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OSW-1 triggers necroptosis in colorectal cancer cells through the RIpK1/RIpK3/MLKL signaling pathway facilitated by the RIpK1- p62/sqstm1 complex

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World Journal of Gastroenterology 2024年第15期30卷 2155-2174页

作者： Nan Wang Chao-Yang Li Teng-Fei Yao Xiao-Dan Kang Hui-Shu Guo Clinical Laboratory Medicine The First Affiliated Hospital of Dalian Medical UniversityDalian 116023Liaoning ProvinceChina The Institute of Integrative Medicine Dalian Medical UniversityDalian 116044Liaoning ProvinceChina The Institute of Laboratory Medicine Dalian Medical UniversityDalian 116044Liaoning ProvinceChina Central Laboratory The First Affiliated Hospital of Dalian Medical UniversityDalian 116011Liaoning ProvinceChina

BACKGROUND Necroptosis has emerged as a novel molecular pathway that can be targeted by chemotherapy agents in the treatment of ***-1,which is derived from the bulbs of Ornithogalum saundersiae Baker,exerts a wide range of pharmaco-logical *** To explore whether OSW-1 can induce necroptosis in colorectal cancer(CRC)cells,thereby expanding its range of clinical *** We performed a sequence of functional experiments,including Cell Counting Kit-8 assays and flow cytometry analysis,to assess the inhibitory effect of OSW-1 on CRC *** utilized quantitative proteomics,employing tandem mass tag label-ing combined with liquid chromatography-tandem mass spectrometry,to analyze changes in protein *** bioinformatic analysis was conducted to elucidate the biological processes associated with the identified *** electron microscopy(TEM)and immunofluorescence studies were also performed to examine the effects of OSW-1 on ***,western blotting,siRNA experiments,and immunoprecipitation were employed to evaluate protein interactions within CRC *** The results revealed that OSW-1 exerted a strong inhibitory effect on CRC cells,and this effect was accompanied by a necroptosis-like morphology that was observable via ***-1 was shown to trigger necroptosis via activation of the RIpK1/RIpK3/MLKL ***,the accumulation of p62/sqstm1 was shown to mediate OSW-1-induced necroptosis through its interaction with *** We propose that OSW-1 can induce necroptosis through the RIpK1/RIpK3/MLKL signaling pathway,and that this effect is mediated by the RIpK1-p62/sqstm1 complex,in CRC *** results provide a theoretical foundation for the use of OSW-1 in the clinical treatment of CRC.

关键词： OSW-1 Necroptosis RIpK1 p62/sqstm1 Colorectal cancer

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p62/sqstm1 participates in the Innate Immune Response of Macrophages Against Candida albicans Infection

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International Journal of Dermatology and Venereology 2022年第2期5卷 75-81页

作者： Yan-Zhi He Zhi-Min Duan Xu Chen Min Li Center for Global Health School of Public HealthNanjing Medical UniversityNanjingJiangsu 211166China Department of Dermatology Hospital for Skin Diseases(Institute of Dermatology)Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical CollegeNanjingJiangsu 210042China Jiangsu Key Laboratory of Molecular Biology for Skin Diseases and STIs Hospital for Skin Diseases(Institute of Dermatology)Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical CollegeNanjingJiangsu 210042China.

Objective: This study was designed to evaluate whether p62/sqstm1 (hereafter referred to as p62) is involved in the immune response of macrophages against challenge byCandida albicans (C. albicans).Methods: We cultured bone marrow-derived macrophages (BMDMs) to investigate the immune response to challenge byC. albicans. The p62 gene was knocked down by transfection with p62 small interfering RNA (siRNA) in the p62 siRNA group. BMDMs transfected with nonsense siRNA served as the negative control (NC) group. These two groups of BMDMs were challenged withC. albicans in vitro. We detected p62 expression through quantitative reverse transcription pCR and western blotting. The phagocytosis ability of BMDMs was evaluated by flow cytometry and microscopic examination using an Olympus FV1000 laser scanning confocal microscope. Moreover, we determined the level of reactive oxygen species (ROS) in BMDMs. The mRNA levels of proinflammatory cytokines were determined by quantitative reverse transcription ***: After stimulation byC. albicans, the relative expression of p62 mRNA was increased in a dose-dependent manner, the relative expression of p62 and the ratio of BMDMs toC. albicans is 1.893 ± 0.2156 (1:1,p p p p62 protein level was also increased. After transfection with p62 siRNA, the mRNA and protein levels of p62 were significantly decreased in BMDMs (p phagocytosis rates ofC. albicans by BMDMs were significantly lower in the p62 siRNA group than in the NC group (39.70 ± 1.69%vs. 55.23 ± 0.72%, 46.70 ± 0.89%vs. 60.80 ± 1.78%, 51.90 ± 0.98%vs. 64.43 ± 2.0%, respectively, allp production of ROS (4269 ± 392.6vs. 13426 ± 1859.7, 4967 ± 721.2vs. 13687 ± 2611.2, 7647 ± 1950.0vs. 17719 ± 1814.2, respectively, allp < 0.05). The ROS levels were higher in

关键词： p62/sqstm1 Candida albicans macrophage innate immune response phagocytosis

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辐射诱导p62/sqstm1介导的细胞早衰研究进展

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中华放射医学与防护杂志 2020年第12期40卷 968-972页

作者：马丽萍刘青杰田梅高玲中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所辐射防护与核应急中国疾病预防控制中心重点实验室北京100088

细胞早衰是指细胞在非端粒信号刺激下发生的增殖能力和生理功能下降,提前进入衰老状态。电离辐射可以引起细胞DNA损伤,随后经过细胞周期永久性停滞或启动SASp来诱导细胞早衰。其信号通路较为复杂,p53、p16、p38MApK、p62等信号分子参与... 详细信息

细胞早衰是指细胞在非端粒信号刺激下发生的增殖能力和生理功能下降,提前进入衰老状态。电离辐射可以引起细胞DNA损伤,随后经过细胞周期永久性停滞或启动SASp来诱导细胞早衰。其信号通路较为复杂,p53、p16、p38MApK、p62等信号分子参与该过程。本文总结了辐射诱导p62介导的细胞早衰研究进展。

关键词：电离辐射细胞早衰信号通路 p62/sqstm1

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p62/sqstm1 as an oncotarget mediates cisplatin resistance through activating RIp1-NF-κB pathway in human ovarian cancer cells

p62/SQSTM1 as an oncotarget mediates cisplatin resistance th...

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2017年中国肿瘤标志物学术大会暨第十一届肿瘤标志物青...

作者： Xiao-Yu Yan Yu Zhang Juan-Juan Zhang Li-Chao Zhang Ya-Nan Liu Yao Wu Ya-Nan Xue Sheng-Yao Lu Jing Su Lian-Kun Sun Department of pathophysiology College of Basic Medical SciencesJilin University

platinum-based therapeutic strategies have been widely used in ovarian cancer treatment. However, drug resistance has greatly limited therapeutic efficacy. Recently, tolerance to cisplatin has been attributed to other factors unrelated to DNA. p62(also known as sqstm1) functions as a multifunctional hub participating in tumorigenesis and may be a therapeutic target. Our previous study showed that p62 was overexpressed in drug-resistant ovarian epithelial carcinoma and its inhibition increased the sensitivity to cisplatin. In this study, we demonstrate that the activity of the NF-κB signaling pathway and K63-linked ubiquitination of RIp1 was higher in cisplatin-resistant ovarian(SKOV3/DDp) cells compared with parental cells. In addition, cisplatin resistance could be reversed by inhibiting the expression of p62 using siRNA. Furthermore, deletion of the ZZ domain of p62 that interacts with RIp1 in SKOV3 cells markedly decreased K63-linked ubiquitination of RIp1 and inhibited the activation of the NF-κB signaling pathway. Moreover, loss of the ZZ domain from p62 led to poor proliferative capacity and high levels of apoptosis in SKOV3 cells and made them more sensitive to cisplatin treatment. Collectively, we provide evidence that p62 is implicated in the activation of NF-κB signaling that is partly dependent on RIp1. p62 promotes cell proliferation and inhibits apoptosis thus mediating drug resistance in ovarian cancer cells.

关键词： p62/sqstm1 drug resistance NF-KB pathway RIp1 ovarian cancer

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Development of a luciferase-based reporter system with p62/sqstm1 variants for detecting autophagic flux in glioma cells

Development of a luciferase-based reporter system with p62/S...

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中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议

作者： ZHANG Min ZHANG Chenguang YAO Ting GONG Mingtao DING Wei Department of Biochemistry and Molecular Biology School of Basic Medical Sciences Capital Medical University Beijing Stomatological Hospital School of Stomatology Capital Medical University Beijing Key Laboratory for Researches in Cancer Invasion and Metastasis Cancer Institute of Capital Medical University

The activation of autophagy was commonly detected by the formation of autophagosome,or the conversion of LC3 from I to II forms,accompanied with the increased levels of autophagy-related ***,the assays to allow quantifiable measures of the dynamics of cellular autophagy,which was referred as the"autophagic flux",remained to be *** the

关键词： Autophagy p62/sqstm1 luminescence reporter Autophagic flux Glioma

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pIK3C3 siRNA-pool对大鼠pC12细胞pIK3C3及p62/sqstm1表达的影响

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山东医药 2017年第12期57卷 36-38页

作者：李军萍左剑玲王丽娜孟晓文苏州大学附属第一医院江苏苏州215006

目的探讨磷脂酰肌醇激酶3(pIK3C3)小干扰RNA(siRNA)-pool对大鼠pC12细胞pIK3C3及p62/sqstm1表达的影响。方法将处于对数生长期的pC12细胞随机分为正常组、载体组、阴性对照组及siRNA 25、50、100 nmol/L组。正常组常规培养,其余组均给... 详细信息

目的探讨磷脂酰肌醇激酶3(pIK3C3)小干扰RNA(siRNA)-pool对大鼠pC12细胞pIK3C3及p62/sqstm1表达的影响。方法将处于对数生长期的pC12细胞随机分为正常组、载体组、阴性对照组及siRNA 25、50、100 nmol/L组。正常组常规培养,其余组均给予载体Lipofectamine2000转染;在转染的同时,阴性对照组加入200 pmol/L FAM-siRNA;siRNA 25、50、100 nmol/L组采用siRNA-pool法分别加入含50、100、200 nmol/L siRNA。各组转染24 h时,采用MTT法检测细胞存活率,采用RT-pCR法检测pIK3C3 mRNA相对表达量;转染48 h时,采用免疫细胞化学法检测p62/sqstm1表达。结果转染24 h时,正常组、载体组、阴性对照组及siRNA 25、50、100nmol/L组细胞存活率分别为100%、(98.4±1.7)%、(99.7±2.4)%、(104.3±2.8)%、(101.6±5.1)%、(96.9±1.9)%,组间比较p均>0.05;pIK3C3 mRNA相对表达量分别为1、1.01±0.11、0.93±0.07、0.85±0.06、0.78±0.03、0.65±0.04,siRNA 50 nmol/L组pIK3C3 mRNA相对表达量均低于正常组及载体组,siRNA 100 nmol/L组均低于其他各组,组间比较p1。正常组及siRNA 100 nmol/L组p62/sqstm1表达光密度值分别为0.038±0.001、0.054±0.004,组间比较p1。结论 pIK3C3 siRNA-pool可抑制pC12细胞pIK3C3表达,促进p62/sqstm1蓄积。

关键词： pC12细胞小干扰RNA 磷脂酰肌醇激酶3 p62/sqstm1

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MiR-21负调控pCBp1-p62/sqstm1抑制CVB3复制

MiR-21负调控PCBP1-p62/SQSTM1抑制CVB3复制

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作者：贺洪岩湖南大学

学位级别：硕士

柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）是引起人类病毒性心肌炎（viralmyocarditis,VMC）、胰腺炎（pancreatitis）和脑膜炎（meningitis）的常见病原体之一。虽然在半个世纪之前已经发现了CVB3,目前尚未研究出治疗该病毒引起疾病的... 详细信息

柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）是引起人类病毒性心肌炎（viralmyocarditis,VMC）、胰腺炎（pancreatitis）和脑膜炎（meningitis）的常见病原体之一。虽然在半个世纪之前已经发现了CVB3,目前尚未研究出治疗该病毒引起疾病的有效药物,且无疫苗,主要是由于我们对CVB3与宿主细胞之间的相互作用的具体机制不够清楚,缺乏药物靶标。研究发现,CVB3感染细胞的过程中,宿主中的多种蛋白质或非编码RNA（non-coding NA,nc RNA）与CVB3相互作用并影响其感染。在我们之前的研究中发现CVB3感染可以上调心肌中富含的微小RNA 21（microRNA-21,mi R-21）,不过mi R-21影响CVB3感染的具体作用机制尚未明确。已有研究报道microRNA可以调控多种基因的表达;也有研究发现CVB3感染不仅可以诱导细胞自噬,并且可以利用其过程完成自身的复制。基于以上,本文以CVB3感染的He La细胞为研究模型,主要利用蛋白印迹（Western Blot）、实时荧光定量pCR（Quantitative Real-time pCR,RT-q pCR）、双荧光素酶报告实验（Dual Luciferin Reporter Assay）等技术手段检测细胞被CVB3感染后的抗病毒分子变化,及其相互作用影响CVB3的具体机制。本研究基于先前CVB3感染上调mi R-21的结果,首先利用生物信息学的方法预测了mi R-21的作用靶标是pCBp1,通过构建pCBp1 3’UTR的双荧光素酶报告系统,用此系统确定了pCBp1是mi R-21的直接靶标。发现CVB3感染He La可以抑制细胞pCBp1表达,且过表达pCBp1可以促进CVB3感染。接着探讨了pCBp1与CVB3互作对自噬的影响,通过改变pCBp1蛋白水平,研究自噬途径相关分子的变化,本研究结果显示pCBp1的改变不引起LC3B的变化;pCBp1过表达降低了p62/sqstm1蛋白质水平,但没有降低其m RNA水平,表明pCBp1在翻译水平上调控p62/sqstm1表达。此外,通过双荧光素酶报告基因分析,证实了pCBp1与p62/sqstm1的5’UTR相互作用,抑制其翻译。本研究揭示了CVB3感染中的一个新机制,过表达pCBp1抑制p62/sqstm1蛋白表达,正调控CVB3复制。其中,CVB3感染中mi R-21介导了pCBp1的下降,诱导了宿主细胞的抗病毒作用。mi R-21介导的pCBp1在CVB3感染过程中的作用机制,可以为治疗由CVB3感染引起的病毒性心肌炎提供新的药物靶标和研究方向。

关键词：柯萨奇病毒B3 microRNA-21 poly(rC)结合蛋白1 p62/sqstm1 自噬

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p62/sqstm1在动脉粥样硬化中的研究进展

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国际免疫学杂志 2019年第2期42卷 203-207页

作者：梁晓飞王超关秀茹哈尔滨医科大学附属第一医院检验科 150001

动脉粥样硬化是一种以脂代谢异常和炎症反应为特征的渐进性疾病,自噬在疾病的演变中发挥重要作用.p62/sqstm1是连接泛素化蛋白到自噬机制的重要调控分子,可以经多条信号通路参与疾病的调控.因此,基于自噬理论研究p62在动脉粥样硬化中的... 详细信息

动脉粥样硬化是一种以脂代谢异常和炎症反应为特征的渐进性疾病,自噬在疾病的演变中发挥重要作用.p62/sqstm1是连接泛素化蛋白到自噬机制的重要调控分子,可以经多条信号通路参与疾病的调控.因此,基于自噬理论研究p62在动脉粥样硬化中的作用具有重要意义.大量研究表明p62参与泡沫细胞形成、炎症因子释放及斑块的不稳定.在动脉粥样硬化早期,p62可以延缓疾病的发展,而病变晚期,p62可以导致斑块不稳定.以下从p62的结构和功能及其在自噬和动脉粥样硬化中的作用进行了综述,以期为阐明动脉粥样硬化的发病机制提供依据.

关键词：动脉粥样硬化自噬泛素 p62/sqstm1

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p62/sqstm1蛋白在动脉粥样硬化中的研究进展

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国际免疫学杂志 2018年第5期41卷 574-577页

作者：荆红运丁玲于菲关秀茹哈尔滨医科大学附属第一医院检验科 150001

动脉粥样硬化是危害人类健康的主要疾病之一。具体发病机制仍不清楚。近年来,越来越多的证据表明自噬和p62/sqstm1蛋白在动脉粥样硬化的形成和发展过程中发挥重要作用。自噬具有抗动脉粥样硬化和促进动脉粥样硬化双重作用。p62是一种多... 详细信息

动脉粥样硬化是危害人类健康的主要疾病之一。具体发病机制仍不清楚。近年来,越来越多的证据表明自噬和p62/sqstm1蛋白在动脉粥样硬化的形成和发展过程中发挥重要作用。自噬具有抗动脉粥样硬化和促进动脉粥样硬化双重作用。p62是一种多功能蛋白,本身依赖自噬降解,又参与多种信号通路过程。自噬与p62的关系错综复杂,深入了解自噬和p62在动脉粥样硬化中的作用对于未来动脉粥样硬化的治疗有重要意义。

关键词： p62/sqstm1 自噬动脉粥样硬化泡沫细胞

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p62/sqstm1与自噬在胃癌组织中表达及临床意义

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莆田学院学报 2020年第2期27卷 57-61页

作者：林海凤陈智伟刘芳芳莆田学院附属医院消化内科福建莆田351100 莆田学院附属医院病理科福建莆田351100

观察p62/sqstm1(简称p62)在胃癌组织中的表达水平,探讨p62与自噬的关系及临床意义。采用免疫组织化学检测胃癌石蜡标本中p62的表达情况,并分析p62与临床病理资料及预后的关系,同时检测胃癌和癌旁新鲜组织中p62 mRNA及蛋白的表达水平。结... 详细信息

观察p62/sqstm1(简称p62)在胃癌组织中的表达水平,探讨p62与自噬的关系及临床意义。采用免疫组织化学检测胃癌石蜡标本中p62的表达情况,并分析p62与临床病理资料及预后的关系,同时检测胃癌和癌旁新鲜组织中p62 mRNA及蛋白的表达水平。结果,190例胃癌石蜡标本中p62阳性率高于癌旁正常组织(pp62的表达与浸润深度、淋巴结转移、临床分期有关(pp62阳性患者5年生存率为33.2%,低于p62阴性患者的55.3%(pp62 mRNA和蛋白的表达水平显著高于相应癌旁正常组织。结果表明:p62促进胃癌的发生发展及转移,是评估胃癌术后患者预后的一个重要标志。

关键词：胃癌 p62/sqstm1 预后自噬 LC3

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