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配对盒基因2在子宫内膜增生性病变中的表达及意义

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中华病理学杂志 2019年第2期48卷 141-143页

作者：朱丽娜史雪鸿王晓晶贾帅李栋连北京市通州区妇幼保健院病理科 101100

目的探讨配对盒基因2(paired box gene 2,PAX2)在子宫内膜增生性病变中的鉴别诊断作用。方法收集北京市通州区妇幼保健院病理科2014年1月至2018年5月子宫内膜刮宫活检标本109例,行HE和免疫组织化学EnVision法染色,观察PAX2表达改变情况... 详细信息

目的探讨配对盒基因2(paired box gene 2,PAX2)在子宫内膜增生性病变中的鉴别诊断作用。方法收集北京市通州区妇幼保健院病理科2014年1月至2018年5月子宫内膜刮宫活检标本109例,行HE和免疫组织化学EnVision法染色,观察PAX2表达改变情况。结果21例子宫内膜增生不伴不典型性中2例(9.5%)呈PAX2表达改变,49例子宫内膜不典型增生/子宫内膜样上皮内瘤变(EIN)中46例(93.9%)呈PAX2表达改变,30例子宫内膜样癌中29例(96.7%)呈PAX2表达改变。结论PAX2可以作为诊断子宫内膜不典型增生/子宫内膜样上皮内瘤变的有效标志物。

关键词：子宫内膜增生性病变子宫内膜不典型增生基因配对 EnVision法 PAX2 上皮内瘤变免疫组织化学

子宫颈胃型腺癌和癌前病变的临床病理特征对比分析

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临床与实验病理学杂志 2023年第4期39卷 486-489页

作者：戈文舜张鹏鲁波耿文李美平浙江省绍兴市妇幼保健院病理科绍兴312000

目的对比分析子宫颈胃型腺癌(gastric-type endo cervical adenocarcinoma,G-EAC)及癌前病变的临床病理学特征。方法回顾性分析3例G-EAC和5例非典型小叶状子宫颈腺体增生(atypical lobular endocervical glandular hyperplasia,ALEGH)的临床病理学特点及影像学表现,行HE、AB-PAS及免疫组化染色,并复习相关文献。结果患者年龄36~75岁,G-EAC和ALEGH平均年龄分别为52.7岁、47岁。7例高危型HPV检测阴性;5例临床表现为阴道排液;影像学皆提示多囊性病变。免疫表型:p16阴性/斑片状阳性(8/8),p53(ALEGH:野生型5/5;G-EAC:突变型1/3),CEA(ALEGH:0/5;G-EAC:2/3),MUC6(ALEGH:5/5;G-EAC:3/3),PAX2(ALEGH:4/5;G-EAC:0/3),DPC4(ALEGH:5/5;G-EAC:0/3),Ki-67热点区平均增殖指数(ALEGH:21%;G-EAC:36.7%),AB-PAS(ALEGH:玫红;G-EAC:玫红/紫蓝)。患者随访1~31个月,1例G-EAC死亡、1例ALEGH进展,余均未见复发。结论子宫颈胃型腺体肿瘤性病变与HPV感染无关,但可伴有HPV相关的上皮病变;筛查子宫颈非HPV依赖性腺癌时需重点关注阴道排液和(或)MRI呈“cosmos”或“microcystic”成像模式者;免疫组化联合特殊染色有助于子宫颈胃型腺体肿瘤性病变的早期诊断,尤其是PAX2和DPC4在G-EAC与ALEGH的鉴别中发挥重要作用。

关键词：子宫颈肿瘤胃型腺癌非典型小叶状子宫颈腺体增生 PAX2 DPC4

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PAX2基因沉默对UUO大鼠肾功能的影响

国际免疫学杂志 2022年第2期45卷 145-150页

作者：李丽王长山中国科学院大学深圳医院(光明)儿科广东深圳518106 中国科学院大学深圳医院(光明)转化医学研究院广东深圳518106

目的探讨PAX2基因沉默对梗阻性肾病大鼠肾功能的影响。方法64只幼年雄性大鼠随机分为阴性对照组(NC)和沉默组(RNAi)各32只,均于转染后按照3、5、7、14 d分为4组,每组8只,留取血、尿和肾组织标本,实时定量聚合酶链式反应(real-time fluor... 详细信息

目的探讨PAX2基因沉默对梗阻性肾病大鼠肾功能的影响。方法64只幼年雄性大鼠随机分为阴性对照组(NC)和沉默组(RNAi)各32只,均于转染后按照3、5、7、14 d分为4组,每组8只,留取血、尿和肾组织标本,实时定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative PCR,Real-time PCR)检测肾组织PAX2 mRNA的沉默效果,全自动生化分析仪检测血肌酐与尿β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)的含量。结果与对照组相比,3、5、7、14 d沉默组的PAX2 mRNA表达量均明显降低,差异具有统计学意义[(1.61±0.19)比(1.13±0.23),(1.81±0.37)比(1.22±0.34),(3.12±0.29)比(1.81±0.24),(4.12±0.46)比(2.07±0.33),t值分别是3.33、2.82、9.74、9.65,P值均2、3、5、7、14 d)血肌酐水平有所波动,但差异无统计学意义[μmol/L:(43.03±8.55)比(45.65±9.43),(45.76±4.11)比(44.87±7.27),(45.40±8.73)比(47.53±5.72),(47.85±8.00)比(44.93±5.85),(47.45±7.13)比(50.47±6.78),(50.75±6.20)比(51.29±5.91),t值分别是0.58、0.30、0.58、0.83、0.89、0.18,P值均>0.05];两组尿β2-MG含量在1、2、3、5、7 d差异无统计学意义[ng/mL:(1.50±0.17)比(1.38±0.23),(1.53±0.20)比(1.40±0.26),(1.41±0.19)比(1.50±0.13),(1.90±0.48)比(2.17±0.59),(3.66±0.77)比(3.17±0.96),t值分别是1.19、1.12、1.11、1.00、1.27,P值均>0.05],而第14 d对照组明显高于沉默组[ng/mL:(6.08±1.01)比(4.16±1.05),t=3.73,PPAX2基因沉默在梗阻晚期可以降低单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠尿中β2-MG含量,改善肾功能。

关键词：肾间质纤维化 PAX2 RNA干扰单侧输尿管结扎肾功能

斑马鱼胚胎发育过程中PAX2及其上游LncRNA-CT025909.4的表达和功能研究

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斑马鱼胚胎发育过程中Pax2及其上游LncRNA-CT025909.4的表达和功...

作者：陈茜河南师范大学

学位级别：硕士

pax基因家族在进化上高度保守,近年来相继在果蝇、线虫、斑马鱼和人等生物中发现pax蛋白的表达及其生物学功能。PAX2是中后脑边界的重要分子标记物,参与中枢神经系统的发育,但其调控机制尚未完全了解。另外,我们在斑马鱼基因组数据库中... 详细信息

pax基因家族在进化上高度保守,近年来相继在果蝇、线虫、斑马鱼和人等生物中发现pax蛋白的表达及其生物学功能。PAX2是中后脑边界的重要分子标记物,参与中枢神经系统的发育,但其调控机制尚未完全了解。另外,我们在斑马鱼基因组数据库中发现,PAX2基因上游存在一个长链非编码RNA lncRNA-CT025909.4。本研究旨在探讨PAX2和lncRNA CT025909.4在斑马鱼胚胎发育过程中的表达和功能以及两者之间是否存在相互调控作用。对lncRNA进行生物信息学分析,利用RT-PCR结合测序结果证实了该lncRNA的存在;检测PAX2和lncRNA CT025909.4在斑马鱼胚胎发育过程中特定时期的表达并推测其可能的生物学功能。利用吗啡啉(morpholino)特异性阻断lncRNA CT025909.4的剪接,在斑马鱼胚胎1细胞期进行显微注射,观察其表达抑制后对胚胎发育的影响,并采用q PCR方法检测发育相关基因和临近基因的表达。最后,采用CRISPR/Cas9技术敲除PAX2基因,探究该基因沉默后对斑马鱼胚胎神经发育的影响,以初步揭示其生物学功能。本实验所获得的主要结果如下:1.Ensembl数据库分析发现,lncRNA CT025909.4位于斑马鱼13号染色体上,PAX2基因上游,全长1 283 bp,具有3个外显子,属于基因间lncRNA(lincRNA)。利用RT-PCR对lncRNA CT025909.4进行扩增,测序结果和斑马鱼基因组数据库进行比对,该序列完美匹配到斑马鱼第13号染色体上。2.斑马鱼胚胎发育不同时期的qPCR检测结果显示,PAX2和lncRNA CT025909.4在斑马鱼胚胎发育不同时期均有表达。胚胎原位杂交结果显示,PAX2特异性表达于眼、耳泡、中后脑边界、脊髓和前肾管中;而lncRNA CT025909.4呈现出泛表达模式,但主要集中在头部。3.成鱼不同组织qPCR检测结果显示,在所检测的成鱼组织中,PAX2和lncRNA CT025909.4均有不同程度的表达,并且两者均在脑中表达量最高。4.利用morpholino敲降lncRNA CT025909.4后,q PCR和原位杂交检测结果都证实lncRNA CT025909.4的表达量减少,对胚胎死亡率、畸形率进行统计,结果显示敲降组胚胎死亡率和畸形率高于对照组。5.LncRNA CT025909.4敲降(morpholino)导致胚胎异常表型,如发育迟缓、心包肿大和脊柱弯曲等。注射72 h敲降组与对照注射组相比,幼鱼心率显著下降。6.LncRNA CT025909.4敲降导致pax家族其他的基因(PAX2、pax5、pax8、pax3、pax6)、中后脑组织者(Otx2、Gbx2、Engrailed、Fgf8)以及神经发育相关基因(neurod4、Ephrin B3、Kreisler、Erb B4)表达发生变化,如pax5、Gbx2、Engrailed、Fgf8的表达下调;PAX2、neurod4、Ephrin B3、Kreisler和Erb B4这5个基因与对照注射组相比表达都极显著下调;但pax8、pax3和pax6这3个基因表达水平在敲降组和对照注射组之间无变化。7.利用morpholino敲降lncRNA CT025909.4后,检测其他临近基因cdhr1a、chst3a、Iit2、hiflan和cued2的表达,结果显示,cdhr1a、chst3a、Iit2的表达极显著下调;hiflan表达上调;cued2表达极显著上调。8.利用morpholino敲降lncRNA CT025909.4后,检测心脏发育标记基因NKX2.5、NKX2.7、vmhc、Bmp4、myl7和gata4的表达,结果显示NKX2.5、NKX2.7、vmhc三者的表达极显著下调,Bmp4和myl7表达极显著增加,gata4表达量增加但不显著。9.利用CRISPR/Cas9方法敲除PAX2基因,提取基因组DNA,PCR测序比对结果显示,在靶点之后出现均匀分布的套峰。原位杂交结果显示,注射组胚胎PAX2在耳泡和视柄部位表达减少或缺失,同样在中后脑边界的表达也减少;并且通过观察发现幼鱼耳的发育出现畸形,表现为耳囊变小,耳石消失或变小,两个耳石不分离的表型。本研究结果显示,PAX2主要在斑马鱼眼、耳、中后脑边界以及脊髓的发育过程中表达;lncRNA CT025909.4呈现出泛表达模式,但主要集中在斑马鱼头部。LncRNA CT025909.4敲降后表达量减少,并对中后脑组织者、神经发育相关基因以及临近基因的表达产生了一定的影响,这表明该lncRNA可能通过调控相关基因在胚胎神经系统发育中发挥关键作用,但是否与PAX2存在相互作用的机制还有待进一步研究。本实验结果证实了PAX2在斑马鱼胚胎发育过程中不可代替的作用,为进一步探讨lncRNA CT025909

关键词：斑马鱼胚胎发育 PAX2 LncRNA CT025909.4 基因表达基因敲降/敲除

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PAX2基因与胎儿肾脏发育异常的研究进展

中国优生与遗传杂志 2023年第1期31卷 203-207页

作者：张玉李肖华武海英葛淑娴李少琼高健河北省人民医院生殖遗传科河北石家庄050057

PAX2(配对盒基因2)是一个核转录因子基因,在物种间高度保守,主要表达于10号染色体长臂24-25区,长约70 kb,其中包含12个外显子。PAX2基因在肾脏发育过程中是不可或缺的,主要在发育的前肾、中肾和后肾的小管及间充质成分中起作用,该基因... 详细信息

PAX2(配对盒基因2)是一个核转录因子基因,在物种间高度保守,主要表达于10号染色体长臂24-25区,长约70 kb,其中包含12个外显子。PAX2基因在肾脏发育过程中是不可或缺的,主要在发育的前肾、中肾和后肾的小管及间充质成分中起作用,该基因的突变或缺失可导致胎儿不同的肾脏发育异常表型。本文主要从肾脏发育过程、PAX2基因在肾脏发育中的作用及PAX2表达异常所导致的临床表型进行阐述。

关键词： PAX2 肾脏发育肾脏发育异常

土槿皮乙酸通过调控PAX2对宫颈癌细胞的影响

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中成药 2020年第9期42卷 2291-2298页

作者：关德凤秦天生杨永秀兰州大学第一临床医学院甘肃兰州730000 甘肃省人民医院妇科甘肃兰州730000 兰州大学第一医院妇科甘肃省妇科肿瘤重点实验室甘肃兰州730000

目的探讨土槿皮乙酸通过调控PAX2对宫颈癌细胞的影响及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖情况;shRNA干扰技术构建PAX2低表达Hela细胞株,分为空白组、阴性对照组、sh-PAX2组、土槿皮乙酸组、土槿皮乙酸+sh-PAX2组;流式细胞术检测各组细... 详细信息

目的探讨土槿皮乙酸通过调控PAX2对宫颈癌细胞的影响及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖情况;shRNA干扰技术构建PAX2低表达Hela细胞株,分为空白组、阴性对照组、sh-PAX2组、土槿皮乙酸组、土槿皮乙酸+sh-PAX2组;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;Transwell小室迁移实验检测各组细胞迁移能力;String预测PAX2潜在作用蛋白;Western blot检测蛋白表达;免疫荧光实验观察各组细胞中β-catenin的定位。结果土槿皮乙酸可时间-浓度依赖地抑制宫颈癌细胞增殖。各宫颈癌细胞中PAX2蛋白表达与土槿皮乙酸对各细胞的IC50均呈负相关(PPAX2蛋白表达;土槿皮乙酸和低表达PAX2均可诱导Hela细胞凋亡并抑制其迁移,可降低Bcl-2、Cyclin D1、Survivin、MMP2、MMP9、β-catenin和p-β-catenin蛋白和升高BAX蛋白表达(PPAX2表达和Wnt/β-catenin信号通路进而诱导细胞凋亡并抑制其转移。

关键词：土槿皮乙酸 PAX2 宫颈癌凋亡迁移 Wnt/β-catenin信号通路

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PAX2在肾脏发育和肾疾病中的调控作用

遗传 2011年第9期33卷 931-938页

作者：侯晓明陈星王玉林山东大学附属省立医院儿科济南250021

配对盒基因2(Paired box2,PAX2)是肾脏发育中重要的转录因子,在前、中、后肾发育的全过程表达,集中分布在发育的各级小管和间充质成分,具有特定的时空特性。研究表明PAX2与多种调节肾脏发育的因子Gdnf、Ret、SHH、Wnt4及Fgf等相互作用,... 详细信息

配对盒基因2(Paired box2,PAX2)是肾脏发育中重要的转录因子,在前、中、后肾发育的全过程表达,集中分布在发育的各级小管和间充质成分,具有特定的时空特性。研究表明PAX2与多种调节肾脏发育的因子Gdnf、Ret、SHH、Wnt4及Fgf等相互作用,共同精准诱导生肾索形成,前/中肾管的形成及分化,输尿管芽的发生及分支,肾单位的诱导分化。PAX2的变异导致多种先天性肾脏及输尿管发育畸形,最易发生在肾-视神经盘缺损综合征。在肾细胞癌、Wilms瘤和多种肾小球及肾小管获得性疾病中存在PAX2的异常表达,其诊断和治疗价值将是今后研究的重点。文章主要对PAX2的分子结构、在肾脏发育和肾疾病的表达及调控进行了综述。

关键词： PAX2 肾脏发育基因调控肾疾病

特异性失调PAX2谱系的颅神经嵴细胞中的BMP信号通路导致颅面部器官发育异常

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特异性失调Pax2谱系的颅神经嵴细胞中的BMP信号通路导致颅面部器...

作者：赵巧雪福建师范大学

学位级别：硕士

颅神经嵴细胞起源于背侧神经管,之后随着胚胎发育从鳃弓组织迁移到颅面部,进一步分化成为颅颌面各种间充质组织。许多研究表明,颅神经嵴细胞在胚胎发育时期的迁移与分化异常会导致颅面发育畸形。因此解析颅神经嵴细胞的细胞谱系和迁移... 详细信息

颅神经嵴细胞起源于背侧神经管,之后随着胚胎发育从鳃弓组织迁移到颅面部,进一步分化成为颅颌面各种间充质组织。许多研究表明,颅神经嵴细胞在胚胎发育时期的迁移与分化异常会导致颅面发育畸形。因此解析颅神经嵴细胞的细胞谱系和迁移过程有着重要意义。目前对于细胞谱系追踪,常使用各种Cre小鼠与Cre的报告基因小鼠交配,通过观察Cre阳性的细胞迁移和分化进行谱系追踪。颅神经嵴细胞谱系最经典的Cre标记小鼠是Wnt1-cre小鼠,我们最近的研究发现PAX2-cre小鼠也能特异性标记颅面部间充质的细胞,因此,我们将对PAX2谱系的颅神经嵴细胞在胚胎发育过程中进行精细得谱系追踪,并且与Wnt1-cre小鼠进行比较,以期望发现新的颅神经嵴细胞标记工具小鼠。首先,我们利用PAX2-cre小鼠与Cre报告基因(R26R)小鼠交配,收取E15.5天的胚胎,发现PAX2-cre小鼠能特异性标记颅面部间充质的细胞谱系。进一步我们在颅神经嵴细胞迁移的关键时间点(E10.5-E12.5)对PAX2谱系的颅神经嵴细胞的迁移和发育过程进行精细解析,并与Wnt1-cre小鼠标记的颅神经嵴细胞谱系模式进行对比。结果显示,PAX2谱系的颅神经嵴细胞特异性在E10.5-E11.5小鼠第一鳃弓的间充质组织中表达,不在在第二鳃弓组织中表达,而Wnt1-cre小鼠标记的颅神经嵴细胞谱系是在第一和第二鳃弓的间充质组织中表达。表明PAX2-cre小鼠所标记的颅神经嵴细胞谱系可能是一种尚未研究过的,新型的颅神经嵴细胞谱系。其次,我们分别将Wnt1-cre小鼠、PAX2-cre小鼠与p Mes-Bmp4小鼠(Bmp4的条件性过表达)进行交配,试图从基因的功能方面来分析PAX2-cre小鼠和Wnt1-cre小鼠所标记的颅神经嵴细胞谱系的异同点。Wnt1-cre;p Mes-Bmp4小鼠出生即死亡,颅面部组织中眼部发育缺陷,上下颌前端发生不完全融合,牙齿发育异常和腭裂;PAX2-cre;p Mes-Bmp4小鼠也是出生即死亡且颅面发育异常,其表型与Wnt1-cre;p Mes-Bmp4小鼠有相似,但是牙齿发育正常,没有发生腭裂。进一步,我们对不同胚胎时期的PAX2-cre;p Mes-Bmp4转基因小鼠的颅面畸形表型进行精细分析。通过表观观察和组织形态学分析发现该小鼠眼球突出、头部略圆、上下颌的前端稍微融合、舌突出肿大、牙齿发育无异常,同时还出现了一个有趣的表型,口腔内在舌头的两侧出现了一对类似于上腭板的增生组织。我们对PAX2-cre;p Mes-Bmp4转基因小鼠的口腔内增生组织进行相关基因的表达分析,发现口腔内增生组织虽然形似于上腭板,但其并不表达上腭板间充质的特异性基因Msx1,同时也没有发生成骨分化,表明其可能只是普通的间充质组织增殖异常。随后,我们对PAX2-cre;p Mes-Bmp4小鼠的E10.5胎龄的头部组织进行了细胞增殖与凋亡检测发现,细胞增殖水平提高,凋亡水平无明显变化。因此,PAX2-cre;p Mes-Bmp4小鼠出现的颅面部畸形表型很有可能是细胞异常增殖导致的。最后,我们利用p Mes-Bmpr1a(BMP信号通路条件性激活小鼠)、p Mes–Noggin(BMP信号通路条件性阻断小鼠)、R26R(Fgf8条件性过表达小鼠)小鼠分别与PAX2-cre小鼠交配,探究在PAX2谱系的颅面部神经嵴细胞中激活和阻断BMP信号通路对小鼠颅面发育的影响。结果显示,在PAX2谱系的颅神经嵴细胞中提高与降低BMP信号通路活性水平,发现都会导致小鼠出现早期胚胎死亡并伴随一系列的颅面畸形,表明PAX2谱系的颅面部神经嵴细胞中信号通路的异常确实是会导致颅面发育异常。综上所述,本研究利用一系列遗传修饰小鼠,发现在颅神经嵴细胞迁移到鳃弓组织时,在第一鳃弓和第二鳃弓存在着2种不同谱系的颅神经嵴细胞,表现为第一鳃弓的颅神经嵴细胞为PAX2谱系的细胞。在PAX2细胞谱系中过表达Bmp4、激活和抑制BMP信号通路都会导致的小鼠颅面发育畸形。本研究的实验结果对进一步理解小鼠发育过程中颅面部神经嵴细胞的迁移和BMP信号通路的稳态失衡与颅面发育异常具有普遍的意义。

关键词： PAX2 颅神经嵴细胞 Bmp4 颅面畸形 BMP信号通路

L-精氨酸对宫内发育迟缓大鼠肾脏PAX2表达的影响

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中国当代儿科杂志 2011年第2期13卷 145-148页

作者：盖建芳谢宗德李雯李素萍胡劲涛中南大学湘雅二医院新生儿科湖南长沙410011

目的研究L-精氨酸(L-Arg)对宫内发育迟缓(IUGR)大鼠肾脏PAX2表达的影响。方法孕鼠随机分为3组:正常对照组、IUGR组和干预组。正常对照组母鼠全程以普通饲料(含21%蛋白)喂养。IUGR组和干预组大鼠孕期均采用低蛋白饲料(含10%蛋白)喂养。... 详细信息

目的研究L-精氨酸(L-Arg)对宫内发育迟缓(IUGR)大鼠肾脏PAX2表达的影响。方法孕鼠随机分为3组:正常对照组、IUGR组和干预组。正常对照组母鼠全程以普通饲料(含21%蛋白)喂养。IUGR组和干预组大鼠孕期均采用低蛋白饲料(含10%蛋白)喂养。仔鼠出生后,IUGR组母鼠常规饲料喂养;干预组母鼠在常规饲料喂养的基础上,于部分饮水中每日添加L-Arg 200 mg/kg。取7 d、21 d、2月和3月龄仔鼠肾脏组织,用免疫组化和Western blot法检测PAX2表达。结果免疫组化显示正常对照组仔鼠在各时间点均未见明显PAX2表达。IUGR组、干预组仔鼠2月龄和3月龄时,两组大鼠在肾小球和肾小管区可见PAX2阳性细胞,且3月龄鼠的PAX2表达比2月龄的更显著(PPAX2表达低于同龄IUGR组(P21 d均未见PAX2蛋白明显表达。到2月龄和3月龄时,干预组和IUGR组仔鼠肾组织PAX2蛋白表达均较正常对照组显著增多,但干预组的表达低于IUGR组(PPAX2基因有再表达现象;用L-Arg干预后PAX2表达明显减少。

关键词：宫内发育迟缓 PAX2 肾脏 L-精氨酸大鼠