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制备单克隆抗体检测pes1的表达

细胞与分子免疫学杂志 2012年第2期28卷 174-176,180页

作者：李杰萍庄庆仁兰小鹏曾国彬罗小锋叶棋浓武警福建总队医院检验科南京军区福州总医院检验医学研究所福建福州350003

目的:制备pes1单克隆抗体(mAb)并用所制备的抗体检测pes1在多种肿瘤细胞中的表达及其在成年大鼠不同组织中的表达分布。方法:纯化GST-pes1(1-322aa)融合蛋白后注入小鼠进行免疫,经过细胞融合、筛选以及用Western blot进行特异性鉴定后获... 详细信息

目的:制备pes1单克隆抗体(mAb)并用所制备的抗体检测pes1在多种肿瘤细胞中的表达及其在成年大鼠不同组织中的表达分布。方法:纯化GST-pes1(1-322aa)融合蛋白后注入小鼠进行免疫,经过细胞融合、筛选以及用Western blot进行特异性鉴定后获得mAb。再用制备的mAb检测pes1在不同的人肿瘤细胞和大鼠不同组织中的表达。结果:所制备的pes1 mAb能特异地识别pes1。用所制备的mAb检测发现,在所检测的人乳腺癌、卵巢癌、肝癌以及肺癌等细胞中均有不同程度的表达;pes1类似物pescadillo在大鼠的乳腺和卵巢组织中表达,但在其他组织中没有被检测到。结论:成功地制备了pes1的mAb。pes1可能与肿瘤的发生发展有一定的关系;由于pes1明显表达于雌激素重要的靶器官,所以可能参与雌激素信号通路。

关键词： pes1 单克隆抗体基因表达

pes1 promotes the occurrence and development of papillary thyroid cancer by upregulating the ERα/ERβ protein ratio

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PES1 promotes the occurrence and development of papillary th...

中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议

作者： Yi-Bo Qiu Ling-Yao Liao Rong Jiang Man Xu Lin-Wan Xu George G.Chen Zhi-Min Liu Department of Biochemistry and Molecular Biology Chongqing Medical University Department of Pathology Molecular Medicine and Cancer Research CenterChongqing Medical University Department of Surgery Chinese University of Hong KongPrince of Wales Hospital

Estrogen has been suggested to play a role in the occurrence and development of papillary thyroid cancer(PTC).The balance and the ratio between ERα and ERβ protein are crucial in determining the effect of estrogen on target tissues and ***1,a BRCT domain-containing protein,has been shown to play a role in modulating the balance and the ratio between ERα and ERβ protein,which is associated with the occurrence and development of breast and ovarian ***,the role of pes1 in connection with the balance and the ratio between ERα and ERβ protein in the occurrence and development of PTC remains *** this study,pes1 protein level in human PTC tissues and cells was examined using immunohistochemistry and Western blotting,*** correlations of pes1 protein level with ERα and ERβ protein levels,with various clinicopathological features of PTC patients,with the ERα/ERβ protein ratio and the proliferation,invasion and migration of PTC cells were assessed using statistical *** results showed that ERα and ERβ were co-expressed in human PTC tissues and ***α promoted and ERβ inhibited the proliferation,invasion and migration of PTC cells and a Yin-Yang balance existed between ERα and ERβ.pes1 modulated this Yin-Yang balance by elevating ERα and reducing ERβ protein level,then upregulating the ERα/ERβ protein ratio and promoting the proliferation,invasion and migration of PTC *** PTC tissues,pes1 protein level positively correlated with ERα(rs = 0.549,P 1) and negatively correlated with ERβ protein level(rs =-0.353,P 1).pes1 and ERα protein levels were gradually increased and ERβ protein level was decreased by degree in the occurrence and development of *** pes1 and ERα and decreased ERβ protein levels correlated with aggressive PTC behaviors such as large tumor size,extrathyroidal extension(ETE),lymph node metastasis(LNM) and high TNM *** was suggested that pes1 promotes the occurrence and development of P

关键词： pes1 ERα ERβ papillary thyroid cancer

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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pes1对雌激素受体转录活性的调节作用

基础医学与临床 2012年第11期32卷 1298-1301页

作者：李杰萍庄庆仁兰小鹏曾国彬罗小锋武警福建总队医院检验科南京军区福州总医院检验医学研究所

目的探讨pes1与雌激素受体(ER)的相互作用及其对ER转录活性的影响。方法将体外翻译的pes1与纯化的GST-ERα和GST-ERβ蛋白分别混合,用GST pull-down验证在体外pes1与ERα和ERβ是否存在相互作用。将HA-pes1与FLAG-ERα或FLAGC-ERβ共转... 详细信息

目的探讨pes1与雌激素受体(ER)的相互作用及其对ER转录活性的影响。方法将体外翻译的pes1与纯化的GST-ERα和GST-ERβ蛋白分别混合,用GST pull-down验证在体外pes1与ERα和ERβ是否存在相互作用。将HA-pes1与FLAG-ERα或FLAGC-ERβ共转染293T细胞后进行免疫共沉淀,以验证pes1与ER是否在体内有相互作用。用含雌激素受体作用元件的荧光素酶报告基因检测pes1对ERα和ERβ转录活性的影响。结果 pes1与ERα、ERβ在体内外均存在相互作用,而且pes1与ERα的结合比与ERβ的强。在体内,在雌激素(E2)存在下,E2可以增强pes1与ERα的结合,而对pes1与ERβ的结合没有明显影响。pes1对ER转录活性的影响是E2依赖性的,pes1能升高ERα的转录活性而降低ERβ的转录活性(P1)。结论 pes1是一种新的ER共调节因子,能反向调节ERα和ERβ的转录活性,需要进一步研究的是其在ER信号通路以及在E2诱发的肿瘤发生发展中的作用。

关键词： pes1 雌激素受体卵巢肿瘤转录活性

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pes1与雌激素受体存在相互作用

中国生物工程杂志 2012年第8期32卷 14-18页

作者：李杰萍庄庆仁兰小鹏曾国彬罗小锋武警福建总队医院福州350003 南京军区福州总医院检验医学研究所福州350003

雌激素(E2)和雌激素受体(ER)在E2诱发的肿瘤中起着极其重要的作用。ER共调节因子通过与ER相互作用调节其生物学功能。pes1主要表达于E2的重要靶器官如乳腺、卵巢等组织中,并在乳腺癌细胞中高表达。用PCR技术构建HA标签的pes1全长以及1～... 详细信息

雌激素(E2)和雌激素受体(ER)在E2诱发的肿瘤中起着极其重要的作用。ER共调节因子通过与ER相互作用调节其生物学功能。pes1主要表达于E2的重要靶器官如乳腺、卵巢等组织中,并在乳腺癌细胞中高表达。用PCR技术构建HA标签的pes1全长以及1～322aa、312～588aa和414～588aa三个不同功能区片段的重组质粒。将不同的重组质粒与FLAG-ERα和或FLAGC-ERβ共转染293T细胞后进行免疫共沉淀,以验证pes1与ER是否有相互作用以及相互作用的区域。用含雌激素受体作用元件的荧光素酶报告基因(ERE-LUC)检测pes1对ERα和ERβ转录激活活性的影响。结果表明,pes1与ERα和ERβ均相互作用,且pes1的1～322aa区域与ERα和ERβ相结合。pes1能特异地、E2非依赖性抑制ERβ的转录激活活性。实验结果显示,pes1是一个新的ER共调节因子,需要进一步研究其在ERβ信号通路及其在E2诱发的肿瘤的作用。

关键词： pes1 雌激素受体共调节因子

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敲低pes1基因抑制舌癌细胞的生长

军事医学 2015年第1期39卷 40-43页

作者：任伟程龙杜佩云姜丽娜营孙阳林佳佳张菊会叶棋浓王恩群安徽医科大学附属安庆市立医院口腔颌面外科安徽安庆246003 军事医学科学院生物工程研究所北京100850

目的构建稳定表达pes1 shRNA的舌癌细胞系,研究敲低pes1基因对舌癌细胞生长的影响。方法在293T细胞中包装并获得敲低pes1基因的病毒,然后将病毒感染Tca8113、SCC6和SCC15 3种舌癌细胞并筛选稳定克隆,Western印迹检测pes1蛋白的表达水平... 详细信息

目的构建稳定表达pes1 shRNA的舌癌细胞系,研究敲低pes1基因对舌癌细胞生长的影响。方法在293T细胞中包装并获得敲低pes1基因的病毒,然后将病毒感染Tca8113、SCC6和SCC15 3种舌癌细胞并筛选稳定克隆,Western印迹检测pes1蛋白的表达水平;利用生长曲线检测敲低pes1对舌癌细胞生长的影响,流式细胞术检测敲低pes1对舌癌细胞周期的影响。结果成功构建稳定表达pes1 shRNA的舌癌细胞系,敲低pes1基因能够抑制舌癌细胞的生长,使细胞周期阻滞在G0/G1期,敲低pes1抑制cyclin D1的表达。结论敲低pes1抑制舌癌细胞的生长,诱导细胞周期阻滞在G0/G1期,抑制cyclin D1的表达,因此pes1可能成为舌癌基因治疗的靶标。

关键词： pes1 舌肿瘤细胞生长细胞周期细胞周期蛋白D1

人颅内星形细胞瘤pes1的表达及与患者生存的关系

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中华显微外科杂志 2009年第6期32卷 512-514页

作者：陈昆刘金龙杨超林佳平金华伟黄正松中山大学附属第一医院神经外科广州510080

目的研究pes1在人颅内星形细胞瘤中的表达情况及其与患者生存预后的关系。方法用免疫组化方法对171例显微外科手术切除的星形细胞瘤病理切片标本进行pes1表达的检测并结合临床随访资料研究其与患者生存预后的关系。结果正常脑组织中未见... 详细信息

目的研究pes1在人颅内星形细胞瘤中的表达情况及其与患者生存预后的关系。方法用免疫组化方法对171例显微外科手术切除的星形细胞瘤病理切片标本进行pes1表达的检测并结合临床随访资料研究其与患者生存预后的关系。结果正常脑组织中未见pes1表达，星形细胞瘤中细胞核内可见pes1阳性染色，其总阳性率为95．3％。pes1的表达水平与星形细胞瘤的WHO分级显著相关（P〈0．01）。pes1低表达患者平均生存时间49．2个月．中位生存时间42个月；pes1高表达患者平均生存时间24．3个月，中位生存时间17个月．LogRank法检验结果显示差异有统计学意义（P〈0．01）。Cox多元回归分析结果显示星形细胞瘤低级别和pes1低表达是星形细胞瘤患者生存率高的独立保护因素。而性别、年龄这两个因子与生存预后无关。结论pes1在人颅内星形细胞瘤中普遍表达．其表达水平与星形细胞瘤的级别和患者生存预后明显相关。

关键词： pes1 星形细胞瘤显微外科手术预后

pes1在卵巢癌中的表达及其对内皮生长因子的影响

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重庆医学 2013年第27期42卷 3211-3213页

作者：江絮萍叶泓武警福建总队医院妇产科福州350003

目的探讨pes1在卵巢癌中的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系。方法用蛋白印迹法检测pes1在卵巢癌组织以及相应的癌旁组织中的表达。结果肿瘤组织中pes1的表达水平明显高于相应的癌旁组织。转染FLAG-pes1的CAOV-3和ES-2细胞... 详细信息

目的探讨pes1在卵巢癌中的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系。方法用蛋白印迹法检测pes1在卵巢癌组织以及相应的癌旁组织中的表达。结果肿瘤组织中pes1的表达水平明显高于相应的癌旁组织。转染FLAG-pes1的CAOV-3和ES-2细胞培养液的VEGF分泌量分别由(178.0±11.8)pg/mL和(309.5±18.5)pg/mL上升到(375.0±18.3)pg/mL和(633.2±25.7)pg/mL,VEGF分泌量明显升高(P1);而且VEGF相对mRNA水平也分别上升了约1.8倍和2倍(P1);蛋白印迹法结果表明,pes1过表达能升高这2种细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。荧光素酶报告基因的转录激活活性检测表明,pes1对调节VEGF的转录没有直接影响。将HIF-1αSiRNA与FLAG-pes1共转染CAOV-3和ES-2细胞后,蛋白印迹法结果表明,HIF-1αSiRNA能明显抑制pes1引起的HIF-1α升高,同时VEGF的分泌量和mRNA水平也被明显抑制。结论 pes1在卵巢癌组织中表达明显升高。

关键词：卵巢肿瘤血管内皮生长因子A 缺氧诱导因子1α亚基 pes1

pes1通过PI3K/AKT/GSK-3β信号通路对胆汁淤积性肝病小鼠的作用

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安徽医科大学学报 2019年第10期54卷 1511-1515页

作者：杨仁俊汪婧孙颉张娜孔德润安徽医科大学第一附属医院消化内科

目的探讨pescadillo同源蛋白1(pes1)以及PI3K/AKT/GSK-3β信号通路中的蛋白在胆汁淤积性肝病小鼠中的表达及其对疾病的影响。方法利用喂食3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶(DDC)的C57BL/6为实验组,正常喂饲的C57BL/6为对照... 详细信息

目的探讨pescadillo同源蛋白1(pes1)以及PI3K/AKT/GSK-3β信号通路中的蛋白在胆汁淤积性肝病小鼠中的表达及其对疾病的影响。方法利用喂食3,5-二乙氧基羰基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基吡啶(DDC)的C57BL/6为实验组,正常喂饲的C57BL/6为对照组。首先测试小鼠血清中生化指标的水平。Western blot法检测小鼠肝脏pes1和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/AKT)/糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路中蛋白的表达,同时采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测pes1 mRNA的表达水平。结果血清中总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(AKP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平在胆汁淤积性肝病小鼠中高于对照组。pes1 mRNA和蛋白水平在胆汁淤积性肝病小鼠中均低于正常组小鼠,PI3K/AKT/GSK-3β信号通路中的磷酸化蛋白水平在胆汁淤积性肝病小鼠均明显低于对照组小鼠。结论pes1在胆汁淤积性肝病小鼠中低表达,降低的pes1使PI3K/AKT/GSK-3β信号通路失活,使其信号通路中PI3K和AKT的磷酸化蛋白水平依次降低,最终下调了磷酸化GSK-3β的表达,使磷酸化GSK-3β对肝细胞凋亡的抑制、减轻细胞损伤的作用减弱,进而加重了胆汁淤积性肝病的进程。

关键词： pes1 胆汁淤积性肝病 DDC模型小鼠 PI3K/AKT/GSK-3β信号通路

雌激素在乳腺癌细胞中通过雌激素受体-ɑ调节pes1的表达及其稳定性的体外实验研究

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现代肿瘤医学 2022年第24期30卷 4426-4432页

作者：梁宏青海大学医学院基础医学部青海西宁810016

目的:阐明pes1在乳腺癌细胞株中的表达情况以及pes1与雌激素受体-ɑ(estrogen receptor-ɑ,ER-ɑ)的关系。方法:培养不同的乳腺癌细胞系BICR、ZR75,采用免疫荧光法检测pes1的表达及定位,并通过顺势转染RNA干扰技术抑制pes1的表达,利用... 详细信息

目的:阐明pes1在乳腺癌细胞株中的表达情况以及pes1与雌激素受体-ɑ(estrogen receptor-ɑ,ER-ɑ)的关系。方法:培养不同的乳腺癌细胞系BICR、ZR75,采用免疫荧光法检测pes1的表达及定位,并通过顺势转染RNA干扰技术抑制pes1的表达,利用平板克隆形成实验和MTT实验检测细胞的生长增殖表型改变。同时,用不同浓度梯度及不同时间点的雌激素刺激相关乳腺癌细胞,用蛋白印迹法检测pes1的蛋白表达水平。最后,利用雌激素刺激上述细胞并通过RNA干扰抑制ER-ɑ后,使用蛋白印迹法检测pes1蛋白表达水平,同时,在放线菌酮的作用下,进一步检测乳腺癌细胞中pes1与ER-ɑ之间的相关性和稳定性,并进一步检测ER-ɑ对pes1的泛素化水平的影响。结果:我们通过免疫荧光发现pes1在几种乳腺癌细胞中均表达,并进一步证明干扰pes1可以抑制乳腺癌细胞克隆的形成及生长。此外,我们在乳腺癌细胞中发现雌激素主要通过其受体ER-ɑ提高pes1的蛋白水平,进一步发现雌激素对pes1转录的影响并不明显,而可能是通过ER-ɑ影响pes1的泛素化水平进而增强pes1蛋白的稳定性。结论:对于乳腺癌细胞,内源性ER-ɑ和pes1在乳腺癌的发生发展中相互协调发挥着重要作用。

关键词：雌激素雌激素受体-ɑ pes1 稳定性乳腺癌