检索结果-南通市图书馆

oshal3, a Blue Light-Responsive Protein, Interacts with the Floral Regulator Hdl to Activate Flowering in Rice

Molecular Plant 2016年第2期9卷 233-244页

作者： Lei Su Jun-Xiang Shan Ji-Ping Gao Hong-Xuan Lin National Key Laboratory of Plant Molecular Genetics CAS Centre for Excellence in Molecular Plant Sciences and Collaborative Innovation Center of Genetics and Development Shanghai Institute of Plant Physiology and Ecology Shanghai Institutes for Biological Sciences Chinese Academy of Sciences 300 Fenglin Road Shanghai 200032 China

In flowering plants, photoperiodic flowering is controlled by a complicated network. Light is one of the most important environmental stimuli that control the timing of the transition from vegetative growth to reproductive development. Several photoreceptors, including PHYA, PHYB, CRY2, and FKF1 in Arabi- dopsis and their homologs （OsPHYA, OsPHYB, OsPHYC, and OsCRY2） in rice, have been identified to be related to flowering. Our previous study suggests that oshal3, a flavin mononucleotide-binding protein, may function as a blue-light sensor. Here, we report the identification of oshal3 as a positive regulator of flowering in rice. oshal3 overexpression lines exhibited an early flowering phenotype, whereas down- regulation of oshal3 expression by RNA interference delayed flowering under an inductive photoperiod （short-day conditions）. The change in flowering time was not accompanied by altered I-Idl expression but rather by reduced accumulation of Hd3a and MADS14 transcripts. oshal3 and Hdl colocalized in the nucleus and physically interacted in vivo under the dark, whereas their interaction was inhibited by white or blue light. Moreover, oshal3 directly bound to the promoter of Hd3a, especially before dawn. We conclude that oshal3, a novel light-responsive protein, plays an essential role in photoperiodic control of flowering time in rice, which is probably mediated by forming a complex with Hdl. Our findings open up new perspectives on the photoperiodic flowering pathway.

关键词： Oryza sativa photoperiodic flowering blue-light-responsive protein oshal3 Hdl

来源：

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻oshal3蛋白PPCDC活性关键氨基酸位点研究

水稻OsHAL3蛋白PPCDC活性关键氨基酸位点研究

引用

作者：国晓玲沈阳农业大学

学位级别：硕士

水稻中的oshal3是一种黄素蛋白,具有4’-磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶(PPCDC)活性和抗盐功能。为了深入研究oshal3蛋白氨基酸序列中决定PPCDC功能的关键位点,以揭示PPCDC催化反应的分子机制,本文利用PCR介导的定点突变技术向oshal3蛋白引入... 详细信息

水稻中的oshal3是一种黄素蛋白,具有4’-磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶(PPCDC)活性和抗盐功能。为了深入研究oshal3蛋白氨基酸序列中决定PPCDC功能的关键位点,以揭示PPCDC催化反应的分子机制,本文利用PCR介导的定点突变技术向oshal3蛋白引入一系列单点突变,并分别构建了携带不同点突变的oshal3蛋白表达载体,利用4’-磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶缺陷的大肠杆菌Δdfp突变体菌株进行功能互补实验。结果表明：oshal3中保守的第Ser28、Lys35、Pro105、He126、Ala129、Pro187突变后导致oshal3互补Δdfp的功能丧失,表现出相应的转化子在42℃几乎没有生长。oshal3中保守的第Phe60、Pro140、Leu156、Pro169突变也会使oshal3蛋白的PPCDC活性降低,表现为相应的Δdfp转化子在42℃的生长速率明显降低。oshal3中保守的第Met184突变成Val184后,导致oshal3蛋白的PPCDC功能增强,对应的Δdfp转化子在42℃的生长速率较阳性对照相比明显升高。而Ser65、Ala98、Pro135的突变对oshal3蛋白PPCDC功能影响不大,并且oshal3中的第Glu9G1y163双突变后也不影响其互补Δdfp的功能。利用同源建模服务器SWISS-MODEL对oshal3蛋白进行了三维结构预测。利用DeepView软件标出了Pro169、Cys176、Gly180、Met184氨基酸残基在oshal3蛋白上的空间位置,这四个氨基酸位于底物识别夹结构域。并且利用DeepView软件还标出了与辅基FMN结合的氨基酸残基在oshal3蛋白上的空间分布,这些残基包括Ser30、Val31、Thr54、Ser57、Ser107、Ala108、Thr110、Ala141。综上,我们的研究结果表明：Ser28、Lys35、Phe60、Pro105、Ile126、 Ala129、Pro140、 Leu156、Pro169、Val184、Pro187是oshal3蛋白PPCDC功能关键位点;Ser65、Ala98、 Pro135、Glu9、Gly163突变后对oshal3蛋白PPCDC功能没有影响。

关键词： oshal3 点突变 PPCDC 关键氨基酸位点

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

HAL3蛋白家族PPCDC活性关键氨基酸位点研究

HAL3蛋白家族PPCDC活性关键氨基酸位点研究

引用

作者：周钊卉沈阳农业大学

学位级别：硕士

HAL3蛋白是在真核生物中广泛存在并具有多种功能的一类蛋白。拟南芥、烟草、水稻、玉米等植物中的HAL3蛋白都具有4’-磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶(PPCDC)活性,并都与植物耐盐性相关。PPCDC是辅酶A(Co A)合成过程中的关键酶,我们推断真核生... 详细信息

HAL3蛋白是在真核生物中广泛存在并具有多种功能的一类蛋白。拟南芥、烟草、水稻、玉米等植物中的HAL3蛋白都具有4’-磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶(PPCDC)活性,并都与植物耐盐性相关。PPCDC是辅酶A(Co A)合成过程中的关键酶,我们推断真核生物中的HAL3蛋白是通过其PPCDC活性调节生物体内Co A含量,并影响Co A相关的下游代谢途径从而影响该生物的耐盐性。为了验证我们的推论,我们对水稻Os HAL3中的某些氨基酸位点进行点突变,并通过互补大肠杆菌Δdfp温度敏感突变型菌株来判断该突变位点是否对该蛋白的PPCDC的活性有所影响。并且将上述实验筛选出的对Os HAL3的PPCDC活性有关键性影响的氨基酸位点进行点突变后构建植物表达载体,并转化日本晴野生型水稻获得超表达携带突变的ΔOs HAL3的转基因水稻。通过检测野生型水稻、超表达正常Os HAL3蛋白的转基因水稻和超表达不同ΔOs HAL3蛋白的转基因水稻中的Co A含量和脯氨酸含量,验证在水稻体内,HAL3蛋白上特定氨基酸位点的突变对PPCDC活性的影响是否与体外试验—互补大肠杆菌Δdfp温度敏感性试验相一致。我们的最终目的是实现通过氨基酸定点突变改造HAL3蛋白,从而调节水稻中Co A含量,使得水稻在盐胁迫下的耐受力增加。我们在前期工作中发现Os HAL3-Cys(第176号氨基酸位点)突变后在温度敏感性试验中能够使PPCDC活性丧失,Os HAL3-Ala突变后在温度敏感性试验中能够提高PPCDC活性,因此将Ala和Cys两个氨基酸位点分别进行点突变,构建植物表达载体,再利用农杆菌介导分别转化野生型日本晴水稻,得到转基因株系。我们以过表达正常Os HAL3蛋白的转基因水稻为阳性对照,野生型日本晴为阴性对照,进行后续检测。对转基因水稻的三个株系Os HAL3、ΔOs HAL3-108、ΔOs HAL3-176以及野生型水稻进行检测,其中Os HAL3、ΔOs HAL3-108中Co A的含量比野生型日本晴株系的含量高40%和67%,而ΔOs HAL3-176株系中的Co A含量比野生型日本晴株系中的含量低了26%。其中转基因水稻中的Os HAL3、ΔOs HAL3-108游离脯氨酸含量是野生型日本晴株系的2.27倍和4.41倍,ΔOs HAL3-176的转基因株系中的游离脯氨酸含量则是野生型日本晴株系含量的0.65倍。本试验还对水稻Os HAL3、拟南芥At HAL3、玉米Zm HAL3和出芽短梗霉的Ap HAL3蛋白上多个氨基酸位点进行单点突变,并且构建体外表达载体,转化大肠杆菌温度敏感突变菌株,对这些氨基酸位点对HAL3蛋白的PPCDC活性的影响进行研究。通过大肠杆菌转化子生长速率和Δdfp温度敏感试验发现:Os HAL3蛋白的Leu、Ala、Met单点突变,可以使PPCDC的活性增强;Zm HAL3蛋白的Leu、Ala、Met;Ap HAL3蛋白的Glu、Ala、Lys和At HAL3蛋白ProAla分别进行单点突变后,对于PPCDC的活性没有明显影响;At HAL3蛋白的Asn突变后,对于PPCDC的活性有一定的抑制作用。上述结果表明在水稻的Os HAL3的66、108和184号位点突变后能够提高PPCDC的活性,而在拟南芥、玉米和出芽短梗霉中突变相对应的氨基酸,却不能提高PPCDC的活性。

关键词： HAL3蛋白 oshal3 PPCDC活性关键氨基酸位点点突变

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：