pf4对巨噬细胞MMP-9表达影响,研究TLR4/NF-κB信号途径在pf4调节巨噬细胞MMP-9表达中的作用,以期探讨pf4对动脉粥样硬化斑块稳定性的可能影响。方法: 培养THP-1单核细胞,采用PMA诱导细胞分化为贴壁的巨噬细胞,无血清培养基同步化12小时后开始实验。 1.采用RT-PCR技术检测THP-1源性巨噬细胞MMP-9和TLR4mRNA的表达情况。 2.选择0 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml、200 ng/ml浓度的pf4处理细胞,RT-PCR技术检测MMP-9和TLR4mRNA的表达变化,Western Blotting技术检测MMP-9和TLR4蛋白的表达变化,ELISA技术检测NF-κB蛋白的表达变化。 3.观察TLR4阻断剂对pf4诱导THP-1源性巨噬细胞MMP-9表达的影响,RT-PCR和Western Blotting技术分别检测细胞MMP-9的mRNA和蛋白表达变化,ELISA技术检测NF-κB蛋白表达变化。 4.观察NF-κB阻断剂对pf4诱导THP-1源性巨噬细胞MMP-9表达的影响,RT-PCR技术检测细胞MMP-9mRNA表达变化。结果: THP-1源性巨噬细胞存在MMP-9和TLR4的表达;巨噬细胞MMP-9、TLR4和NF-κB的表达随着pf4处理浓度的升高而升高;TLR4阻断剂对pf4诱导巨噬细胞MMP-9表达有抑制作用;NF-κB阻断剂(PDTC)抑制pf4引起的巨噬细胞MMP-9高表达。结论: 1. pf4促进THP-1源性巨噬细胞MMP-9的表达;2. pf4可能通过TLR4/NF-κB信号途径上调巨噬细胞MMP-9的表达。

关键词：动脉粥样硬化巨噬细胞 pf4 TLR4 NF-κB MMP-9 阻断剂

pf4在apoE～（-/-）小鼠粥样斑块中的表达及其对TLR2的作用

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PF4在apoE～（-/-）小鼠粥样斑块中的表达及其对TLR2的作用

作者：彭茜南华大学

学位级别：硕士

作为脂质蓄积疾病,动脉粥样硬化却始终有炎症反应参与其中。血管壁的炎症在动脉粥样硬化发病机制中具有重要作用。近期的研究进展显示炎症确实是介导动脉粥样硬化各个时期病理发展的基础。值得注意的是Toll样受体家族成员构成动脉粥样... 详细信息

作为脂质蓄积疾病,动脉粥样硬化却始终有炎症反应参与其中。血管壁的炎症在动脉粥样硬化发病机制中具有重要作用。近期的研究进展显示炎症确实是介导动脉粥样硬化各个时期病理发展的基础。值得注意的是Toll样受体家族成员构成动脉粥样硬化炎症反应的重要组分。TLRs是在天然免疫信号传导以及触发炎症反应当中起到关键作用的一个受体家族。当相应的配体结合于该受体时会引起转录因子NF-κB活化,从而造成一系列炎症因子基因表达上调。最近的研究显示除了TLR4,TLR2在动脉粥样硬化斑块形成当中也发挥了重要作用。TLRs的配体,不论是微生物来源的还是炎症反应中存在或产生的,都可能参与了动脉粥样硬化病理过程。最近的研究关注血小板在动脉粥样硬化中的作用。血小板通过与炎症细胞相互作用而参与动脉粥样硬化发生发展过程。来源于血小板蛋白水解后的一种蛋白质,C-X-C细胞因子亚家族成员pf4可能参与动脉粥样硬化进程,近来许多研究都支持这种观点。Yu G等人的研究显示pf4促进内皮细胞表达炎症因子E选择素。pf4可能在某些炎症性疾病如动脉粥样硬化当中起到了联结血小板与内皮细胞、巨噬细胞的作用。本实验研究TLR2与pf4在apoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块中的表达情况,并通过细胞实验研究pf4对内皮细胞TLR2表达的影响。第一部分apoE-/-小鼠粥样斑块表达pf4及TLR2目的观察高脂饲养的apoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块表达pf4和TLR2的情况。方法高脂饲料喂养apoE-/-小鼠12周,建立动脉粥样硬化小鼠模型。安乐死处死动物,原位灌流,取主动脉于10%中性缓冲福尔马林中固定,石蜡包埋连续切片,HE染色观察动脉粥样硬化斑块形态,免疫组织化学检测斑块TLR2和pf4的表达。结果apoE-/-小鼠血脂水平明显增高,主动脉HE染色可见多种形态动脉粥样硬化病变。在apoE-/-小鼠主动脉富含脂质斑块当中TLR2表达上调,其中血管内皮细胞、巨噬细胞表达TLR明显增多。apoE-/-小鼠主动脉粥样斑块上也发现有pf4表达,主要表达在内皮细胞和斑块肩部。结论***-/-小鼠粥样斑块当中TLR2表达上调,且TLR2主要表达在斑块的内皮细胞、巨噬细胞上。2. apoE-/-小鼠粥样斑块中可见pf4表达。第二部分pf4对内皮细胞表达TLR2的调节作用目的观察细胞因子pf4对内皮细胞表达TLR2和炎症因子ICAM-1 mRNA表达的调节作用。方法用人重组细胞因子pf4刺激人脐静脉内皮细胞株,通过RT-PCR检测TLR2、ICAM-1mRNA水平,用Western blotting检测TLR2蛋白水平。细胞免疫组化方法检测pf4刺激后细胞表达TLR2的阳性细胞数。Western blotting检测pf4刺激后的人脐静脉内皮细胞株核蛋白NF-κB表达情况。结果pf4刺激人脐静脉内皮细胞株后促进TLR2mRNA和蛋白表达,pf4的拮抗剂肝素不能抑制这种作用。pf4促进人脐静脉内皮细胞株转录因子NF-κB活化以及炎症因子ICAM-1mRNA表达。结论pf4促进人脐静脉内皮细胞株表达TLR2,引起转录因子NF-κB活化,炎症因子ICAM-1mRNA水平上调

关键词：受体血小板动脉粥样硬化 pf4 TLR2 内皮细胞

hpf4 mRNA表达、血浆pf4水平与甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的关系

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肿瘤防治研究 2010年第2期37卷 162-164页

作者：陈一峰张白凌黄云鹏连云宗福建医科大学附属泉州第一医院病理科福建泉州362000 福建医科大学口腔系福建医科大学附属泉州第一医院普外科福建医科大学附属泉州第一医院检验科

目的探讨hpf4 mRNA表达、血浆pf4水平与甲状腺乳头状癌(PTC)颈部淋巴结转移的关系。方法应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测40例PTC癌组织和10例癌旁正常组织hpf4 mRNA的表达,并用酶标记免疫分析法(ELISA)测定40例PTC患者、20例健... 详细信息

目的探讨hpf4 mRNA表达、血浆pf4水平与甲状腺乳头状癌(PTC)颈部淋巴结转移的关系。方法应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测40例PTC癌组织和10例癌旁正常组织hpf4 mRNA的表达,并用酶标记免疫分析法(ELISA)测定40例PTC患者、20例健康体检者(对照组)的血浆pf4水平。结果(1)PTC癌组织hpf4 mRNA阳性表达率分别为47.5%,明显低于正常组织(80%)(Ppf4 mRNA阳性表达PTC组的颈部淋巴结转移率均明显低于hpf4阴性表达PTC组(36.84%vs.90.48%,Ppf4血浆浓度呈线性递减趋势,其中无淋巴结转移组的pf4血浆浓度[(2.96±0.21)ng/ml]高于转移组[(0.98±0.17)ng/ml](Ppf4 mRNA阳性表达PTC组的血浆pf4水平明显高于hpf4阴性表达组[(2.49±0.83)ng/mlvs.0.94±0.13)ng/ml](Ppf4水平的下调可能是导致或助推PTC发生颈部淋巴结癌转移的成因之一。

关键词：甲状腺肿瘤 pf4 mRNA 淋巴结转移

新血府逐瘀汤与血府逐瘀汤对动脉粥样硬化大鼠PAF、pf4的比较研究

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新血府逐瘀汤与血府逐瘀汤对动脉粥样硬化大鼠PAF、PF4的比较研究

作者：袁海健山东中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过动物实验研究,从抗血小板聚集的角度,探讨新血府逐瘀汤与血府逐瘀汤功效的差异,为新血府逐瘀汤临床使用提供更多的依据。方法:选用雄性Wistar大鼠40只,每组10只,分成空白组、模型组、血府逐瘀汤组、新血府逐瘀汤组。空白组给... 详细信息

目的:通过动物实验研究,从抗血小板聚集的角度,探讨新血府逐瘀汤与血府逐瘀汤功效的差异,为新血府逐瘀汤临床使用提供更多的依据。方法:选用雄性Wistar大鼠40只,每组10只,分成空白组、模型组、血府逐瘀汤组、新血府逐瘀汤组。空白组给予普通饲料,其余各组给予高脂饲料。饲喂高脂饲料大鼠于实验第1、4、10天腹腔注射维生素D3注射液,空白组给予等体积的生理盐水腹腔注射。实验第1天开始使用中药,血府逐瘀汤组每天给予血府逐瘀汤10ml/Kg灌胃;新血府逐瘀汤组每天给予新血府逐瘀汤10ml/kg灌胃;空白组、模型组每天给予蒸馏水10ml/kg灌胃。每周称重一次,根据体重变化调整中药剂量,实验共计8周。第9周,所有老鼠禁食、禁水,使用10%水合氯醛4.5ml/kg腹腔注射麻醉所有大鼠,在腹主动脉取血5ml,静置30分钟,离心后,采用酶联免疫法测量大鼠血清PAF、pf4含量。取大鼠胸主动脉血管,经冲洗、浸泡、固定、染色等处理,光镜下观察主动脉内膜变化,并测量内膜厚度。结果:血府逐瘀汤组、新血府逐瘀汤组PAF、pf4含量均低于模型组,Ppf4含量,新血府逐瘀汤组低于血府逐瘀汤组,P>0.05。与空白组比较,模型组的主动脉内膜厚度明显增加,P0.05。结论:血府逐瘀汤、新血府逐瘀汤都可以降低动脉硬化大鼠血清PAF、pf4含量,抑制血小板的聚集,新血府逐瘀汤在抑制PAF方面效果优于血府逐瘀汤,新血府逐瘀汤对抑制血小板聚集可能更有优势。

关键词：血府逐瘀汤新血府逐瘀汤动脉粥样硬化 PAF pf4