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LPS刺激小鼠骨细胞RANKL/opg和IL-6表达的实验研究

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口腔医学研究 2016年第3期32卷 220-223页

作者：余科吴湘楠刘文佳王航泸州医学院附属口腔医院修复科四川泸州646000 四川大学华西口腔医院修复科四川成都610041

目的:探讨LPS对体外培养的小鼠MLO-Y4细胞RANKL/opg和IL-6表达的影响。方法:以5mg/L的LPS刺激细胞,用CCK-8法于(12、24、48h)后检测细胞的增殖;以不同浓度(1、10、100、500、1000μg/L)的LPS刺激细胞,分别在作用4h和1.5h后用RT-PCR检测... 详细信息

目的:探讨LPS对体外培养的小鼠MLO-Y4细胞RANKL/opg和IL-6表达的影响。方法:以5mg/L的LPS刺激细胞,用CCK-8法于(12、24、48h)后检测细胞的增殖;以不同浓度(1、10、100、500、1000μg/L)的LPS刺激细胞,分别在作用4h和1.5h后用RT-PCR检测细胞对RANKL/opg和IL-6的相对表达;以100μg/L的LPS刺激细胞,分别在作用(0.5、1、2、4、8h)和(0.5、1、1.5、2、4h)两种不同时间后用RT-PCR检测细胞对RANKL/opg和IL-6的相对表达。结果:LPS对MLO-Y4细胞增殖无影响;100μg/L的LPS能显著上调细胞对RANKL和IL-6的相对表达,与(500,1000μg/L)LPS的上调结果无统计学差别;除0.5h外其余时间点LPS均上调细胞对RANKL和IL-6的相对表达,并分别在4h和1.5h达到峰值;所有样本LPS对细胞opg的相对表达均无影响。结论:一定浓度的LPS上调了MLO-Y4细胞对RANKL和IL-6的表达,而对opg的表达无影响。

关键词：脂多糖骨细胞 RANKL opg IL-6

运动性动情周期抑制雌性大鼠的骨结构与骨组织opg mRNA、opgL mRNA的表达

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天津体育学院学报 2005年第6期20卷 22-25页

作者：高丽郑陆李晓霞田中隋波李晔万利周瑞霞山东体育学院基础理论系济南250063 山东体育学院科研处济南250063 山东体育学院运动系济南250063

研究2月龄雌性SD大鼠进行10周大强度跑台运动后出现的运动性动情周期抑制现象,以模拟长期耐力运动训练后女运动员出现的运动性闭经病理现象,观察运动性动情周期抑制对骨组织结构的影响,探讨opg、opgL在运动性闭经致骨质降低中的作用。... 详细信息

研究2月龄雌性SD大鼠进行10周大强度跑台运动后出现的运动性动情周期抑制现象,以模拟长期耐力运动训练后女运动员出现的运动性闭经病理现象,观察运动性动情周期抑制对骨组织结构的影响,探讨opg、opgL在运动性闭经致骨质降低中的作用。运用光镜、透射电镜观察股骨、椎骨的显微、超微结构、RT-PCR法定量测定大鼠股骨组织的opg mRNA、opgL mRNA的表达。结果与对照组相比,运动性动情周期抑制雌性大鼠的显微结构显示皮质骨变薄,破骨细胞的数目增多,松质骨的骨小梁数目减少、纤细、排列稀疏,超微结构显示衰老骨细胞的数目增多,少数细胞呈现凋亡早期特征,同时骨组织opg mRNA表达降低,opgL mRNA表达增加。结论:10周大强度跑台运动致运动性动情周期抑制雌性大鼠骨结构的完整性破坏,骨组织opg/opgL表达的降低是影响运动性动情周期、抑制雌性大鼠骨结构变化的重要原因之一。

关键词：运动性闭经运动性动情周期抑制雌性大鼠骨结构 opg opgL

雌激素抗骨质疏松的opg/RANKL和ApoE作用机制的实验研究

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中国老年学杂志 2007年第23期27卷 2274-2276页

作者：贾少杰贾晓静北华大学附属医院骨外二科吉林吉林132001

目的观察雌激素对去卵巢C57BL/6J小鼠股骨内骨保持素(opg)、骨保护素配体(RANKL)和载脂蛋白E(ApoE)的影响。方法采用双侧卵巢切除术制备骨质疏松动物模型,1w后雌激素替代组开始每周腹腔注射苯甲酸雌二醇(EB)2次,假手术对照组和模型组均... 详细信息

目的观察雌激素对去卵巢C57BL/6J小鼠股骨内骨保持素(opg)、骨保护素配体(RANKL)和载脂蛋白E(ApoE)的影响。方法采用双侧卵巢切除术制备骨质疏松动物模型,1w后雌激素替代组开始每周腹腔注射苯甲酸雌二醇(EB)2次,假手术对照组和模型组均注射同等量的橄榄油至第6w末。6w后应用免疫组化和原位杂交法观察各组小鼠股骨内opg、RANKL、ApoE的变化。结果去卵巢模型组股骨内opg、RANKL和ApoE表达与对照组相比明显下降,而补充雌激素后opg、RANKL和ApoE的表达明显上升。结论雌激素可通过增加股骨中opg、RANKL和ApoE的表达抗骨质疏松。

关键词：骨质疏松雌激素 opg RANKL ApoE

阿仑膦酸钠和唑来膦酸预防兔激素性股骨头缺血性坏死的作用比较

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中国骨质疏松杂志 2013年第6期19卷 591-595页

作者：朱和玉朱兵孙天胜常红星吴军北京军区总医院骨科北京100700

目的通过建造兔激素性股骨头坏死模型,使用阿仑膦酸钠和唑来膦酸进行干预,观察阿仑膦酸钠和唑来膦酸能否预防兔激素性股骨头缺血性坏死,并比较两种药物的作用强弱。方法健康28周龄新西兰大白兔90只,体重(3.8±0.3)kg,雌雄不限。随机分... 详细信息

目的通过建造兔激素性股骨头坏死模型,使用阿仑膦酸钠和唑来膦酸进行干预,观察阿仑膦酸钠和唑来膦酸能否预防兔激素性股骨头缺血性坏死,并比较两种药物的作用强弱。方法健康28周龄新西兰大白兔90只,体重(3.8±0.3)kg,雌雄不限。随机分为阳性对照组(A组)、阿仑膦酸钠组(B组)、唑来膦酸组(C组),每组各30只。各组动物均经耳缘静脉注射10μg/kg大肠杆菌内毒素1次,24 h后于臀肌注射20 mg/kg甲基强的松龙,共3次,每次间隔24 h;B组同时给予阿仑膦酸钠150μg/(kg.d),共45次,颈部皮下注射;C组同时给予唑来膦酸100μg/kg,1次/4 w,共2次,耳缘静脉注射。6 w后取双侧兔股骨头骨组织,沿正中矢状面剖为两半,一半行石蜡包埋、切片,HE染色,计算空骨陷窝率,鉴定股骨头坏死情况。另一半股骨头骨组织再剖为两半,一半提取总RNA,采用实时定量聚合酶链反应(RTQ-PCR)技术检测opg mRNA和RANKL mRNA的表达水平,并计算opg/RANKL mRNA比值;一半提取骨蛋白,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)测出opg和RANKL蛋白表达量,并计算opg/RANKL比值。结果 A、B、C 3组动物死亡率分别为16.67%(5/30)、13.33%(4/30)、10%(3/30);空骨陷窝率(%)分别为26.33±1.17、20.85±1.47、18.55±2.43;股骨头坏死率分别为76.0%(19/25)、30.77%(8/26)、7.41%(2/27);RTQ-PCR检测股骨头骨组织opg mRNA分别为0.85±0.086、1.22±0.085、1.62±0.097,RANKL mRNA分别为3.23±0.78、2.84±0.95、1.43±0.93;Western Blot检测股骨头骨组织opg蛋白表达量分别为0.48±0.09、0.54±0.09、0.74±0.08;RANKL蛋白表达量分别为1.51±0.10、1.23±0.08、0.63±0.08。B、C两组股骨头坏死率低于A组,C组低于B组,差异有统计学意义(Popg mRNA和蛋白表达量较低,RANKL mRNA和蛋白表达量较高,opg/RANKL比值较低,差异有统计学意义(Popg系统的调控有关,与阿仑膦酸钠相比唑来膦酸的效果更好。

关键词：激素股骨头缺血性坏死 opg RANKL

辛伐他汀对牙周炎大鼠牙移动保持阶段opg表达影响的实验研究

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口腔医学研究 2011年第12期27卷 1052-1055页

作者：孟微陈远萍陈冲庄金良姜盼吉林大学口腔医院正畸科吉林长春130021

目的:观察牙周炎大鼠正畸性牙齿移动保持阶段,全身给予辛伐他汀对牙周组织中opg表达的影响。方法:选用雄性Wistar大鼠65只,随机分组。1)空白对照组:不做任何处置。2)阴性对照组和实验组:根据Fishcer等人的方法,在大鼠上颌第一磨牙牙颈部... 详细信息

目的:观察牙周炎大鼠正畸性牙齿移动保持阶段,全身给予辛伐他汀对牙周组织中opg表达的影响。方法:选用雄性Wistar大鼠65只,随机分组。1)空白对照组:不做任何处置。2)阴性对照组和实验组:根据Fishcer等人的方法,在大鼠上颌第一磨牙牙颈部用3～0丝线龈缘水平进行结扎,28d后诱导形成大鼠牙周炎,牵引其上颌第一磨牙向近中移动。实验组在加力装置去除前1d开始,腹膜下注射辛伐他汀,阴性对照组注射生理盐水,1次/d,分别保持1、3、7、14、21、28d后处死,免疫组化染色配合定量分析方法观察上颌第一磨牙牙根的近远中侧opg的表达变化。结果:移动牙近中牙周组织opg的表达在加力结束后逐渐减少,第7天时阴性对照组低于空白对照组,14d后两组均有少量增加;远中侧阴性对照组opg的表达在加力结束后1、3d变化不明显,而实验组opg的表达逐渐增加,但在21d后变化不明显。相同时间段比较,实验组opg表达量均高于阴性对照组。结论:辛伐他汀能够增加牙周炎大鼠正畸牙移动后牙周组织中opg的表达量。

关键词：辛伐他汀牙周炎正畸保持 opg

1h功率自行车运动对男性大学生血清sRANKL、opg及骨代谢因子的影响

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西安体育学院学报 2013年第5期30卷 596-599,620页

作者：赵仁清马楚虹陈敏雄戴艳钱永东浙江师范大学体育与健康科学学院浙江金华321004

目的研究1 h中等强度功率自行车运动对男性大学生血清破骨细胞分化因子(sRANKL)、护骨因子(opg)、骨代谢因子的影响及sRANKL、opg的变化与骨代谢因子的关系。方法 10名身体健康的男性大学生(平均年龄为21岁±2岁)参加时间为1 h、强度为... 详细信息

目的研究1 h中等强度功率自行车运动对男性大学生血清破骨细胞分化因子(sRANKL)、护骨因子(opg)、骨代谢因子的影响及sRANKL、opg的变化与骨代谢因子的关系。方法 10名身体健康的男性大学生(平均年龄为21岁±2岁)参加时间为1 h、强度为心率130 b/min的功率自行车运动,运动结束后坐位休息1 h。分别在运动前、运动30 min、运动后即刻及运动结束后30 min和60 min采集静脉血,分别测定血清sRANKL、opg、骨碱性磷酸酶(BAP)、酒石酸抗酸性磷酸酶(TRAP)、甲状旁腺激素(PTH)、钙离子(Ca++)。结果男性大学生血清opg(运动前:3.22 pmol/L±1.3 pmol/L;运动后即刻:5.02 pmol/L±1.89 pmol/L,Popg仍然维持在较高水平(运动结束后第60 min:4.56 pmol/L±1.23 pmol/L,Popg/RANKL比值升高。血清BAP、TRAP、PTH、Ca++在运动中也明显增加,运动结束后血清BAP、TRAP、Ca++迅速下降,在运动结束第60 min接近运动前的基础水平,但PTH仍维持在较高水平(37.08 pmol/L±3.07 pg/mL,Popg与BAP(t=0.51,Popg持续在较高的水平,而sRANKL显著下降,opg/sRANKL比值增高,有利于维持骨代谢正平衡。(2)运动中血清opg、sRANKL变化与骨代谢因子密切相关,其变化可能是运动影响骨代谢的重要因素。

关键词：运动骨代谢 opg sRANKL

甲状旁腺激素对成人成骨细胞护骨素和护骨素配体及其相关因子的调节

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中南大学学报（医学版） 2004年第5期29卷 562-565页

作者：苏欣廖二元彭健刘石平戴如春中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所长沙410011

目的 :探讨甲状旁腺激素 (PTH)调节骨吸收作用的途径和机制。方法 :观察PTH对人成骨细胞(HOB)表达护骨素 (opg)、护骨素配体 (opgL)及其相关因子 ,如肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体 (TRAIL)、巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)的影响 ,用RT... 详细信息

目的 :探讨甲状旁腺激素 (PTH)调节骨吸收作用的途径和机制。方法 :观察PTH对人成骨细胞(HOB)表达护骨素 (opg)、护骨素配体 (opgL)及其相关因子 ,如肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体 (TRAIL)、巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)的影响 ,用RT PCR法检测opg ,opgL ,TRAIL及M CSF基因表达情况 ,用Westernblotting分析法检测opg和opgL蛋白表达情况。结果 :PTH下调HOB细胞中opg的表达 ,上调opgL ,M CSF及TRAIL的表达。结论 :PTH通过降低成骨细胞中opg与opgL的比值 ,增加M CSF和TRAIL的表达 ,促进破骨细胞生成、活化。

关键词： opg 护骨素 M-CSF PTH 表达甲状旁腺激素人成骨细胞 TRAIL 配体 RT-PCR法

低氧诱导因子-1α参与骨发育及骨代谢调控的研究进展

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中国骨质疏松杂志 2015年第3期21卷 349-355页

作者：邵进张岩王治杨铁毅上海市浦东新区公利医院骨科上海200135

低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)是组织细胞在低氧状态下激活相应基因转录的核心调节因子之一,在骨发育和代谢过程中起到非常重要的作用。通过敲除Vhl基因高表达HIF-1α可以促进血管和骨组织的生成,但这一过程... 详细信息

低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)是组织细胞在低氧状态下激活相应基因转录的核心调节因子之一,在骨发育和代谢过程中起到非常重要的作用。通过敲除Vhl基因高表达HIF-1α可以促进血管和骨组织的生成,但这一过程的分子机制依然不明确。目前已知HIF-1α在骨的发育过程中可以调节多种蛋白因子和信号通路,如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和经典Wnt信号通路,而这些蛋白因子和信号通路大多能对细胞的分化、增殖及功能进行调节。本文综述骨组织发育和代谢过程中HIF-1α、Wnt信号通路、骨保护素(osteoprotegerin,opg)等所起的作用以及它们之间的联系,从而进一步探讨HIF-1α在骨发育及骨代谢调控中的机制。

关键词： HIF-1 opg Wnt信号通路骨发育骨代谢

泼尼松龙与地塞米松介导腰椎骨量降低的差异及其对成骨成脂基因表达的影响

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中国脊柱脊髓杂志 2015年第2期25卷 168-173页

作者：崔健超杨志东江晓兵任辉魏秋实梁德张顺聪林顺鑫唐晶晶沈耿杨广州中医药大学广州中医药大学第一附属医院二骨科广州军区广州总医院博士后科研工作站

目的：比较泼尼松龙（PRE）和地塞米松（DXM）诱导腰椎骨量丢失差异程度并利用成脂成骨经典信号通路探讨其可能机制。方法：选取3月龄SPF级雌性大鼠24只,随机分成4组：基线组（BL组）6只、年龄对照组（CON组）6只、泼尼松龙组（PRE组）... 详细信息

目的：比较泼尼松龙（PRE）和地塞米松（DXM）诱导腰椎骨量丢失差异程度并利用成脂成骨经典信号通路探讨其可能机制。方法：选取3月龄SPF级雌性大鼠24只,随机分成4组：基线组（BL组）6只、年龄对照组（CON组）6只、泼尼松龙组（PRE组）6只、地塞米松组（DXM组）6只。BL组于实验开始时麻醉处死,其余3组正常喂养,其中CON组不作任何药物干预,PRE组予5mg/kg PRE每天一次皮下注射、DXM组以1mg/kg DXM每周两次皮下注射。干预3个月后麻醉下取材。取材时立即分离右侧股骨,获取髓腔内骨髓细胞进行涂片,油红“O”检测骨髓性状;取L6椎体作反转录式-聚合酶连锁反应（RT-PCR）检测骨保护素（opg）及过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）表达;分离L1~L3椎体检测骨密度（BMD）。结果：在两种糖皮质激素（GC）分别干预3个月后,其BMD值均较CON组有明显下降（P〈0.05）,DXM组下降更为显著（P〈0.01）,且明显低于PRE组（P〈0.05）。DXM组骨组织opg表达量明显低于其余三组（P〈0.05）,但PPAR-γ则组间无明显差异。骨髓油红“O”涂片发现,两种GC组涂片阳性细胞数量多于BL组和CON组,但其组间无明显差异。结论：两种不同的糖皮质激素在诱导大鼠骨量丢失模型中,地塞米松诱导腰椎骨量减少的效果较泼尼松龙强,这可能与DXM通过opg/RANKL/RANK信号通路中更大程度地抑制opg表达有关。

关键词：糖皮质激素骨质疏松 opg PPAR-γ