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Chinese Science Bulletin 2006年第19期51卷 2362-2368页

作者： YAN Fei ZHENG Yinying ZHANG Wenwei XIAO Hong LI Shifang CHENG Zhuomin State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests Chinese Academy of Agricultural Sciences Beijing 100094 China

In fission yeast (Schizosaccharomyces pombe), pac1 gene was cloned with 99.3% nucleo- tide sequence similarity with published pac1 in GenBank. In pET-5α expression system, the expres- sion product of cloned pac1 in E. coli showed activity to degrade the double-strand RNA. Harboring the binary vector pBI121, which contains pac1 gene, Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 was used to transform the wheat immature embryos pre- cultured 7―10 d. After preregeneration, regeneration and selection culture stage, totally 41 G418 resistant plants were obtained, in which 25 lines were proved to integrate with transgene and express transgene normally by PCR, Dot blot, RT-PCR and ELISA de- tection. Antivirus test carried out on 25 positive lines with high dose of Barley yellow dwarf virus-GPV re- vealed that 12 lines had resistance to BVDV-GPV in low level, another 12 lines had resistance to BVDV- GPV in middle level, and 1 line showed resistance to BVDV-GPV in high level. However, both low and middle level of resistance plants showed no symp- toms when infected by viruses at low dose, which suggested the dose-dependent effect of the resis- tance mediated by pac1 to BYDV-GPV.

关键词：转基因小麦 pac1 土壤杆菌抗病毒素大麦黄矮病

B族G蛋白偶联受体pac1可调控表达体系的建立

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生物工程学报 2014年第4期30卷 636-643页

作者：李梅余榕捷钟佳萍崔泽凯杨延旭张华华暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广东广州510630 广东医学院医学遗传学教研室广东东莞523808

pac1是神经肽垂体腺苷酸环化酶激活多肽(Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,pacAP)的特异受体,属于B族G蛋白偶联受体,介导pacAP的神经递质、神经调质、神经保护、抗神经损伤及调控神经再生等功能,pac1高表达和神经损... 详细信息

pac1是神经肽垂体腺苷酸环化酶激活多肽(Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,pacAP)的特异受体,属于B族G蛋白偶联受体,介导pacAP的神经递质、神经调质、神经保护、抗神经损伤及调控神经再生等功能,pac1高表达和神经损伤、肿瘤等生理病理过程密切相关。为了深入了解pac1的功能,构建pac1可调控表达的细胞系,通过优化的四环素控制表达系统实现pac1在中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞的强力霉素(doxycycline,Dox)依赖的可控表达。首先通过双酶切将编码pac1和增强型黄色荧光蛋白(EYFP,enhanced yellow fluorescent protein)的融和基因pac1-EYFP克隆到pTRE-Tight载体上,获得重组载体pTRE-pac1-EYFP;基因测序鉴定正确后将新型的四环素调节元件载体pTet-on advanced和反应元件载体pTRE-pac1-EYFP分别转入CHO细胞中,G418和潮霉素(Hygromycin)双抗筛选阳性克隆pac1-Tet-CHO,使用梯度浓度四环素类似物强力霉素Dox诱导pac1-EYFP表达,48 h后检测受体表达水平,并通过MTT法检测不同pac1表达水平的细胞增殖活性。荧光检测和Western印迹结果显示,成功获得了具有良好诱导性的Dox依赖的pac1可控表达的细胞系,这些细胞株在传10代后仍能稳定地可控表达pac1。MTT结果显示pac1表达水平越高,细胞增殖活性越强。成功所构建的Dox依赖的pac1可控表达细胞系,为pac1的生物学功能的深入研究奠定了基础。

关键词：垂体腺苷酸环化酶激活多肽受体 pac1 四环素表达调控系统强力霉素

过表达酵母pac1增强转基因大豆对大豆花叶病毒的抗性

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中国农业科学 2018年第2期51卷 217-225页

作者：牛陆赵倩倩杨静邢国杰张伟贺红利杨向东吉林省农业科学院农业生物技术研究所/吉林省农业生物技术重点实验室

【目的】大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)病是中国大豆产区最主要的病害之一,严重影响大豆产量和籽粒品质。核糖核酸酶pac1能够识别和降解植物RNA病毒或类病毒复制过程中产生的ds RNAs,从而有效抑制病毒在寄主中的复制与积累。P... 详细信息

【目的】大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)病是中国大豆产区最主要的病害之一,严重影响大豆产量和籽粒品质。核糖核酸酶pac1能够识别和降解植物RNA病毒或类病毒复制过程中产生的ds RNAs,从而有效抑制病毒在寄主中的复制与积累。pac1的这一特点为广谱抗RNA病毒及类病毒转基因作物的创制和培育提供了有效的靶标基因。本研究利用转基因技术,将来源于粟酒裂殖酵母菌(Schizosaccharomyces pombe)的pac1导入栽培大豆,研究过表达pac1对大豆SMV抗性的影响,为抗SMV转基因大豆新品种选育提供依据。【方法】采用酶切连接技术,将pac1连接到双元表达载体p CAMBIA3300中,构建植物表达载体p CAMBIA3300-pac1。目的基因启动子为组成型强启动子Ca MV 35S,终止子为NOS,筛选标记为草铵膦抗性基因BAR。采用农杆菌介导转化法,将pac1导入栽培大豆品种Williams82。在利用PAT/BAR试纸、PCR及除草剂(500 mg·L-1 Basta)喷施检测基础上,通过Southern杂交技术进一步分析外源基因在转基因大豆中的整合情况和拷贝数。采用人工摩擦接种法,对T2和T3代转基因大豆株系进行田间抗SMV鉴定农艺性状调查,分析转基因大豆对SMV抗性及遗传稳定性。并利用q RT-PCR技术分析接种SMV 28 d后转基因大豆中SMV积累水平。【结果】共转化2 600多个外植体,获得耐草铵膦(5 mg·L-1)大豆再生植株76株。PCR检测结果表明,其中65株能够扩增出目的条带,大豆遗传转化效率为2.48%。对T1—T3代转基因大豆株系喷施除草剂表明,在500 mg·L-1 Basta处理7 d后,转基因植株表型没有明显变化,而对照(非转基因大豆)植株叶片则黄化枯死。Southern杂交结果表明,外源基因以低拷贝的方式(1—2个)整合至大豆基因组中。摩擦接种SMV SC-3鉴定表明,在接种35 d后,对照出现严重花叶、皱缩等典型SMV发病症状,而转基因大豆仅部分叶片表现出轻微的花叶症状,其病情指数降低至11.11—22.22,较对照(病情指数36.81—46.24)显著降低,且SMV抗性在转基因大豆不同代际间能够稳定遗传。q RT-PCR分析表明,在接种SMV SC-3株系28 d后,转基因大豆中SMV CP表达水平较对照极显著下降。农艺性状调查表明,在未接种SMV条件下,转基因大豆在叶形、花色、种皮色、种脐色、株高、节数、结荚高度、生育期及百粒重等方面与对照没有显著差异。【结论】pac1过表达显著抑制了SMV的积累及症状发展,增强了转基因大豆对SMV的抗性水平。

关键词：大豆大豆花叶病毒 pac1 农杆菌介导转化抗性

荧光互补与光能量共振转移检测B类G蛋白偶联受体pac1二聚化

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中国细胞生物学学报 2012年第10期34卷 1023-1029页

作者：郭晓令余榕捷钟佳萍李梅曾智星刘晓飞暨南大学生命科学技术学院生物医药研究院广州510632

G蛋白偶联受体(G-protein couple receptors,GPCRs)是最大的超家族膜受体,其中它的B家族成员垂体腺苷酸环化酶激活肽1(pac1)是垂体腺苷酸环化酶激动多肽(pacAP)的特异受体,介导pacAP神经保护等功能,是神经系统疾病药物开发的重要靶点之... 详细信息

G蛋白偶联受体(G-protein couple receptors,GPCRs)是最大的超家族膜受体,其中它的B家族成员垂体腺苷酸环化酶激活肽1(pac1)是垂体腺苷酸环化酶激动多肽(pacAP)的特异受体,介导pacAP神经保护等功能,是神经系统疾病药物开发的重要靶点之一。二聚化或寡聚化是GPCRs普遍存在的现象,但是目前尚没有关于pac1形成同源二聚体或寡聚体的报道。为了验证pac1也能进行同源二聚化,该文采用生物发光能量转移(bioluminescence resonance energy transfer,BRET)方法进行检测,结果显示不同浓度梯度共转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)的pac1-Rluc与pac1-EYFP重组载体,在底物腔肠素h(coelenterazine h)作用下呈现明显的BRET信号。双分子荧光互补(BiFC)检测显示,带有EYFP N端基因标记的pac1与带有EYFP C端基因标记的pac1共转染CHO细胞,能呈现完整的EYFP荧光信号。同时,Western blot检测也显示,高表达pac1的细胞中可检测到pac1二聚体的大分子。因此,pac1是能够进行正常同源二聚化的,这个发现将为后续神经损伤药物的开发奠定全新的理论基础,同时也为其他GPCRs同源二聚化的研究起到启发和借鉴作用。

关键词： GPCRs pac1 同源二聚化

B族G蛋白偶联受体pac1的N端基序HSDCIF对其二聚化和上膜运输的影响

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中国生物化学与分子生物学报 2013年第9期29卷 833-841页

作者：郭晓令余榕捷曾智星李梅钟佳萍张华华暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广州510632 广东医学院医学遗传学教研室广东东莞523808

B族G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)pac1是垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,pacAP)的特异受体,介导pacAP神经保护等功能,是神经系统疾病药物开发的重要靶点之一.HSDCIF(His-Ser-Asp-Cys-Ile-Phe)为位于pac1的N端胞外1区(extracellar domain 1,EC1)的一段短肽序列,与特定负责激活pac1受体的激动域pacAP(1-6)具有极高的同源性.利用基因敲除技术构建出缺陷HSDCIF基序的pac1突变体(简称D-pac1);利用基因工程原理和技术构建系列真核表达重组载体,包括融合了增强型黄色荧光蛋白(enhanced yellow fluorescent protein,EYFP)的表达载体D-pac1-EYFP;用于生物发光能量转移(bioluminescence resonance energy transfer,BRET)检测的D-pac1-Rluc;以及用于双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)实验的D-pac1-EYFP/N和D-pac1-EYFP/C.免疫荧光检测(immunofluorescence assay)测定D-pac1的表达;荧光共聚焦显微观察D-pac1的细胞运输,然后通过Western印迹、BRET与BiFC方法来检测D-pac1的二聚化情况,综合评价HSDCIF基序对pac1二聚化和在细胞中定位的影响.检测结果显示,缺陷HSDCIF基序的突变体D-pac1不能发生二聚化,也不能正常的进行上膜运输,而是滞留在内质网中,同时外源化学合成的寡肽HSDCIF可以竞争性地抑制正常pac1的二聚化.

关键词： B族G蛋白偶联受体(GPCRs) pac1 缺陷HSDCIF基序的pac1突变体(D-pac1) 二聚化细胞运输

农杆菌介导法获得转pac1基因小麦并表现对大麦黄矮病毒的抗性

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科学通报 2006年第16期51卷 1906-1912页

作者：燕飞郑银英张文蔚肖红李世访成卓敏中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100094

自裂殖酵母中克隆得到pac1基因，与GenBank中相关的核苷酸序列有99.3％的相似性．编码蛋白质序列分析表明，其具有RNaseⅢ结构域和双链RNA结合结构域．体外活性测定表明，以pET．5a系统在大肠杆菌中表达的pac1产物能够降解dsRNA．将pac... 详细信息

自裂殖酵母中克隆得到pac1基因，与GenBank中相关的核苷酸序列有99.3％的相似性．编码蛋白质序列分析表明，其具有RNaseⅢ结构域和双链RNA结合结构域．体外活性测定表明，以pET．5a系统在大肠杆菌中表达的pac1产物能够降解dsRNA．将pac1导入双元载体pBll21，以培养7～10d的小麦幼胚为受体材料，利用农杆菌株LBA4404对小麦品种陇鉴127进行转化，获得了41株G418抗性植株，经点杂交（dot blot）、RT-PCR和nptⅡ ELISA检测证实，其中25株整合有外源基因并能正常表达．对这25株转基因小麦进行大麦黄矮病毒的抗性鉴定表明，有12株表现低度抗性，表现为低接毒量时无症状，接毒量提高时发病且严重；有12株表现中度抗性，表现为低接毒量时无症状，接毒量提高时局部有不严重症状；有1株表现高度抗性，两种情况下均无症状．抗性实验结果表明了pac1介导的抗性具有剂量效应的特点。

关键词： pac1 农杆菌介导法小麦转基因抗病毒大麦黄矮病毒

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农杆菌介导的pac1基因转化大豆研究

吉林农业大学学报 2010年第1期32卷 34-38页

作者：白庆荣李岩甄波杨丽娜高洁吉林农业大学农学院长春130118 梨树县农业环境保护与农村能源管理站梨树136500

选用高感大豆花叶病毒病而再生能力较强的大豆品种和品系作为受体,对丛生芽诱导培养基、侵染菌液的制备以及根的诱导方法进行了优化。采用优化后的遗传转化体系以农杆菌介导法将pac1导入大豆,MSB培养基中附加2 mg/L6-BA+0.2 mg/LIBA进... 详细信息

选用高感大豆花叶病毒病而再生能力较强的大豆品种和品系作为受体,对丛生芽诱导培养基、侵染菌液的制备以及根的诱导方法进行了优化。采用优化后的遗传转化体系以农杆菌介导法将pac1导入大豆,MSB培养基中附加2 mg/L6-BA+0.2 mg/LIBA进行丛生芽诱导,液体YEB重悬活化菌体后侵染,MSB培养基中蔗糖含量15%+2 mg/LIBA+0.2 mg/L6-BA进行生根诱导。共获得8株PCR检测呈阳性植株,经SouthernBlot检测,证明pac1基因已整合到大豆基因组中。转基因植株对病毒的抗性评价正在进行中。

关键词：大豆子叶节 pac1 遗传转化农杆菌介导法

pacAP特异受体pac1的N端Cys/Ala突变对其二聚化的影响的研究

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PACAP特异受体PAC1的N端Cys/Ala突变对其二聚化的影响的研究

作者：钟佳萍暨南大学

学位级别：硕士

目的：在G蛋白偶联受体（G-protein couple receptors，GPCRs）中，普遍存在二聚化或寡聚化现象。作为垂体腺苷酸环化酶激动多肽（pituitary adenosine acidcyclization enzyme excited peptide， pacAP）的特异受体pac1，属于B类GPCRs家族，并介导pacAP神经保护、神经调节等功能，是神经系统疾病药物开发的重要靶点之一。本实验组的研究曾证实pac1能形成二聚体，并且发现其N端HSDCIF基序缺失后pac1不能发生二聚化，并且此HSDCIF基序中的Cys是唯一没有参与形成二硫键，通过将此Cys突变为Ala，构建突变型受体M-pac1,探索此Cys和pac1二聚化之间的关系。并通过对稳定表达野生型受体pac1和突变型受体M-pac1的中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary, CHO）细胞在缺血清培养条件下的细胞活性和抗凋亡活性的检测，更进一步探究pac1二聚化的生物学功能。方法：利用基因工程原理以及基因突变技术，获得pac1N端Cys突变为Ala的突变型M-pac1基因，通过基因重组技术和基因测序技术，成功构建出融合增强型绿色荧光蛋白(enhanced yellow fluorescent protein，EYFP)和海肾荧光素酶（renilla luciferase，Rluc）的重组表达载体M-pac1-EYFP和M-pac1-Rluc，以及融合部分EYFP的重组表达载体M-pac1-EYFP/N和M-pac1-EYFP/C。将重组载体M-pac1-EYFP和M-pac1-Rluc分别导入CHO细胞中，采用G418筛选获得稳定表达突变型受体M-pac1的M-pac1-EYFP-CHO和M-pac1-Rluc–CHO细胞克隆。采用荧光共聚焦显微观察检测突变型受体M-pac1在CHO细胞中的表达;采用生物发光能量转移（bioluminescence resonance energy transfer，BRET），双分子荧光互补技术（bimolecular fluorescence complementation，BiFC）和Westernblot技术检测突变型受体M-pac1的二聚化状况。通过缺血清培养，采用MTT，ELISA，流式细胞术检测稳定表达野生型受体pac1和突变型受体M-pac1的CHO细胞在缺血清培养条件下的细胞活性和细胞凋亡相关指标，如Bcl-2水平和Caspase-3活性。结果：构建了表达突变型受体M-pac1的系列真核表达重组载体M-pac1-EYFP，M-pac1-Rluc， M-pac1-EYFP/N和M-pac1-EYFP/C，并成功筛选出稳定表达突变型受体M-pac1的CHO细胞系M-pac1-EYFP-CHO和M-pac1-Rluc-CHO。共聚焦显微镜观察结果表明突变型受体M-pac1能够正常运输到细胞膜部位;BRET和BiFC结果显示，突变型受体M-pac1自身之间不能发生二聚化，和野生型受体pac1之间也不能发生二聚化。Westernblot检测显示，稳定表达突变型受体M-pac1的CHO细胞中，受体M-pac1是以单体的形式存在。MTT，ELISA，流式细胞术检测结果表明，稳定表达pac1的CHO细胞缺血清培养时细胞残留活性显著高于稳定表达突变体M-pac1的细胞，且其细胞内具有高水平的Bcl-2含量和低水平Caspase-3活性，具有显著的抗凋亡活性;此结果提示pac1二聚化可以赋予细胞抗缺血清诱导的凋亡，而不能二聚化的突变型受体M-pac1则失去这一活性。结论：本研究首次证实突变型受体M-pac1自身之间不能发生二聚化，并且和野生型受体pac1之间也不能发生二聚化，由此表明pac1的N端的Cys是影响pac1发生二聚化的关键位点。在缺血清培养的非配体依赖条件下，发现二聚化pac1可赋予细胞抗凋亡活性，提示了pac1具有二聚化依赖的固有活性，这些重要发现有助于更清晰的阐明pac1的病理学与生理学作用及意义，为进一步探索pac1二聚化机制及其所引发的信号途径奠定研究基础。

关键词： pac1 M-pac1 二聚化突变体抗凋亡

B族G蛋白偶联受体pac1的固有活性机制及强力霉素对其调控的研究

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B族G蛋白偶联受体PAC1的固有活性机制及强力霉素对其调控的研究

作者：崔泽凯暨南大学

学位级别：硕士

目的:B类G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptor,GPCR)pac1是垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,pacAP)的特异性受体,其高表达与神经损伤和肿瘤密切相关。本研究组已经证实pac1的二聚化以及其N端第一个Cys/Ala突变的M-pac1不能二聚化,并证实pac1的二聚化具有固有活性,但是其二聚体依赖的固有活性的机制还未明晰。而且偶然发现10-1000ng/ml的强力霉素(Doxycycline,Dox)能有效提高表达受体pac1的细胞的抗凋亡能力,Dox的抗凋亡活性与pac1二聚体依赖的固有活性密切相关;因此,在本研究采用信号通路研究的常规方法,探索pac1二聚体依赖的固有活性的具体机制,同时探索Dox对pac1固有活性的调控。方法:在缺血清诱导的凋亡模型中,利用各个信号通路抑制剂和pac1二聚化抑制剂乙酰半胱氨酸(acetylcysteine,NAC),检测pac1-CHO、M-pac1-CHO和pc DNA-CHO细胞抗凋亡活性相关指标的变化,包括:MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测的细胞残留活性、caspase-3活性和抗凋亡蛋白Bcl-2水平等,筛选出介导pac1二聚体依赖的固有活性可能的信号通路。通路抑制剂结合相关信号通路上关键蛋白的Western blot、特异检测β-catenin通路信号的TOP-flash双荧光检测系统及在Neuro2a细胞中使用pac1的sh RNA来特异性下调pac1的表达等方法,深入探索pac1固有活性的分子机制。在pac1固有活性机制探索的基础,进一步分析Dox对pac1固有活性的调控。结果:只有表达正常pac1二聚体的pac1-CHO表现显著的抗缺血清诱导凋亡的活性,表达不能二聚化的突变体的M-pac1-CHO和CHO细胞均缺乏pac1固有活性赋予的抗缺血清诱导凋亡的活性。Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV939和NAC有效抑制pac1-CHO细胞抵抗缺血清诱导凋亡的活性;Western blot和TOP-flash双荧光检测发现,加入XAV939和NAC后,pac1-CHO细胞中Wnt/β-catenin通路信号显著性下调;针对pac1的sh RNA特异性下调pac1的表达后,发现Neuro2a细胞的抗凋亡能力和Wnt/β-catenin通路信号均显著性下降。在Dox与pac1的研究中发现,10-1000ng/ml的Dox能有效上调pac1表达,并且诱导pac1内化,并随着Dox浓度的增加,pac1-CHO的抗凋亡能力也增加;而且通过Western blot和TOP-flash双荧光检测系统发现,随着Dox浓度的增加,Wnt/β-catenin通路信号相应增强;而下调pac1表达的sh RNA有效抑制Dox促进Neuro2a细胞抵抗凋亡的活性。结论:pac1具有非配体依赖的、二聚体依赖的固有活性与Wnt/β-catenin信号通路密切相关。首次发现Dox有效诱导pac1表达上调,并且通过pac1发挥抗凋亡的活性。pac1固有活性机制的探索及Dox对pac1表达与活性的调控作用的发现有助于以pac1为靶点的药物开发。

关键词： pac1 二聚体固有活性强力霉素抑制剂 Wnt/β-catenin信号通路

针刺对焦虑模型小鼠终纹床核内pacAP/pac1-PKA-CREB通路信号分子的影响

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针刺对焦虑模型小鼠终纹床核内PACAP/PAC1-PKA-CREB通路信号分子...

作者：何建才成都中医药大学

学位级别：硕士

目的本研究探讨针刺对焦虑模型小鼠终纹床核(Bed nucleus of stria terminalis,BNST)内pacAP/pac1-PKA-CREB通路信号分子的影响,拟揭示针刺抗焦虑的中枢pacAP作用机理。方法选用30只健康、清洁级、雄性C57BL/6J小鼠,依据行为学,采用分... 详细信息

目的本研究探讨针刺对焦虑模型小鼠终纹床核(Bed nucleus of stria terminalis,BNST)内pacAP/pac1-PKA-CREB通路信号分子的影响,拟揭示针刺抗焦虑的中枢pacAP作用机理。方法选用30只健康、清洁级、雄性C57BL/6J小鼠,依据行为学,采用分层随机设计,分为空白组、模型组、针刺组。依据文献建立慢性不可预知应激(Chronic unpredictable stress,CUS)焦虑小鼠模型。选取“神门”、“内关”进行针刺干预,每次针刺30min,每间隔5min捻转1次,捻转持续30s,左右交替,1次/2天,干预持续15天。运用高架十字迷宫结果评估各组小鼠焦虑样行为,利用酶联免疫法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ElISA)测定小鼠血浆皮质酮(Corticosterone,CORT)的含量,以免疫组化法检测小鼠BNST内垂体腺苷酸环化酶激活肽(Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,pacAP)及其受体(pac1)、蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)、环磷腺苷反应原件结合蛋白(cAMP-responsive element binding protein,CREB)的表达。结果1、行为学测试结果(1)OT%值:模型组小鼠在接受CUS造模后OT%值明显下降(P0.05);针刺后OE%值明显升高(PpacAP/pac1-PKA-CREB通路信号分子表达(1)pacAP:CUS造模后小鼠终纹床核内pacAP表达减少(PpacAP表达(Ppac1:各组终纹床核内pac1比较均无明显差异(P>0.05)。(3)PKA:CUS造模后小鼠终纹床核内PKA表达减少(PpacAP/pac1-PKA-CREB信号通路、降低HPA轴活性,可能是针刺发挥抗焦虑效应的中枢重要途径之一。

关键词：针刺焦虑障碍终纹床核垂体腺苷酸酶激活肽 pac1 蛋白激酶A环磷腺苷反应原件结合蛋白皮质酮信号通路