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基于微全分析系统pcr基因芯片的光谱检测技术研究

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基于微全分析系统PCR基因芯片的光谱检测技术研究

作者：古冬冬北京工业大学

学位级别：硕士

微型全分析系统(Miniaturized Total Analysis System,μTAS)又称芯片实验室(lab on a chip, LOC)是将生化分析的许多过程与步骤,即生化分析实验室的“功能集成结构缩微”在100毫米见方左右(或更小)的芯片上,具有检测速度快、试样用量... 详细信息

微型全分析系统(Miniaturized Total Analysis System,μTAS)又称芯片实验室(lab on a chip, LOC)是将生化分析的许多过程与步骤,即生化分析实验室的“功能集成结构缩微”在100毫米见方左右(或更小)的芯片上,具有检测速度快、试样用量少、通量高等显著的特点。目前常见的生物芯片分为两大类:微阵列芯片与微流控芯片。检测系统是芯片的关键之一。光谱检测由于其具有良好的选择性、较宽的线性范围、微量定性定量分析和非破坏性检测等特点,已逐渐成为该领域研究中应用最广泛,灵敏度最高的检测技术之一。因此符合“功能集成和结构缩微”理念的光谱检测系统研究,也已成为近年来世界各国研究并急求解决的热点课题。从目前的国内外相关研究发展现状看,都处在初级探索研究阶段。本论文针对在上述两大类生物芯片中具有代表性的,并基于聚合酶链(pcr)反应技术基因芯片的光谱检测技术,展开了相关研究,为进一步的“功能集成和结构缩微”研究建立了基础。针对微流控pcr基因芯片的荧光光谱检测技术,展开了下列研究:建立了一套微流控微通道动态检测系统,其意义在于:在生物微流控pcr荧光芯片使用时,对生物分析结果进行检测;在光谱检测微型化与集成化研究中,提供实验基础。同时在制备芯片时,为了优化最佳制作工艺参数,研究了激光制备微流控芯片工艺研究的生物pcr荧光分析方法。为了保证该荧光分析方法在芯片生产工艺和质量检验的量值统一,研究了生物pcr荧光分析标准比对模板。为了使微流控荧光pcr扩增循环的实际流速与理论设计流速吻合,保证芯片分析检验全过程的准确完成,研究了荧光测控流速系统。“荧光实时测控速系统”的实时测控速功能,是目前国内外有关文献中描述的几种微流体流速测量方法做不到的。针对微阵列纳米探针pcr基因芯片的可见光度法光谱检测技术,展开了下列研究:根据微阵列纳米探针pcr基因芯片光谱检测特点,研究了提高生物芯片上纳米探针“双光放大法”沉淀物的可见光度法光谱检测分辨率的工艺,获得检测高分辨率和研发使用的系统方案。使用半导体发光材料和光学导光系统以及包括准分子激光在内的激光微细处理加工技术,设计研发了薄板高均匀性散射平面光源系统。

关键词：微型全分析系统 pcr基因芯片光谱检测微流控芯片荧光检测微阵列芯片可见光度光谱检测

TNF-α对大鼠下丘脑原代细胞不同神经递质受体的影响分析

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基因组学与应用生物学 2019年第8期38卷 3486-3497页

作者：夏九成龙廷卢汀秦达念四川省攀枝花学院生物与化学工程学院攀枝花617000 广东省汕头大学医学院生理教研室汕头515041

本研究利用pcr基因芯片,通过荧光定量pcr检测分析肿瘤坏死因子TNF-α对离体培养的大鼠下丘脑原代细胞不同神经递质受体的影响,以研究TNF-α对神经内分泌系统的影响。研究结果,发现后叶加压素1A受体(Avpr1a)、γ-氨基丁酸受体1 (Gabrr1)... 详细信息

本研究利用pcr基因芯片,通过荧光定量pcr检测分析肿瘤坏死因子TNF-α对离体培养的大鼠下丘脑原代细胞不同神经递质受体的影响,以研究TNF-α对神经内分泌系统的影响。研究结果,发现后叶加压素1A受体(Avpr1a)、γ-氨基丁酸受体1 (Gabrr1)、离子型谷氨酸受体1 (Grin1)、5-羟色胺受体4 (Htr4)和转位蛋白(Tspo) 5个基因的表达有显著提高。另外肾上腺素能β2受体(Adrb2)、胆囊收缩素B受体(Cckbr)、毒蕈碱亚型胆碱能受体5 (Chrm5)、烟碱亚型胆碱能受体6 (Chrna6)、γ-氨基丁酸受体5,6 (Gabra5, Gabra6)、代谢型谷氨酸受体8 (Grm8)、5-羟色胺受体2c,3a (Htr2c, Htr3a)、生长抑素受体1 (Sstr1)和速激肽受体1(Tacr1) 11个基因的表达有明显下降。其中最为明显的是对离子型谷氨酸受体1 (Grin1)和速激肽受体1(Tacr1)的影响,分别是提高了3.12和降低了2.76。由此可见,TNF-α可以通过特定的信号传导途径调节下丘脑细胞中多种神经递质受体的转录表达水平,以改变神经元细胞对相应递质分子的应答水平和兴奋性,从而影响下丘脑组织内多种内分泌激素的释放量,并最终影响大鼠的神经内分泌功能。

关键词： pcr基因芯片肿瘤坏死因子TNF-α 下丘脑原代细胞神经递质受体

甲状腺乳头状癌合并桥本甲状腺炎免疫微环境分析

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甲状腺乳头状癌合并桥本甲状腺炎免疫微环境分析

作者：谷寅天津医科大学

学位级别：硕士

目的分析桥本甲状腺炎(HT)合并甲状腺乳头状癌(PTC)的免疫微环境,探讨免疫因素对甲状腺乳头状癌发生发展的作用及机制。方法:收集PTC合并HT患者甲状腺肿瘤组织标本3例作为实验组,并收集单纯HT患者甲状腺标本及单纯PTC患者甲状腺肿瘤标本... 详细信息

目的分析桥本甲状腺炎(HT)合并甲状腺乳头状癌(PTC)的免疫微环境,探讨免疫因素对甲状腺乳头状癌发生发展的作用及机制。方法:收集PTC合并HT患者甲状腺肿瘤组织标本3例作为实验组,并收集单纯HT患者甲状腺标本及单纯PTC患者甲状腺肿瘤标本各3例作为对照组,应用pcr基因芯片技术检测并比较84种重要细胞因子及趋化因子的基因表达差异,并分析其对PTC的作用及影响。结果:1、HT合并PTC在与单纯PTC比较中,共检测出12种基因表达显著上调(P基因表达显著下调(P基因表达显著上调(P基因。***组与单纯PTC组相比较,CXCL13、IL16、CCL19、IL7在HT组中表达增高且差异显著(P<0.05),IL23A、CCL24、BMP2、LIF、PPBP、IL8、CXCL2在PTC组中表达增高且差异显著(P<0.05)。结论:1、PTC合并HT与单纯HT及PTC的免疫微环境存在差异。2、HT合并PTC组织中趋化因子CCL19和细胞因子CD40LG、IL24、LTA、TNFSF11表达增加,可能有抑制肿瘤的作用。3,PTC组织中趋化因子CXCL2和细胞因子IL8、LIF、IL6的表达可能有促进肿瘤的发生发展的作用,其机制仍需进一步研究。

关键词：甲状腺乳头状癌桥本甲状腺炎细胞因子趋化因子免疫微环境 pcr基因芯片

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pcr在畜禽疫病诊断上的应用及研究进展

动物医学进展 2004年第3期25卷 22-24页

作者：涂健祁克宗潘鑫安徽农业大学畜牧水产学院安徽合肥230036 安徽省农委畜牧局安徽合肥230001

pcr技术是一门非常实用的分子生物学新技术。其特点在于敏感性强、特异性高。它在兽医临床诊断中尤其适用于那些培养困难和抗原性复杂的细菌的检测鉴定 ;诊断在基因上具有同源相似性的多重病毒感染 ;并应用于研究支原体 ,螺旋体等其它... 详细信息

pcr技术是一门非常实用的分子生物学新技术。其特点在于敏感性强、特异性高。它在兽医临床诊断中尤其适用于那些培养困难和抗原性复杂的细菌的检测鉴定 ;诊断在基因上具有同源相似性的多重病毒感染 ;并应用于研究支原体 ,螺旋体等其它致病微生物引起的疾病。pcr技术敏感性极高 ,因此在实际操作中容易出现假阳性现象 ,同时存在产物不易纯化 ,操作步骤繁琐、耗时较多等缺陷 ,针对这些问题 ,最近出现了固相 pcr、pcr-EL ISA液相杂交技术、实时 Taq Man-pcr技术、pcr基因芯片、DNA芯片 ,这些 pcr技术新的进展有效的克服了 pcr技术的不足。随着研究的深入 ,未来pcr技术将会作为实验室常规的检测技术广泛应用于诊断病原、肿瘤细胞监测、基因表达。

关键词： pcr技术畜禽疫病诊断固相pcr pcr—ELISA液相杂交技术实时TaqMan—pcr技术 pcr基因芯片 DNA芯片

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转基因水稻检测方法的研究进展

生物技术通报 2006年第5期22卷 58-61页

作者：李伟丰杨朗广西出入境检验检疫局广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室南宁530007

近年来,转基因作物在全球得到了迅猛发展,1988年第一批水稻转基因植株问世以来,各国科学家在水稻转基因研究领域取得了一系列成果,而对转基因水稻及其产品的检测,也成为世界各国公众关心的热点,从pcr法、基因芯片法等讨论转基因水稻的... 详细信息

近年来,转基因作物在全球得到了迅猛发展,1988年第一批水稻转基因植株问世以来,各国科学家在水稻转基因研究领域取得了一系列成果,而对转基因水稻及其产品的检测,也成为世界各国公众关心的热点,从pcr法、基因芯片法等讨论转基因水稻的检测方法的研究进展,让读者对转基因水稻检测方法有初步的认识和了解,对开展转基因水稻检测的研究工作有一定的参考价值。

关键词：转基因水稻检测方法 pcr基因芯片