检索结果-南通市图书馆

中国预防兽医学报 2023年第5期45卷 502-509页

作者：陈凡若党光辉张嘉俊鹿萍崔宁崔莹莹崔子寅刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病创新团队黑龙江哈尔滨150069

结核分枝杆菌(MTB)pe/Ppe家族蛋白介导MTB与宿主间的相互作用,调节宿主炎症反应,有助于其的存活和疾病发展。为研究pe/Ppe家族中pe26蛋白的作用,本实验利用PCR扩增pe26基因片段,构建重组载体p AIN-pe26,转化耻垢分枝杆菌(Ms)构建重组菌p... 详细信息

结核分枝杆菌(MTB)pe/Ppe家族蛋白介导MTB与宿主间的相互作用,调节宿主炎症反应,有助于其的存活和疾病发展。为研究pe/Ppe家族中pe26蛋白的作用,本实验利用PCR扩增pe26基因片段,构建重组载体p AIN-pe26,转化耻垢分枝杆菌(Ms)构建重组菌p AIN-pe26/Ms,经western blot鉴定结果显示,p AIN-pe26/Ms正确表达重组pe26蛋白(rpe26)。利用差速离心分离p AIN-pe26/Ms亚细胞组分,经western blot鉴定结果显示,r pe26定位于p AIN-pe26/Ms细胞壁。通过p AIN-pe26/Ms的菌落形态观察和生长曲线测定,结果显示,p AIN-pe26/Ms菌体表面较p AIN/Ms对照组更粗糙,脊不规则且相对较高,褶皱不明显;p AIN-pe26/Ms生长速度较对照组极显著增加(Ppe26转录水平,结果显示,H37Ra感染巨噬细胞后pe26转录水平极显著增加(Ppe26/Ms感染巨噬细胞,分别通过q RT-PCR、ELISA检测细胞因子转录和表达水平,采用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性试验、流式细胞术和胞内定殖的方法检测细胞毒性,结果显示,p AIN-pe26/Ms促进宿主细胞炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-12和TNF-α)的转录和表达(Ppe26促进巨噬细胞死亡,且在感染48 h时促进细胞早期凋亡(Ppe26促进p AIN-pe26/Ms在巨噬细胞内的定殖(Ppe26在感染巨噬细胞过程中促进p AIN-pe26/Ms的生长、炎性细胞因子的转录和表达、巨噬细胞凋亡和胞内定殖。本实验为解析pe26参与分枝杆菌的致病机制和MTB调节宿主免疫反应的机制提供一定参考依据。

关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞 pe/Ppe家族蛋白 pe26

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