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Expression of Kaposi's Sarcoma-associated Herpesvirus ORFK8.1 and Its Preliminary Diagnostic Application

Virologica Sinica 2009年第3期24卷 202-208页

作者： Bi-shi FU Bao-lin LI Xin-xing OUYANG Yan ZENG Fan-hong XU Lin-ding WANG State Key Laboratory of Virology Wuhan Institute of Virology Chinese Academy of Sciences Wuhan 430071China Graduate School of the Chinese Academy of Sciences Beejing 100039 China Shanghai Institute of Biological Products Shanghai 200052 China Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases Shihezi University Shihezi 832002 China

The ORFK8.1 of Kaposi＇s sarcoma associated-herpesvirus （KSHV） was expressed in a prokaryotic expression system. The expression of recombinant *** containing pQE-80L-orf KS.1 was induced by isopropyl-b-D-thiogalactopyranoside （IPTG）. The fusion protein was purified by chromatyography. The expressed protein and its purified product were identified by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel eletrophoresis （SDS-PAGE）. SDS-PAGE showed that a protein of 26 kDa was visualized as expected. A western blot assay was established to analyze the immunogenicity of purified recombinant orfks. 1 protein. The optimal condition of the recombinant orfks. 1 ELISA assay was confirmed： the concentration of antigen was 5 μg/mL, the dilution of serum was 1：200. We used the ELISA method to investigate the recombinant ORF KS. 1 protein＇s specificity, the data showed that the specificity of ORF KS.1 to detect KSHV was 100%. At the same time, 560 sera samples from Hubei province were detected by using orfks. 1 ELISA to investigate KSHV seroprevalence in this region. The KSHV seroprevalence in Hubei province is shown to be 6.80%.

关键词： Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) orfks. 1 Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) Seroprevalence

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