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肠出血型大肠埃希菌o157:H7 ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析

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南方医科大学学报 2014年第6期34卷 904-908页

作者：韩朋孙琦赵素慧张其威万成松南方医科大学公共卫生与热带医学学院BSL-3实验室广东广州510515

目的利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(EHEC)o157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5'端与ppk基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pKD46质粒的EHEC... 详细信息

目的利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(EHEC)o157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5'端与ppk基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pKD46质粒的EHEC o157:H7 EDL933w感受态细菌,然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中;利用pKD46介导的Red重组系统,通过同源重组替换EHEC o157:H7 EDL933w ppk基因,PCR和测序验证;通过革兰染色、测D600值、吉姆萨染色比较EHEC o157:H7 EDL933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC o157:H7 EDL933w突变菌株(EHEC o157:H7 EDL933wΔppk),初步探索了EHEC o157:H7 EDL933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌o157:H7 ppk基因缺失株,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。

关键词： EHEC o157 H7 ppk基因 Red重组系统基因突变

occurrence of <i>Escherichia coli</i>o157 in Retailed-Beef and Related Meat Products in Zaria, Nigeria

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Food and Nutrition Sciences 2014年第6期5卷 481-487页

作者： Salome Y. Tafida Jacob K. P. Kwaga Mohammed Bello Junaidu Kabir Veronica J. Umoh Sabo E. Yakubu Andrew J. Nok Centre for Biotechnology Research and Training Ahmadu Bello University Zaria Nigeria Department of Livestock and Pest Control Services Federal Ministry of Agriculture Gombe Nigeria Department of Microbiology Faculty of Science Ahmadu Bello University Zaria Nigeria Department of Veterinary Public Health and Preventive Medicine Faculty of Veterinary Medicine Ahmadu Bello University Zaria Nigeria

This study evaluated retailed-beef and related meat products for E. coli o157 in Zaria, Nigeria. Sample types included raw meat, “suya” (roasted meat), “balangu” (barbequed meat), “kilishi” (spiced sun dried meat) and “dambu” (shredded fried meat). A total of 182 samples were analyzed for E. coli o157. Isolates were characterized using conventional biochemical methods and Microbact 12E test kit. Susceptibilities of the isolates to 18 commonly used antimicrobial agents were determined by the disk diffusion method. The carriage of stx1 and stx2 genes was determined by PCR. Microbact confirmed 4 E. coli isolates. All isolates exhibited multiple drug resistance to the antimicrobial agents tested. An overall prevalence of 2.2% was obtained for E. coli o157. All 4 isolates of E. coli o157 were isolated from raw meat;two of which harboured the stx1 gene.

关键词： E. coli o157 Meat Products Multiple Drug Resistance Food Safety

大肠杆菌o157多克隆抗体及食品中双抗ELISA测定方法的研究

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卫生研究 2003年第6期32卷 606-609页

作者：赵志晶刘秀梅中国疾病预防控制中心营养与食品安全所北京100050

本研究获得了抗肠出血性大肠杆菌o157:H7的多克隆抗体 ,建立了一种适宜食品样品检测的双抗ELISA检测方法。该方法对纯培养菌液检出限为 10 3 ～ 10 4 cfu ml;只对o157菌株有特异性反应 ,对非o157菌株无交叉反应 ;经过增菌 ,鸡肉与牛奶... 详细信息

本研究获得了抗肠出血性大肠杆菌o157:H7的多克隆抗体 ,建立了一种适宜食品样品检测的双抗ELISA检测方法。该方法对纯培养菌液检出限为 10 3 ～ 10 4 cfu ml;只对o157菌株有特异性反应 ,对非o157菌株无交叉反应 ;经过增菌 ,鸡肉与牛奶染菌样品中的大肠杆菌o157的检出限均为 0 1cfu g(cfu ml)。

关键词：大肠杆菌 o157 双抗体 ELISA 多克隆抗体食品检测

Prevalence, Phenotypes and Virulence Factors Characteristics of Escherichia coli o157 strains in Yuxi City

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美国中华健康卫生杂志 2005年第4期8卷 49-54页

作者： WANG Shukun PANG Bo JING Huaiqi XIANG Zhenghua YAo Yunbo LIU Hongyan LI Shunxiang Center for Disease Prevention and Control of Yuxi City Yuxi China

Detection of Verocytotoxigenic <i>Escherichia coli</i>o157 Serotype in Dairy Products in Abuja, Nigeria

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open Journal of Veterinary Medicine 2015年第11期5卷 224-228页

作者： S. I. Enem S. I. oboegbulem W. D. Nafarnda G. K. omeiza Dept. of Veterinary Public Health & Prev. Medicine University of Abuja Abuja Nigeria Dept. of Vet. Public Health & Prev. Medicine University of Nigeria Nsukka Nigeria

Ruminants are recognized as healthy carriers of Verocytotoxigenic Escherichia Coli (VTEC) organisms and as such most dairy products may provide these bacteria with favourable conditions for their growth. A cross sectional study was conducted to detect the occurrence of VTEC o157 in dairy products in the Federal Capital Territory, Abuja, Nigeria. Raw milk, Nunu and yoghurt were analyzed using standard cultural and biochemical procedures to isolate typical E. coli. Isolated E. coli samples were sub-cultured into plates of sorbitol MacConkey and Cefixime Tellurite-Sorbitol MacConkey agar. Isolates that are sorbitol negative were further characterized using commercially procured latex agglutination test kits. A total of 367 samples were analyzed out of which 3 tested positive for VTEC o157 (108 of raw milk-1 (0.93%);127 of Nunu-2 (1.57%) and 132 of yoghurt-none). There was no significant association (p > 0.05) between season and infection with VTEC o157 in dairy products. Dairy products remained a potential vehicle for VTEC o157 infection.

关键词： Detection Prevalence VTEC o157 Dairy Products

EHEC o157 △ler/stx (pBR322::stx1/2B::eae)对小鼠免疫保护作用的实验研究

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中国预防兽医学报 2007年第8期29卷 601-604页

作者：陈萍冯书章刘军孙洋祝令伟吉林农业大学食品工程学院吉林长春130118 军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062

通过粘膜免疫途径对基因工程菌EHEC o157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)进行小鼠免疫保护作用实验研究。结果表明,用EHEC o157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)灌胃免疫小鼠能够诱导小鼠产生抗EHEC o157特异性免疫应答,两次免疫后7d,免疫组血清IgG抗体显著高于对照组,14 d检测IgG抗体达到最高峰,粪便中检测到高水平的抗EHEC o157特异性IgA抗体,表明该工程菌可以诱导肠道粘膜免疫应答和系统免疫应答。EHEC o157强毒株经胃肠道途径攻毒后,一次免疫组和两次免疫组小鼠存活率(67%和78%)均高于未免疫组(50%);免疫小鼠强毒菌排菌时间大大缩短,两次免疫组攻毒后第5 d检测不到强毒菌,未免疫组排菌达10 d以上;攻毒后免疫组小鼠体重较快恢复正常水平。

关键词：出血性大肠杆菌 EHEC o157 △ler/stx (pBR322::stx1/2B::eae) 小鼠免疫

重庆市区大肠杆菌o157的生化特点、药物敏感性和致病性

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中国人兽共患病杂志 2002年第5期18卷 103-105,77页

作者：刘琪冯翔宇邓正陈磊杜成才汪德珍吴国辉李坤碧安永群重庆市疾病预防控制中心重庆市兽医防疫站

大肠杆菌o157(Escherichia coli o157,)是一种新型的致泻性大肠杆菌,是肠出血性大肠杆菌EHEC的主要血清型,能引起人类出血性腹泻,溶血性尿毒综合征(HUS),血栓性血小板减少性紫癜(TTP),甚至死亡[1].动物是其主要的宿主.我们已于2001年夏... 详细信息

大肠杆菌o157(Escherichia coli o157,)是一种新型的致泻性大肠杆菌,是肠出血性大肠杆菌EHEC的主要血清型,能引起人类出血性腹泻,溶血性尿毒综合征(HUS),血栓性血小板减少性紫癜(TTP),甚至死亡[1].动物是其主要的宿主.我们已于2001年夏季在重庆市区的养殖场动物粪便和环境中分离出该菌,现就其生化、耐药及致病性情况报告如下.

关键词：重庆大肠杆菌 o157 生化特点药物敏感性致病性

EHEC o157与宿主细胞作用的效应分子和易位分子研究进展

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中国人兽共患病学报 2007年第9期23卷 939-941页

作者：余抒毛旭虎第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室重庆400038

EHEC o157是一种重要的人兽共患病病原菌,人感染后可引发急性腹泻、出血性肠炎(HC),溶血性尿毒综合征(HUS)及血栓性血小板减少性紫癜(TTP)。重度感染可致死,死亡率达10%。[第一段]

关键词： EHEC o157 易位分子效应分子细胞作用血栓性血小板减少性紫癜溶血性尿毒综合征宿主

浙江省从病人标本检出首例o157∶H7大肠杆菌

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中国人兽共患病学报 1998年第5期14卷 6-19页

作者：施世锋孙建荣俞国强孟冬梅张渝 310006 杭州市卫生防疫站!杭州