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基于水-甲醇体系的onpg法测定调制乳粉中乳糖酶活力研究

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中国乳品工业 2023年第9期51卷 47-51页

作者：马跃龙张益萍褚佳玥上海市质量监督检验技术研究院国家市场监管重点实验室(乳及乳制品检测与监控技术)上海200233

建立了基于水-甲醇体系的onpg法测定调制乳粉中乳糖酶活力的测定方法。调制乳粉中的乳糖酶经水溶解提取,在特定温度、pH条件下将onpg水解生成ONP和半乳糖,以碳酸钠作为反应终止剂,使ONP显色,加入甲醇去除杂质,分光光度法定量,计算酶活... 详细信息

建立了基于水-甲醇体系的onpg法测定调制乳粉中乳糖酶活力的测定方法。调制乳粉中的乳糖酶经水溶解提取,在特定温度、pH条件下将onpg水解生成ONP和半乳糖,以碳酸钠作为反应终止剂,使ONP显色,加入甲醇去除杂质,分光光度法定量,计算酶活力。首次提出的基于水-甲醇体系的onpg分光光度法,较好地去除杂质,并提高了响应,在0.005~0.15 mmol/L范围内线性相关系数0.9997,加标回收率95.0%~98.8%,相对标准偏差0.78%~0.98%,定量限1.0 U/g。该方法线性良好,结果可靠,可以作为常规实验室测定调制乳粉中乳糖酶活力的经济、可靠的测定方法。

关键词：乳糖酶 onpg 酶活力调制乳粉

onpg培养基快速测定食品中大肠菌群的研究

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食品安全质量检测学报 2015年第12期6卷 4839-4843页

作者：李建煌姚蕾李玉优李焕仪何亮辉姜春宝曹维强深圳中检联检测有限公司深圳518052 惠州出入境检验检疫局惠州516006

目的探讨邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside,onpg)培养基在快速测定食品中大肠菌群的应用。方法比较onpg培养基和月桂基硫酸盐胰蛋白胨(lauryl sulfate tryptose,LST)肉汤测定大肠埃希氏菌不同时段的结... 详细信息

目的探讨邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside,onpg)培养基在快速测定食品中大肠菌群的应用。方法比较onpg培养基和月桂基硫酸盐胰蛋白胨(lauryl sulfate tryptose,LST)肉汤测定大肠埃希氏菌不同时段的结果,使用χ~2-test分析;比较onpg培养基和LST肉汤测定食品中大肠菌群的结果,使用Wilcoxon配对法分析。结果测定大肠埃希氏菌时onpg培养基18 h结果与LST肉汤48 h结果无显著性差异(P>0.05);测定食品中大肠菌群时onpg培养基18 h结果与LST肉汤48 h结果无显著性差异(P>0.05)。结论 onpg培养基可用于快速测定食品中大肠菌群。

关键词： onpg 大肠菌群快速测定

基于特异性酶技术的大肠菌群单管定量快速检测方法研究

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基于特异性酶技术的大肠菌群单管定量快速检测方法研究

作者：蔡尽忠华侨大学

学位级别：硕士

大肠菌群作为评价各种食品、水质和药品的重要微生物指标之一,不仅可用于判断样品是否被粪便污染,还可作为样品被肠道致病菌污染的指示菌,检测大肠菌群具有重要的微生物学意义。目前国内仍以传统的多管发酵法来检测大肠菌群,存在操作步... 详细信息

大肠菌群作为评价各种食品、水质和药品的重要微生物指标之一,不仅可用于判断样品是否被粪便污染,还可作为样品被肠道致病菌污染的指示菌,检测大肠菌群具有重要的微生物学意义。目前国内仍以传统的多管发酵法来检测大肠菌群,存在操作步骤繁琐,耗时长等缺点。近年来,基于特异性酶技术的大肠菌群快速检测技术,具有特异性强、灵敏度高、检测快速等优点,得到广泛的认可和应用。虽然基于特异性酶技术的大肠菌群快速检测技术比传统的方法有很大的改进,但到目前为止,检测结果基本都是采用目测定性判断,然后根据MPN法查得样品大肠菌群数量。这种结果判定方法容易出现人为误判,影响实验结果。此外,MPN法所得的结果精确度不高,MPN法的多管测定也增加了检测工作量和试剂的使用量。基于此,本论文研究了一种基于特异性酶技术的大肠菌群单管定量快速检测技术,结合自制的显色培养基及快速检测仪器使用,可以实现单支反应管对大肠菌群进行定量检测。分别选择胰蛋白胨、乳糖、氯化钠作为大肠菌群基础培养基的氮源、碳源和无机盐。通过单因素实验分别验证胰蛋白胨、乳糖、氯化钠的最适添加量和最适p H值,通过正交实验进一步优化最适添加量和最适p H值。研究显色底物邻硝基苯基β-D-半乳糖苷的适宜添加量,确定适宜的显色剂浓度。研究不同种类、不同浓度的抑菌剂对杂菌的抑菌效果,选择合适的抑菌剂及添加量。确定大肠菌群选择性显色培养基的配方如下:胰蛋白胨15.0g/L,乳糖4.5g/L,氯化钠4.5g/L,磷酸氢二钾2.1g/L,磷酸二氢钾1.0g/L,脱氧胆酸钠0.2 g/L,onpg0.5g/L,p H7.0。通过研究大肠菌群快速检测方法最佳检测波长,温度、p H值对大肠菌群生长及培养液吸光度值的影响,确定最适合大肠菌群生长和水解底物检测的理化条件。通过研究大肠菌群初始接种数量与达到0.2吸光度所需时间的量化关系,建立大肠菌群单管定量快速检测技术。根据建立的大肠菌群单管定量检测技术,选择合适的光源和相关元器件,研制出大肠菌群快速检测仪器。研究结果表明,在410nm检测波长处,当大肠菌群初始接种浓度在7-10～5cfu/m L（g）范围内,大肠菌群初始接种数量与达到0.2吸光度所需时间具有良好的线性关系（R=0.995）。当菌浓度为7-10～5cfu/m L（g）时所需检测时间仅为558-275min。将公式y=-0.014x+8.909固化进软件,计算机可根据样品达到0.2吸光度所需要的时间自动计算出大肠菌群的浓度,实现单管定量。研制的大肠菌群单管定量快速检测仪的八个通道间的精密度良好,检测限为每克（毫升）样品中的大肠菌群数不能低于7个。利用大肠菌群单管定量快速检测仪对食品、环境水样进行检测,检测结果与国家标准方法比较,不存在显著性差异（P>0.05）,相对标准偏差远远低于国家标准方法。大肠菌群单管定量快速检测法具有操作简单,精确性高,数据准确性高,检测时间远小于多管发酵法,单支反应管就可以实现定量,节约试剂等优点,可以代替传统的大肠菌群多管发酵法,具有良好的应用前景。

关键词：大肠菌群大肠埃希氏菌单管定量 onpg 快速检测

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微生物质控样品检测结果分析

应用预防医学 2003年第S1期 76-77页

作者：刘水金黄英哲钟新峰广西宾阳县卫生防疫站广西宾阳县卫生防疫站 530400

世界卫生组织一九八三年第三次临床微生物学室间质量评定活动总结

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国外医学.临床生物化学与检验学分册 1985年第1期 32-34页

作者：马栋才

参加这次临床微生物室间质量评定活动者共有亚洲、大洋洲、非洲及拉丁美洲共20个国家的66个实验室,有53个实验室将其所收到的标本的鉴定结果寄回,现总结如下。

关键词：白喉杆菌实验室抗菌素菌落白喉棒杆菌金黄色葡萄球菌血琼脂培养物复方新诺明青霉素 onpg 棒状杆菌属鉴定者四环素生物型质量评定

基于生长时间光谱法的大肠菌群单管定量检测技术研究

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生命科学仪器 2011年第5期9卷 46-48页

作者：蔡尽忠庄峙厦赵丽汤新华鄢庆枇厦门华厦职业学院食品药品安全检测实验室福建厦门361024 厦门大学化工学院福建厦门361005 厦门斯坦道生物公司福建厦门361006 集美大学水产学院福建厦门361021

通过研究大肠菌群初始接种浓度与达到0.2吸光度所需时间的关系,建立基于生长时间光谱法的大肠菌群单管定量检测技术。通过与多管发酵法比较发现单管定量检测技术的相对标准偏差小于传统的多管发酵法,而且反应所需的时间短,当初始菌浓为1... 详细信息

通过研究大肠菌群初始接种浓度与达到0.2吸光度所需时间的关系,建立基于生长时间光谱法的大肠菌群单管定量检测技术。通过与多管发酵法比较发现单管定量检测技术的相对标准偏差小于传统的多管发酵法,而且反应所需的时间短,当初始菌浓为101.3cfu/mL时反应时间仅需9h,可以作为大肠菌群快速检测的方法,具有良好的应用前景。

关键词：大肠菌群 onpg 生长时间光谱法单管定量检测

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侵袭性大肠杆菌引起急性感染性腹泻2例报告

上海医学 1987年第8期 493-494页

作者：余铁甫邵义圭胡锦元顾沫芳上海市金山县卫生防疫站

侵袭性大肠杆菌(EIEC)是引起急性腹泻及食物中毒的重要病原菌,已被国际公认。国内对本菌的检出报道不多。1986年9～11月,我们先后从2例急性腹泻患者粪便中分离出本菌,兹报告如下: [例1] 蒋××,女性,24岁,农民。自诉于1986年9月11日夜... 详细信息

侵袭性大肠杆菌(EIEC)是引起急性腹泻及食物中毒的重要病原菌,已被国际公认。国内对本菌的检出报道不多。1986年9～11月,我们先后从2例急性腹泻患者粪便中分离出本菌,兹报告如下: [例1] 蒋××,女性,24岁,农民。自诉于1986年9月11日夜起发热、腹痛、腹泻,每日排便10次,明显里急后重,大便为脓血粘液便,无恶

关键词：侵袭性血清型上海市血清变种大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属大肠杆菌药敏情况抗菌药物氯胺苯醇抗菌素氯霉素细菌培养 onpg

世界卫生组织一九八四年第四次临床微生物学室间质量评定活动总结

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国际检验医学杂志 1986年第1期 26-27+49页

作者： J.Vahdepitte ,李仲兴

1984年第四次微生物学质量评定有29个国家的73个实验室参加,在本次总结前有65个实验室作了回报,这次共发出3个未知培养物,其正确鉴定结果如下。第1号培养物是从脑脊液中分离的细菌,是无乳链球菌(兰氏B群)。本菌的鉴定可参阅1983年第一... 详细信息

1984年第四次微生物学质量评定有29个国家的73个实验室参加,在本次总结前有65个实验室作了回报,这次共发出3个未知培养物,其正确鉴定结果如下。第1号培养物是从脑脊液中分离的细菌,是无乳链球菌(兰氏B群)。本菌的鉴定可参阅1983年第一次总结(见本刊1984年第3—4期,84页)。第2号培养物是从粪便中分离的细菌,是类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides)。本菌于1947年第一次报告为厌氧性副大肠杆菌C27(anaerogenic paracolon

关键词：类志贺邻单胞菌康凯宋内氏志贺氏菌单胞晶胞琼脂志贺氏菌病邻单胞菌属复方新诺明敏感试验 onpg 肠杆菌科革兰氏阴性兼性厌气杆菌无乳链球菌链球菌属菌落生物型质量评定

RaPID SS/U仪鉴定尿分离菌株之评价

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国际检验医学杂志 1988年第4期 41-42页

作者：朱文明

RaPID SS/U系统:包括含有下列11种试验的RaPID SS/U试验盘及IDS电子计算机鉴定程序.这11种试验是:onpg(β.D一半乳糖苷酶),

关键词：球菌酸杆菌革兰氏阴性杆菌革兰阴性杆菌沙雷氏菌 RaPID SS/U 大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属分离物 onpg 酵母菌 SS