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pc3-gfp动物模型的建立及CTC检测研究

PC3-GFP动物模型的建立及CTC检测研究

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第十次全国中西医结合男科学术大会、第六次广西中医、中西医结合男科学术大会、全国中西医结合男科疾病诊疗新进展学习班

作者：钱小强顾正勤齐隽白强上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科

目的:对pc3细胞进行gfp转染,建立pc3-gfp(+)的裸鼠动物模型,并检测CTC,为前列腺癌肿瘤细胞转移研究提供有用的工具。材料与方法:对pc3细胞应用质粒进行gfp转染,并进行单克隆、G418、流式细胞仪筛选。将2×10～6个pc3-gfp(-)细胞注射种植... 详细信息

目的:对pc3细胞进行gfp转染,建立pc3-gfp(+)的裸鼠动物模型,并检测CTC,为前列腺癌肿瘤细胞转移研究提供有用的工具。材料与方法:对pc3细胞应用质粒进行gfp转染,并进行单克隆、G418、流式细胞仪筛选。将2×10～6个pc3-gfp(-)细胞注射种植于1只Balb/c裸鼠耳后皮下,分别2×10～6个pc3-gfp(+)细胞注射种植于4只Balb/c裸鼠耳后皮下。4周后,注射pc3-gfp(-)的1只裸鼠,皮下肿瘤生长明显,同时予以CTC检测。处死后保留肝、肺、脾、肾、皮下肿瘤等,予以石蜡切片,观察pc3肿瘤细胞转移情况,作为对照组。10周后,注射pc3-gfp(+)的4只裸鼠中有2只皮下肿瘤明显,同时予以CTC检测。处死其中1只裸鼠,石蜡切片肝、肺、牌、肾、皮下肿瘤等组织,观察pc3肿瘤细胞转移情况。处死另1只裸鼠,取出皮下肿瘤,剪成小块,种植于5只裸鼠前列腺背侧叶被膜下,缝合包埋固定,建立前列腺癌原位pc3-gfp(+)动物模型。期后第2-8周,每周1次分别对原位模型的裸鼠进行CTC检测。8周后处死所有的裸鼠,对前列腺和相关器官进行石蜡切片,镜下观察肿瘤细胞生长和转移情况。结果:应用质粒成功转染gfp到pc3细胞,然后筛选使细胞荧光率达到85%。作为对照组,pc3-gfp(-)细胞注射种植的裸鼠,CTC检测均为阴性,4周后皮下成瘤约1.5cm,处死石蜡切片皮下肿瘤镜下可以观察到大量pc3肿瘤细胞存在,而肝、肺、脾、肾组织内均未观察到pc3肿瘤细胞转移情况。pc3-gfp(+)细胞注射种植的裸鼠皮下成瘤时间缓慢,10周后4只裸鼠中有2只皮下肿瘤明显,大小约1.0cm,同时予以CTC检测均为阴性。处死其中1只裸鼠,石蜡切片皮下肿瘤镜下可以观察到大量pc3肿瘤细胞存在,而肝、肺、脾、肾组织内均未观察到pc3肿瘤细胞转移情况。处死另1只裸鼠,取出皮下肿瘤,剪成小块,种植于5只裸鼠前列腺背侧叶被膜下,缝合包埋固定,成功建立前列腺癌原位动物模型。有待后期进一步结合去势治疗,予以CTC检测及组织石蜡切片镜下观察前列腺癌转移、治疗情况。结论:经转染gfp后的pc3可以用来成功建立皮下和原位前列腺癌模型,通过CTC检测研究肿瘤细胞转移的情况,是较理想的前列腺癌研究模型。

关键词：动物模型前列腺癌细胞注射肿瘤细胞转移 gfp CTC pc3-gfp 检测研究

来源： cnki会议评论

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