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pax5基因在成人急性淋巴细胞白血病中的突变和表达特征研究

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中国实验血液学杂志 2014年第5期22卷 1206-1211页

作者：林忠琨张闰葛峥许景艳刘娟郭星李敏吴雨洁乔纯仇海荣张建富李建勇南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院血液科江苏南京210029 南京大学医学院附属医院南京市鼓楼医院血液科江苏南京210008

pax5是paired-box(pax)家族重要转录因子。本研究旨在深入探究pax5基因在成人急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)中的突变、表达特征及其临床意义。应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、基因组PCR、克隆和测序技术等检... 详细信息

pax5是paired-box(pax)家族重要转录因子。本研究旨在深入探究pax5基因在成人急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)中的突变、表达特征及其临床意义。应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、基因组PCR、克隆和测序技术等检测101例成人ALL患者pax5基因片段缺失、pax5基因外显子(exon)2-10的突变;采用定量PCR方法检测pax5基因表达特征;并研究pax5突变和表达与临床特征、实验室指标的相关性及其预后意义。结果显示,本组成人ALL患者pax5突变率7.9%,均发生于B-ALL;共发现pax5突变类型9种(缺失突变4种、点突变4种和插入突变1种);pax5突变组年龄≥50岁患者数显著多于无突变组(62.5%vs 21.5%)(P=0.031);pax5高表达与低表达组之间的B细胞亚型、初诊血小板计数和免疫表型有显著统计学差异(P5);首次诱导治疗完全缓解率在pax5高表达组高于低表达组(86.7%vs 62.5%)(P=0.030),6个月总生存率pax5高表达组高于低表达组(75.0%vs 50.0%)(P=0.034)。结论:pax5基因在成人B-ALL患者中存在缺失、插入和点突变等多种类型突变和异常表达,并与临床参数相关联,具有重要的临床意义。

关键词： pax5 急性淋巴细胞白血病成人

转录因子pax5可不依赖与启动子结合促进B细胞淋巴瘤生长

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中国实验血液学杂志 2017年第6期25卷 1652-1657页

作者：刘霜竹张艳青郁多男吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所苏州大学造血干细胞移植研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州大学血液学协同创新中心江苏苏州215006 扬州大学-江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室

目的:研究B淋巴细胞转录因子pax5是否可以经过不依赖与启动子直接结合方式控制B细胞淋巴瘤的生长。方法:将可以产生各种突变型pax5并带GFP荧光的逆转录病毒感染小鼠淋巴瘤细胞系myc3和38B9,48 h后应用流式细胞术检测GFP+淋巴瘤细胞的比... 详细信息

目的:研究B淋巴细胞转录因子pax5是否可以经过不依赖与启动子直接结合方式控制B细胞淋巴瘤的生长。方法:将可以产生各种突变型pax5并带GFP荧光的逆转录病毒感染小鼠淋巴瘤细胞系myc3和38B9,48 h后应用流式细胞术检测GFP+淋巴瘤细胞的比例,然后将GFP+和GFP-淋巴瘤细胞一起继续培养或皮下移植至小鼠体内生长,体外每隔3 d或体内成瘤后重新检测GFP+细胞比例并确定其细胞周期参数和凋亡细胞的数量。结果:与正常对照组(migR-GFP,空载体)相比,突变型pax5 mt 1-357及缺乏DNA结合功能的突变型pax5 mt 304-358和野生型pax5一样均能明显增加GFP+细胞比例(Ppax5 mt 1-143与空载体对照一样无法使GFP+细胞比例增加(P>0.05),细胞周期也无明显改变(P>0.05)。结论:pax5可以经过不依赖与起动子直接结合方式促进B细胞淋巴瘤在体内体外的生长,其主要功能是加速肿瘤细胞分裂而不是降低细胞凋亡。本研究为以pax5蛋白特定区域作为治疗B细胞淋巴瘤新靶点提供了理论依据。

关键词： B细胞淋巴瘤 pax5 pax5突变体转录因子

SOX11、pax5在套细胞淋巴瘤患者病理组织标本中的表达及临床意义

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四川大学学报（医学版） 2020年第3期51卷 355-360页

作者：景彩霞冯钰曹霞徐才刚四川大学华西医院血液科血液病研究室成都610041 西南医科大学附属医院血液科泸州646000

目的研究转录因子性别决定区Y框蛋白11(SRY-related HMG box 11,SOX11)、配对盒基因5(paired box domain 5,pax5)在套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)患者病理组织标本中的表达,分析它们之间的关系及临床意义。方法纳入2012年1月... 详细信息

目的研究转录因子性别决定区Y框蛋白11(SRY-related HMG box 11,SOX11)、配对盒基因5(paired box domain 5,pax5)在套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)患者病理组织标本中的表达,分析它们之间的关系及临床意义。方法纳入2012年1月—2017年8月诊断的76例MCL患者为研究对象,并以56例弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)、38例滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma,FL)、9例伯基特淋巴瘤(burkitt's lymphoma,BL)患者为对照。采用实时荧光定量PCR和免疫组化法检测所有患者病理组织标本中SOX11、pax5基因和蛋白表达水平,分析MCL患者病理组织标本SOX11与pax5表达的相关关系,以MCL患者SOX11及pax5蛋白表达的中位H评分为依据,将其分为高低表达组,分析SOX11及pax5蛋白表达与临床特征及预后的关系。结果SOX11、pax5 mRNA在不同淋巴瘤组织标本中的表达差异有统计学意义(P均pax5 mRNA表达高于其他淋巴瘤组织,两两比较,MCL与BL间差异无统计学意义(P>0.05),与DLBCL及FL间差异有统计学意义(P均pax5蛋白表达与对照组间差异无统计学意义(P>0.05);在MCL患者病理组织标本中SOX11和pax5在mRNA水平(rs=0.714,Ppax5高低表达组与MCL患者临床特征和总生存期有关。结论在MCL中SOX11和pax5表达呈正相关。单独的SOX11或pax5表达在MCL患者预后分层中的作用不显著。

关键词：套细胞淋巴瘤 SOX11 pax5 预后

伴pax5拷贝数增加的pax5阳性间变性大细胞淋巴瘤临床病理特征

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中华病理学杂志 2022年第11期51卷 1155-1157页

作者：陈燕坪倪慕兰柯龙凤张文雯邱雅婷王健超朱琼陈刚福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院病理科福州350014 福建中医药大学附属福鼎医院福建省福鼎市医院病理科福鼎355200 福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院分子病理研究室福州350014

目的探讨pax5阳性的间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)的临床病理学特征。方法对2例pax5阳性的ALCL的临床特点、组织学形态、免疫表型及分子遗传学特征进行分析,并结合文献进行复习。结果例1男,58岁,背部肿物,光镜下皮肤表面溃疡,真皮层见片状... 详细信息

目的探讨pax5阳性的间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)的临床病理学特征。方法对2例pax5阳性的ALCL的临床特点、组织学形态、免疫表型及分子遗传学特征进行分析,并结合文献进行复习。结果例1男,58岁,背部肿物,光镜下皮肤表面溃疡,真皮层见片状致密的异形的淋巴细胞浸润,肿瘤细胞中等大到大,呈免疫母细胞样,散在分布R-S样细胞;例2女,34岁,左颈部肿物,光镜下淋巴结结构完全破坏,在多种炎性细胞背景中散在分布异型的淋巴样细胞,肿瘤细胞大,胞质丰富,核不规则,部分呈马蹄形或肾形,可见花环样多核细胞。2例肿瘤细胞均弥漫性强表达CD30、CD43、CD5及CD4,中到强阳性表达pax5,不同程度的表达CD2、CD3及CD7,不表达CD20、CD8、颗粒酶B、T细胞胞质内抗原(TIA1)及间变性淋巴瘤激酶(ALK),EB病毒编码的RNA(EBER)原位杂交均阴性。2例T细胞抗原(TCR)基因克隆性重排均阳性,Ig基因克隆性重排检测均阴性;pax5/IgH基因融合检测阴性,但检测到pax5基因拷贝数增加。例1采用局部放疗后获得完全缓解,随访21个月,患者无病生存。例2采用CHOEP(环磷酰胺+阿霉素+长春新碱+足叶乙甙+泼尼松)方案化疗2周期,颈部肿物较前退缩。结论pax5阳性的ALCL非常罕见,可能与pax5基因拷贝数增加有关。在形态和免疫表型上与其他淋巴瘤有重叠,易造成误诊,应综合临床信息、形态学特点、免疫表型及分子遗传学特征,才能作出正确诊断。

关键词：颈部肿物淋巴样细胞 pax5 免疫母细胞组织学形态局部放疗真皮层长春新碱

pax5缺失对于儿童无特殊重现染色体异常B系急性淋巴细胞白血病的预后意义

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中国当代儿科杂志 2016年第4期18卷 287-291页

作者：刘晓明张丽阮敏刘天峰张家源刘芳戚本泉陈晓娟王书春杨文钰郭晔邹尧陈玉梅竺晓凡中国医学科学院北京协和医学院/血液病医院血液学研究所/儿童血液病诊疗中心天津300020

目的初步了解pax5缺失在无特殊重现染色体异常的B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿中的发生情况,并进一步分析pax5基因缺失与ALL预后的相关性。方法用多重连接探针扩增(MLPA)技术检测2008年4月至2013年4月初诊无特殊重现染色体异常的B-... 详细信息

目的初步了解pax5缺失在无特殊重现染色体异常的B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿中的发生情况,并进一步分析pax5基因缺失与ALL预后的相关性。方法用多重连接探针扩增(MLPA)技术检测2008年4月至2013年4月初诊无特殊重现染色体异常的B-ALL患儿及对照组(同期非血液系统疾病及肿瘤儿童)的pax5基因拷贝数情况。根据有无pax5基因缺失分为缺失组和非缺失组。结果 86例患儿中18例(21%)发生了pax5缺失。缺失组初诊时白细胞总数明显高于非缺失组(P=0.001)。Kaplan-Meier法分析显示:缺失组无病生存(DFS)率明显低于非缺失组(0.69±0.12 vs 0.90±0.04,P=0.017),但两组患儿的总生存(OS)率差异无统计学意义(P=0.128)。Cox法分析显示,pax5缺失为影响DFS的不利因素(P=0.03)。结论 pax5缺失为无特殊重现染色体异常B-ALL患儿DFS的独立危险因素。

关键词： pax5 B-急性淋巴细胞白血病多重连接探针扩增预后儿童

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pax5在早期B细胞定向分化发育中的作用

上海第二医科大学学报 2005年第4期25卷 427-430页

作者：袁向亮沈立松上海第二医科大学新华医院上海儿童医学中心实验诊断中心上海200127

B细胞的定向分化是多个转录因子参与的复杂调控过程,其中pax5基因编码的B细胞特异性激活蛋白(BSAP)在B细胞的早期定向分化中起着决定性作用。本文着重从pax5激活多个B系特异性基因、抑制非B系基因的表达和pax5-/-proB细胞的多向分化潜... 详细信息

B细胞的定向分化是多个转录因子参与的复杂调控过程,其中pax5基因编码的B细胞特异性激活蛋白(BSAP)在B细胞的早期定向分化中起着决定性作用。本文着重从pax5激活多个B系特异性基因、抑制非B系基因的表达和pax5-/-proB细胞的多向分化潜能等方面,综述pax5在B细胞早期定向分化中的作用。

关键词： pax5 B细胞特异性激活蛋白 B淋巴细胞分化

pax8与pax5的交叉反应干扰病理诊断两例报道及分析

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中华病理学杂志 2019年第12期48卷 993-995页

作者：张萌陈莉付永娟滕梁红首都医科大学宣武医院病理科北京100053

目的探讨pax8与pax5抗体存在的交叉免疫反应对病理诊断的干扰,并分析其原因和鉴别诊断的意义.方法收集首都医科大学宣武医院初诊分别考虑为转移癌及肾原发肿瘤的2例穿刺活检病例的临床资料、病理形态及免疫表型,同时复习相关文献.结... 详细信息

目的探讨pax8与pax5抗体存在的交叉免疫反应对病理诊断的干扰,并分析其原因和鉴别诊断的意义.方法收集首都医科大学宣武医院初诊分别考虑为转移癌及肾原发肿瘤的2例穿刺活检病例的临床资料、病理形态及免疫表型,同时复习相关文献.结果 2例病例最初免疫组织化学标记均pax8弥漫强阳性表达,但最终病理诊断均为B细胞淋巴瘤(pax5阳性).结论 pax5与pax8抗体存在交叉免疫反应,而这种免疫反应重叠可能干扰病理诊断思路,应引起病理医师的警惕.

关键词：交叉免疫反应 pax5 病理医师病理诊断穿刺活检免疫表型转移癌交叉反应

E2A、EBF和pax5在早期B细胞分化发育中的作用

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免疫学杂志 2011年第10期27卷 910-912,917页

作者：王旭逄越王惠国刘庆平李文哲大连大学生物工程学院免疫研究所 116622

早期B细胞分化发育受到各种转录因子调控,特别是转录因子E2A、早期B细胞因子(EBF)及pax5的调控尤为重要。本文以E2A、EBF与pax5三个转录因子为综述对象,逐一阐述其在早期B细胞分化发育中的作用,并对3个转录因子在早期B细胞分化发育中的... 详细信息

早期B细胞分化发育受到各种转录因子调控,特别是转录因子E2A、早期B细胞因子(EBF)及pax5的调控尤为重要。本文以E2A、EBF与pax5三个转录因子为综述对象,逐一阐述其在早期B细胞分化发育中的作用,并对3个转录因子在早期B细胞分化发育中的协同作用进行了综述。本文将为"B淋巴细胞分化发育调控机理研究"提供参考。

关键词： E2A EBF pax5 早期B细胞分化发育

B细胞特异激活蛋白基因pax5原核表达、纯化及多克隆抗体制备研究

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免疫学杂志 2011年第6期27卷 519-522,543页

作者：王旭逄越王惠国马彪刘庆平李文哲大连大学生物工程学院免疫研究所 116622

目的克隆人B细胞特异激活蛋白基因pax5,并实现pax5的原核表达、纯化及多克隆抗体制备。方法从人淋巴瘤细胞株Raji提取总RNA,用RT-PCR扩增pax5基因片段,克隆至pMD19-T载体,双酶切及基因测序鉴定后,再定向插入原核表达载体pET28a中,并转化... 详细信息

目的克隆人B细胞特异激活蛋白基因pax5,并实现pax5的原核表达、纯化及多克隆抗体制备。方法从人淋巴瘤细胞株Raji提取总RNA,用RT-PCR扩增pax5基因片段,克隆至pMD19-T载体,双酶切及基因测序鉴定后,再定向插入原核表达载体pET28a中,并转化*** BL21(DE3),IPTG诱导表达目的蛋白,进行SDS-PAGE分析,纯化后进行Western blot分析,用原核表达蛋白制备兔抗pax5抗血清。利用免疫荧光染色法观察Raji细胞中的pax5表达情况。结果克隆得到的目的基因片段大小与预期相符,测序结果与GenBank中报道的序列完全一致,成功构建了重组表达质粒pET28a-pax5,并获得目的蛋白。Western blot检测原核表达pax5蛋白相对分子质量约为42 000,经镍离子金属螯合柱纯化后,纯度达95%以上。兔抗pax5抗血清ELISA效价可达1∶256 000。免疫荧光染色结果显示Raji细胞中pax5高表达。结论本研究在原核系统中成功表达了pax5重组蛋白,并制备多克隆抗体,为开发B淋巴细胞白血病诊断试剂盒提供了实验数据。

关键词： pax5 BSAP 原核表达