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康复新液对兔KOA软骨细胞增殖及p44/42mapk蛋白表达的实验研究

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云南中医学院学报 2017年第4期40卷 30-33页

作者：王涛殷红廖江龙何云鹏李金磊艾元亮许燕飞刘维统杨光温辉杨景帆昆明市中医医院云南昆明650011 云南中医学院云南昆明650500

目的建立体外培养兔KOA软骨细胞系,观察康复新液对兔KOA软骨细胞增殖的影响,并测定康复新液作用下兔KOA软骨细胞中p44/42mapk蛋白表达的情况。方法将手术中取得的兔膝骨关节炎骨片,使用酶消化法进行培养,取生长良好的第3代兔KOA软骨细... 详细信息

目的建立体外培养兔KOA软骨细胞系,观察康复新液对兔KOA软骨细胞增殖的影响,并测定康复新液作用下兔KOA软骨细胞中p44/42mapk蛋白表达的情况。方法将手术中取得的兔膝骨关节炎骨片,使用酶消化法进行培养,取生长良好的第3代兔KOA软骨细胞进行实验。将不同浓度的康复新液分别加入第3代兔KOA软骨细胞中,用CCK8法评价康复新液对兔KOA软骨细胞增殖的影响;用Western blotting检测康复新液作用下兔KOA软骨细胞中p44/42mapk蛋白表达情况。结果 20mol/L、15mol/L、10mol/L康复新液组对兔KOA软骨细胞抑制水平较DMSO对照组强,差异均有统计学意义(pp44/42mapk蛋白表达水平较空白对照组强,差异均有统计学意义(pp44/42mapk蛋白表达水平较空白对照组强,差异有显著统计学意义(pp44/42mapk蛋白的表达进而抑制兔KOA软骨细胞的增殖。

关键词：康复新液软骨细胞 p44/42mapk

p44/42mapk在糖尿病肾病中的研究进展

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医学综述 2010年第14期16卷 2084-2086页

作者：王玉容徐勇泸州医学院附属医院四川泸州646000

糖尿病肾病(DN)是与糖尿病相关危及生命的致死性疾病,长期高血糖导致肾小球系膜细胞病理反应,如细胞外基质过度增生并最终导致DN,其发病机制不清。p44/42mapk信号转导通路可通过巨噬细胞、生长因子介导、纤维连接蛋白表达以及基底膜的... 详细信息

糖尿病肾病(DN)是与糖尿病相关危及生命的致死性疾病,长期高血糖导致肾小球系膜细胞病理反应,如细胞外基质过度增生并最终导致DN,其发病机制不清。p44/42mapk信号转导通路可通过巨噬细胞、生长因子介导、纤维连接蛋白表达以及基底膜的破坏参与DN的发病。研究发现,细胞外信号调节激酶p44/42mapk的阻断剂pD98059可明显延缓DN的发生发展。

关键词： p44/42mapk 糖尿病肾病纤维连接蛋白

磷酸化的蛋白激酶p44/42mapk在成年大鼠脑内的分布

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解剖学报 2001年第2期32卷 121-126,T005,T006页

作者：王曦王百忍黄文晋段晓莉鞠躬第四军医大学神经科学研究所神经免疫调节研究室西安710032

目的　研究活化形式的 p44 / 42 mapk在成年正常大鼠脑内的分布。　方法　免疫组织化学方法(ABC法 )。　结果　磷酸化的 p44 / 42 mapk在正常大鼠脑内有广泛的表达 ,出现在许多核团 ,特别是在岛皮质、感觉运动及视、听皮质、扣带前皮质... 详细信息

目的　研究活化形式的 p44 / 42 mapk在成年正常大鼠脑内的分布。　方法　免疫组织化学方法(ABC法 )。　结果　磷酸化的 p44 / 42 mapk在正常大鼠脑内有广泛的表达 ,出现在许多核团 ,特别是在岛皮质、感觉运动及视、听皮质、扣带前皮质、海马尾侧的内嗅区、内侧杏仁核、皮质杏仁核和中介核、视上核、视交叉上核、A14区、下丘脑室旁核大细胞部、弓状核、前腹侧视前核、下丘脑后区、顶盖前区、室周灰质腹外侧柱、蓝斑、臂旁外侧核、小脑 purkinje细胞、A5区、旁巨细胞外侧核、吻侧 (C1区 )和尾侧 (A1区 )延髓腹外侧网状结构等。阳性结构主要见于神经元的胞浆、胞核和突起内 ,在部分脑膜细胞和少突胶质细胞内也有表达。　结论　活化的 p44 / 42 mapk在脑内的广泛存在提示其作为重要的信号转导分子在正常状态下的脑功能活动中可能起重要作用。

关键词：磷酸化 p44/42mapk 脑免疫细胞化学大鼠蛋白激酶

磷酸化的p44/42mapk在成年猫端脑和间脑内的分布

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中国组织化学与细胞化学杂志 2001年第1期10卷 91-93,120页

作者：李改丽张守信金亮黄文晋王百忍鞠躬第四军医大学神经科学研究所神经免疫调节研究室陕西西安710032 陆军第三医院神经内科陕西宝鸡721004

为研究丝裂原激活的蛋白激酶 (p44 /4 2 m itogen- activated protein kinase,缩写为 p44 /4 2 mapk)在正常动物脑内的功能 ,用免疫组织化学方法对正常家猫端脑和间脑内 ,磷酸化 p44 /4 2 mapk的分布进行了研究 ,结果表明在正常猫端脑... 详细信息

为研究丝裂原激活的蛋白激酶 (p44 /4 2 m itogen- activated protein kinase,缩写为 p44 /4 2 mapk)在正常动物脑内的功能 ,用免疫组织化学方法对正常家猫端脑和间脑内 ,磷酸化 p44 /4 2 mapk的分布进行了研究 ,结果表明在正常猫端脑和间脑内 ,磷酸化 p44 /4 2 mapk的存在范围比较广泛 ,嗅球、岛叶、梨状皮质、外侧隔区、海马锥体细胞层、下丘脑腹内侧核及弓状核内均有较多的阳性神经元 ,杏仁核存在中等量的阳性神经元。另外 ,新皮质层、内侧隔区、齿状回、纹状体、丘脑室旁核和外侧缰核、下丘脑室旁核有散在分布的阳性神经元。外侧膝状体和丘脑腹后核有许多胶质细胞呈免疫阳性染色。嗅束内有浓密的阳性纤维。本研究结果表明 p44 /4 2 mapk存在于与嗅觉、情绪、内分泌和记忆活动等功能有关的脑区和核团 ,提示其参与这些功能过程。本文还提示 p44 /4 2 mapk既与神经细胞。

关键词：磷酸化 p44/42mapk 成年猫端脑间脑分布免疫组织化学

p44/42 mapk和STAT3在γ射线诱发的小鼠白血病骨髓细胞中的表达

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生物化学与生物物理进展 2003年第2期30卷 199-203页

作者：傅志超蔡建明韩玲王凤玫黄定德黄越承李百龙高建国第二军医大学海医系放射医学教研室上海200433 第二军医大学基础部组织胚胎学教研室上海200433

为了观察p4 4 / 4 2mapk和STAT3在γ射线诱发的小鼠白血病骨髓细胞中的变化情况 ,首先利用γ射线诱发Balb/C小鼠发生白血病 ,成功地建立了辐射致癌模型 .在此基础上 ,将动物分为三组 :癌变组、辐射未癌变组和对照组 ,利用免疫沉淀和免... 详细信息

为了观察p4 4 / 4 2mapk和STAT3在γ射线诱发的小鼠白血病骨髓细胞中的变化情况 ,首先利用γ射线诱发Balb/C小鼠发生白血病 ,成功地建立了辐射致癌模型 .在此基础上 ,将动物分为三组 :癌变组、辐射未癌变组和对照组 ,利用免疫沉淀和免疫印迹技术 ,检测各组骨髓细胞的p4 4 / 4 2mapk和STAT3蛋白及磷酸化水平变化情况 .结果显示 :癌变组骨髓细胞p4 4 / 4 2mapk蛋白及磷酸化水平均高于辐射未癌变组和对照组 (p p >0 0 5 ) .说明Ras/p4 4 / 4 2mapk途径可能在γ射线诱发的小鼠白血病中发挥一定的作用。

关键词： p44/42mapk STAT3 白血病骨髓细胞辐射致癌信号转导肿瘤生长因子丝裂活化蛋白激酶

磷酸化的蛋白激酶p44/42mapk在成年大鼠脑内的分布

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空军军医大学学报 2001年第10期22卷 915-915页

作者：王曦王百忍黄文晋段晓莉鞠躬甄志强

［王曦，王百忍，黄文晋，段晓莉，鞠躬. 解剖学报，2001;32(2):121-125］目的研究活化形式的p44/42 mapk在成年大鼠脑内的分布. [ HTH〗方法免疫组织化学方法(ABC 法). 结果磷酸化的p44/42 mapk在正常大鼠脑内有广泛的表达，出现在许... 详细信息

［王曦，王百忍，黄文晋，段晓莉，鞠躬. 解剖学报，2001;32(2):121-125］目的研究活化形式的p44/42 mapk在成年大鼠脑内的分布. [ HTH〗方法免疫组织化学方法(ABC 法). 结果磷酸化的p44/42 mapk在正常大鼠脑内有广泛的表达，出现在许多核团，特别是在岛皮质、感觉运动及视、听皮质、扣带前皮质、海马尾侧的内嗅区、内侧杏仁核、皮质杏仁核和中介核、视上核、视交叉上核、A14区、下丘脑室旁核大细胞部、弓状核、前腹侧视前核、下丘脑后区、顶盖前区、室周灰质腹外侧柱、蓝斑、臂旁外侧核、小脑purkinje细胞、A5区、旁巨细胞外侧核、吻侧(C1区)和尾侧(A1区)延髓腹外侧网状结构等. 阳性结构主要见于神经元的胞浆、胞核和突起内，在部分脑膜细胞和少突胶质细胞内也有表达. 结论活化的p44/ 42 mapk在脑内的广泛存在提示其作为重要的信号转导分子在正常状态下的脑功能活动可能起重要作用.(甄志强)

关键词：成年大鼠 p44/42mapk 磷酸化脑内

p44/42 mapk细胞信号传导通路在女性压力性尿失禁患者尿道支撑组织中的表达和意义

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P44/42 MAPK细胞信号传导通路在女性压力性尿失禁患者尿道支撑组...

作者：黄琼浙江大学

学位级别：硕士

背景和目的：压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)指腹压增加时尿液不自主溢出,是一种严重影响生活质量的中老年妇女常见慢性病,分娩损伤和雌激素水平低下是该病发病的两大诱因,然而其发病机制迄今未明。目前较公认的SUI... 详细信息

背景和目的：压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)指腹压增加时尿液不自主溢出,是一种严重影响生活质量的中老年妇女常见慢性病,分娩损伤和雌激素水平低下是该病发病的两大诱因,然而其发病机制迄今未明。目前较公认的SUI发病机制相关学说——盆底整体理论和吊床假说认为,阴道前壁等尿道支撑组织的结构和功能缺陷导致了该病的发生。尿道支撑组织主要成分为结缔组织,由大量细胞外基质(extracellular matrix, ECM)和少量细胞组成;其中,成纤维细胞在介导以胶原为主要成分的ECM代谢中占据核心地位,但具体调控途径不明。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,mapks)细胞信号传导通路是细胞应激和损伤反应的主要信号通路,该酶同时也是雌激素受体细胞信号传导通路主要激酶;其中,p44/42mapk信号通路在人体许多组织成纤维细胞的分化、增殖以及合成ECM的过程中发挥关键作用。本研究拟通过采用免疫组化法观测女性尿道支撑组织磷酸化p44/42mapk(p-p44/42mapk)的定位表达,采用Western blot法观测SUI患者与非SUI患者之间尿道支撑组织p-p44/42mapk的表达差异,明确尿道支撑组织p-p44/42mapk表达与SUI发病的相关性;同时,通过女性尿道支撑组织成纤维细胞体外实验,采用RT-pCR和Western blot法观测p44/42mapk特异性抑制剂干预对成纤维细胞合成胶原量的影响,探讨p44/42mapk细胞信号传导通路在SUI发病机制中的作用。方法： 1、临床实验：收集浙江大学医学院附属妇产科医院2010年1月至2011年1月收治的10例SUI患者(SUI组)和10例非压力性尿失禁妇女(对照组)的阴道前壁组织(即尿道支撑组织),所有组织标本来源于SUI患者行抗尿失禁手术时和非SUI患者因阴道前壁囊肿或宫颈癌手术时,取材于宫颈外口下方1cm-2cm处约0.5*1cm2的阴道前壁全层组织。采用免疫组化En Vision染色法检测组织中p-p44/42mapk蛋白表达的定位,采用Western blot法检测组织中p-p44/42mapk蛋白表达水平,比较SUI组和非SUI组之间尿道支撑组织p-p44/42mapk蛋白表达的差异。 2、细胞实验：用女性尿道支撑组织的新鲜标本组织块进行纤维细胞培养,体外构建女性尿道支撑组织成纤维细胞模型,予或不予p44/42mapk特异性抑制剂pD98059干预,采用RT-pCR和Western blot法,检测Ⅰ/Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达水平,比较pD98059干预对成纤维细胞合成胶原量的影响。结果： 1、免疫组化En Vision染色结果证实女性尿道支撑组织成纤维细胞、鳞状上皮细胞、血管内皮细胞中存在p-p44/42mapk蛋白强表达,以细胞核和细胞质表达为 2、经t检验和χ2检验,SUI组和对照组两组之间患者年龄、产次、分娩方式、绝经与否和体重指数均无显著性差异;对照组尿道支撑组织p-p44mapk蛋白和p-p42mapk蛋白表达量分别为71.93±15.01和76.54±15.32;SUI组尿道支撑组织p-p44mapk蛋白和p-p42mapk蛋白表达量分别为21.65±7.04和40.44±18.95,经t检验,SUI组尿道支撑组织p-p44mapk和p-p42mapk蛋白表达量均显著下降(p均pD98059干预前,体外培养的女性尿道支撑组织成纤维细胞Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白表达量分别为9.82±0.13和12.08±0.95,Ⅲ型胶原的mRNA和蛋白表达量分别为8.16±0.11和13.72±1.47;pD98059干预后,体外培养的成纤维细胞Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白表达量分别为7.08±0.11和8.68±0.84,Ⅲ胶原的mRNA和蛋白表达量分别为6.00±0.07和10.94±1.76;经t检验,p44/42mapk特异性抑制剂pD98059干预后,成纤维细胞中Ⅰ型和Ⅲ胶原的mRNA和蛋白表达量均显著下降(p均p44/42mapk蛋白表达;2、SUI患者尿道支撑组织中磷酸化p44/42mapk蛋白表达水平明显降低,提示p44/42mapk细胞信号通路与SUI发病相关;3、p44/42mapk特异性抑制剂pD98059干预后,体外培养的女性尿道支撑组织成纤维细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达量明显下降,推测p44/42mapk细胞信号通路参与SUI发病的机制可能与该通路活性下调、引起成纤维细胞介导的胶原合成减少、导致细胞外基质代谢障碍有关。

关键词：压力性尿失禁 p44/42mapk 成纤维细胞胶原

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粉尘螨变应原对树突状细胞作用的研究

免疫学杂志 2009年第6期25卷 659-661,665页

作者：李湘辉沈小英刘志刚朱清仙莫绪成深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所南昌大学基础医学院组织胚胎学教研室

目的研究粉尘螨(Der.f)变应原对树突状细胞的作用。方法分别检测经Der.f变应原作用后,DC2.4(树突状细胞株)细胞白介素-12(IL-12)和IL-10的分泌,TLR2受体的基因表达和丝裂原活化蛋白激酶(mapk)p44/42的磷酸化水平。结果Der.f促进DC2.4IL... 详细信息

目的研究粉尘螨(Der.f)变应原对树突状细胞的作用。方法分别检测经Der.f变应原作用后,DC2.4(树突状细胞株)细胞白介素-12(IL-12)和IL-10的分泌,TLR2受体的基因表达和丝裂原活化蛋白激酶(mapk)p44/42的磷酸化水平。结果Der.f促进DC2.4IL-10的分泌(由空白组的不分泌到Der.f作用组的27.7pg/mL,ppg/mL到Der.f作用组的15.9pg/mL,pp44/42mapk蛋白的磷酸化和TLR2的基因表达,U0126可逆转其细胞因子的分泌模式,并降低p44/42mapk磷酸化水平。结论Der.f变应原可影响树突状细胞的细胞因子分泌,受体表达及信号通路磷酸化水平。

关键词：粉尘螨粗提液树突状细胞白介素-12 白介素-10 TLR2 p44/42mapk